一种人源IgA抗体重链表达质粒及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种人源IgA抗体重链表达质粒，所述人源IgA抗体重链表达质粒含有人IgA（IgA1/IgA2）重链恒定区序列、重链可变区同源臂序列，人源IgA抗体重链可变区编码基因通过自身携带的同源序列、通过同源重组方法整合到所述人源IgA抗体重链表达质粒中。本发明专利技术提供的人源IgA抗体重链表达质粒可与抗体轻链表达质粒共转染用于人源IgA抗体的制备，具有高效、制备省时、正确率高的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术公开了一种质粒，属于核酸分子。

技术介绍

1、抗体（antibody, ab）是介导体液免疫的重要效应分子，是免疫系统在抗原刺激下，由b细胞或记忆b细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白（immunoglobulin, ig），主要分布在血清中，也分布于组织液、外分泌液及某些细胞膜表面。抗体重链分子量约为50~75 kda，由450~550个氨基酸残基组成，根据重链恒定区的差异可将其分为5类：μ链、γ链、α链、δ链和ε链，不同的重链与轻链组成完整的抗体分子，分别被称为igm、igg、iga、igd和ige。

2、iga有血清型和分泌型两种。血清型为单体，主要存在于血清中，占血清免疫球蛋白总量的10%~15%。分泌型iga（secretory iga, siga）为二聚体，由j链连接，含分泌成分（secretory component, sc），经黏膜上皮细胞分泌至外分泌液中。siga合成和分泌的部位主要在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺，主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中。siga是外分本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种人源IgA抗体重链表达质粒，其特征在于，在所述人源IgA抗体重链表达质粒依次含有抗生素抗性筛选基因、CMV启动子，携带Kozak序列元件和抗体重链信号肽的抗体先导序列元件，连接元件，重链恒定区、转录后调节序列、polyA尾，其中，在所述抗体先导序列元件的下游设置有Hpa I酶切位点，在重链恒定区的上游设置EcoRV酶切位点，所述连接元件位于Hpa I酶切位点和EcoRV酶切位点之间，所述人源IgA抗体重链表达质粒经Hpa I和EcoRV双酶切致所述连接元件被去除后，两个线性化末端用于分别与拟表达的人源IgA抗体重链可变区编码基因5’端同源重组臂和人源IgA抗体重链可变区编码基因...

【技术特征摘要】

1. 一种人源iga抗体重链表达质粒，其特征在于，在所述人源iga抗体重链表达质粒依次含有抗生素抗性筛选基因、cmv启动子，携带kozak序列元件和抗体重链信号肽的抗体先导序列元件，连接元件，重链恒定区、转录后调节序列、polya尾，其中，在所述抗体先导序列元件的下游设置有hpa i酶切位点，在重链恒定区的上游设置ecorv酶切位点，所述连接元件位于hpa i酶切位点和ecorv酶切位点之间，所述人源iga抗体重链表达质粒经hpa i和ecorv双酶切致所述连接元件被去除后，两个线性化末端用于分别与拟表达的人源iga抗体重链可变区编码基因5’端同源重组臂和人源iga抗体重链可变区编码基因3’端同源重组臂进行同源重组，所述人源iga抗体重链可变区编码基因5’端同源重组臂序列如seq idno.13 所示，所述人源iga抗体重链可变区编码基因3’端同源重组臂如seq id no.14 所示，所述抗体先导序列元件的序列如seq id no.4所示。

2. 根据权利要求1所述的人源iga抗体重链表达质粒，其特征在于，所述重链恒定区编码基因如seq id no.1 所示或如seq id no.2所示。

3. 根据权利要求1所述的人源iga抗体表达质粒系统，其特征在于，在所述重链恒定区和转录后调节序列之间设置有多克隆位点，所述多克隆位点的序列如seq id no.7所示。

4.根据权利要求1所述的人源iga抗体重链表达质粒，其特征在于，转录后调节序列为土拨鼠肝炎病毒转录后调节序列。

5.根据权利要求1所述的人源iga...

【专利技术属性】
技术研发人员：张冠英，于长明，黄平，李建民，迟象阳，孙韩聪，房婷，范鹏飞，陈郑珊，陈薇，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：