【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及基因工程产品，更具体地，本专利技术公开了一种具有高亲和力的抗人mxa抗体或其功能性片段及其应用。
技术介绍
1、黏病毒抗性蛋白a(myxovirus resistanceprotein，mxa)是由ⅰ型干扰素诱导产生的分布于细胞质中的一种蛋白质，全长mxa蛋白由662个氨基酸组成，分子量为76kd。人类细胞用i型ifn处理会产生两种mx蛋白，分别命名为mxa和mxb。mxa有广谱抗病毒活性，可用于区分机体是否受到病毒感染的特异性指标，而mxb则没有抗病毒活性。大量研究资料表明，mxa具有生物活性稳定，抗病毒作用直接、半衰期较长，特异性好，检测方便等优点。而且mxa蛋白对病毒反应非常敏感甚至极少的病毒量即可诱导细胞表达mxa蛋白，因此mxa蛋白可用于病毒感染的早期诊断，也可用于临床病毒感染与细菌或者其他微生物感染的鉴别诊断。
2、在急诊时，快速检测机体mxa水平，以及快速判别病毒与细菌感染对于疾病诊断、合理用药、评价疗效具有重要意义。目前mxa的临床检测方法有：酶联免疫吸附实验(elisa)、荧光层析法、胶乳增强免疫比浊法。而免疫诊断中抗体的亲和力尤为重要，因此开发一种高亲和力的mxa蛋白具有重大的临床医学应用价值。
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于采用计算机辅助设计，提供一种高亲和力的抗人mxa抗体或其功能性片段，实现与人mxa蛋白特异性结合，用于体外定量检测人体样本(血清、血浆或全血)中mxa的含量，临床上主要用
2、为实现上述目的，本专利技术通过以下技术方案实现，具体如下：
3、抗人mxa抗体或其功能性片段，包括：
4、cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2和cdr-vl3，其特征在于，所述cdr-vh1～cdr-vh3为seq id no:1所示重链可变区的cdr-vh1～cdr-vh3一致的氨基酸序列或由其氨基酸序列突变而来，所述突变位点为重链可变区第29、36、62、113、116位；
5、所述cdr-vl1～cdr-vl3为seq id no:2所示轻链可变区的cdr-vl1～cdr-vl3一致的氨基酸序列或由其氨基酸序列突变而来，所述突变位点为轻链可变区第35、36、56、115位氨基酸的位置；
6、所述重链可变区第29、36、62、113、116位和轻链可变区第35、36、56、115位选自下列组合：
7、1)重链可变区第29v、36s、62d、113n、116s和轻链可变区第35g、36w、56k、115p；
8、2)重链可变区第29t、36r、62d、113n、116k和轻链可变区第35g、36n、56k、115p；
9、3)重链可变区第29t、36r、62d、113n、116d和轻链可变区第35g、36n、56k、115p；
10、4)重链可变区第29v、36s、62q、113w、116w和轻链可变区第35g、36r、56k、115p。
11、进一步地，所述cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2和cdr-vl3由kabat、chothia、imgt、abm或contact系统定义。
12、进一步地，所述cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2和cdr-vl3由imgt系统定义，所述抗体或其功能性片段包括如下互补决定区：
13、cdr-vh1：g-y-x1-f-t-x2-y-w，
14、cdr-vh2：v-y-p-g-x1-g-d-t，
15、cdr-vh3：a-r-g-y-d-x1-s-f-x2-y，
16、cdr-vl1：q-t-i-v-h-s-n-x1-x2-t-y，
17、cdr-vl2：x1-v-s，
18、和cdr-vl3：f-q-g-s-h-v-x1-p-t，
19、其中
20、
21、本专利技术发现，在各互补决定区中的上述突变位点为上述氨基酸残基时，该抗体对mxa蛋白具有更好的亲和力。
22、“cdr”在本文中用于指抗体可变序列内的“互补决定区”。重链和轻链的可变区各有3个cdr，从重链或轻链的n端开始。
23、抗原结合位点可以包括六个cdr(本专利技术中的cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2和cdr-vl3)。包含单个cdr(例如cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2和cdr-vl3)的多肽可称为“分子识别单元”。抗原-抗体复合物的晶体学分析已经证明cdr的氨基酸残基与结合的抗原形成广泛接触，其中最广泛的抗原接触是与重链cdr3。因此，分子识别单元可能主要负责抗原结合位点的特异性。一般而言，cdr残基直接且最实质性地参与影响抗原结合。
24、进一步地，所述抗体包括重链骨架区fr1-h、fr2-h、fr3-h及fr4-h和轻链骨架区fr1-l、fr2-l、fr3-l及fr4-l，其中，所述fr1-h为如seq id no:3所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；
25、所述fr2-h为如seq id no:4所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；
26、所述fr3-h为如seq id no:5所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；
27、所述fr4-h为如seq id no:6所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；
28、所述fr1-l为如seq id no:7所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；
29、所述fr2-l为如seq id no:8所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；
30、所述fr3-l为如seq id no:9所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；
31、所述fr4-l为如seq id no:10所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列。
32、进一步地，所述抗mxa抗体或其功能性片段还包含恒定区；
33、优选的，所述恒定区包括重链恒定区和/或轻链恒定区；
34、可选地，所述重链恒定区选自igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igm、ige或igd的重链恒定区；所述轻链恒定区选自κ型或λ型轻链恒定区；
35、可选地，所述恒定区的种属来源为牛、马、乳牛、猪、绵羊、山羊、大鼠、小鼠、狗、猫、兔、骆驼、驴、鹿、貂、鸡、鸭、鹅、火鸡、斗鸡或人；可选地，所述恒定区的种属来源为小鼠；
36、进一步地，所述功能性片段选自所述抗体的f(ab’)2、f本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.抗人MxA抗体或其功能性片段，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述CDR-VH1、CDR-VH2、CDR-VH3、CDR-VL1、CDR-VL2和CDR-VL3由Kabat、Chothia、IMGT、AbM或Contact系统定义。
3.根据权利要求2所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述CDR-VH1、CDR-VH2、CDR-VH3、CDR-VL1、CDR-VL2和CDR-VL3由IMGT系统定义，所述抗体或其功能性片段包括如下互补决定区：
4.如权利要求3所述的抗MxA抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体包括重链骨架区FR1-H、FR2-H、FR3-H及FR4-H和轻链骨架区FR1-L、FR2-L、FR3-L及FR4-L，其中，所述FR1-H为如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；
5.如权利要求4所述的抗MxA抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗MxA抗体或其功能性片段还包含恒定区；
6.如权利要求5所述的抗MxA抗
7.一种抗体偶联物，其特征在于，所述抗体偶联物包含权利要求1-7任一项所述的抗MxA抗体或其功能性片段以及与其偶联的偶联部分；
8.一种试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒含有如权利要求1-8任一项所述的抗MxA抗体或其功能性片段。
9.如下任一应用，其特征在于，
10.一种MxA蛋白检测方法，其特征在于，所述检测方法包括权利要求1-6任一项所述的抗MxA抗体或其功能性片段与MxA蛋白结合的过程。
...【技术特征摘要】
1.抗人mxa抗体或其功能性片段，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2和cdr-vl3由kabat、chothia、imgt、abm或contact系统定义。
3.根据权利要求2所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2和cdr-vl3由imgt系统定义，所述抗体或其功能性片段包括如下互补决定区：
4.如权利要求3所述的抗mxa抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体包括重链骨架区fr1-h、fr2-h、fr3-h及fr4-h和轻链骨架区fr1-l、fr2-l、fr3-l及fr4-l，其中，所述fr1-h为如seq id no:3所示的氨基酸序...
【专利技术属性】
技术研发人员：衡玉，王競，易维京，李伯宏，张顺，汤定斌，裴大毛，蒋诗楠，
申请(专利权)人：重庆艾生斯生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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