【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学，特别涉及一种长链非编码rna(lncrna)标志物，及其在制备诊断、筛查或评估急性冠状动脉综合征的产品中的应用。
技术介绍
1、心血管疾病(cardiovascular disease，cvd)是目前是全球范围内致死、致残率最高的疾病，每年因心血管病死亡人数高达总因病死亡人数的30％！急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome，acs)是最严重的心血管疾病之一，发病急、进展快，且治疗后易复发冠状动脉栓塞及不良心血管事件，是心血管病的主要死因。acs主要包括不稳定型心绞痛和急性心肌梗死，可诱发室颤等恶性心律失常、心脏破裂，危及生命。虽然，随着现代医学技术的发展，特别是经皮冠状动脉介入支架植入术的出现，极大地挽救了acs患者的生命，减少了因病死亡人数。然而，中国acs发病率和死亡率仍在逐年增加，给人民的健康造成巨大负担。因此，早期诊断和及早干预，对控制心血管疾病，特别是减少acs的发生具有重要意义。
2、临床上，acs患者确诊需结合临床表现(胸痛)心电图检查、心酶检查及冠状动脉造影检查。目前，缺乏acs特异性的诊断标志物。肌钙蛋白(ctni)是目前较为公认的诊断及鉴别acs的血清学标志，在发生胸痛的早期(2-6小时)即可升高，但其它疾病如病毒性心肌炎、心力衰竭及慢性肾功能衰竭发生时，也能引起该蛋白升高；d-二聚体和c-反应蛋白与炎症和应激有关，但这些指标参与较多的病理生理过程，心脏特异性较差，与冠脉病变程度的相关性尚有争议。冠状动脉造影是诊断冠脉狭窄病变的“金标准”，也可作
3、长链非编码rna(long noncoding rna，lncrna)是指序列长度大于200核苷酸，无编码功能蛋白质能力的非编码rna。已有充分证据证明，lncrna可在转录、转录后和表观遗传水平调控基因表达，参与多种细胞过程，对心血管病的进程具有重要调控作用。lncrnaanril在动脉粥样硬化病人中表达明显升高；抑制心脏组织中lncrna mhrt的表达，可加速心肌肥大向心力衰竭的进程；研究者发现，线粒体来源lncrna lipcar在心血管不良事件发生的早期表达较低，晚期表达增高。由于lncrna通常形成相对稳定的二级结构，因其可以稳定存在于血液及其他各种体液中，较传统的分子标志物具有更高的稳定性和特异性，可以在血液中被检测到，有望成为心血管疾病诊断及预后的新型生物学标志物。因此，鉴定和筛选外周循环中具有acs疾病特异性的lncrna标志物，对于开发acs早期诊断策略和产品具有重要价值。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的缺点与不足，本专利技术的目的在于提供一种急性冠状动脉综合征的生物标志物及其应用。该生物标志物可以用于特异性诊断、筛查或评估急性冠状动脉综合征。
2、本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
3、第一方面，本专利技术通过对确诊急性冠状动脉综合征患者和冠脉正常对照患者的外周血单个核细胞转录组进行高通量测序，筛选出一种差异表达显著的lncrna，命名为lncrna-acsd，提供了一种急性冠状动脉综合征标志物。lncrna-acsd是一个全新的、尚未报道过的lncrna分子，序列如seq id no.1所示。
4、高通量测序结果显示，lncrna-acsd在急性冠状动脉综合征患者中表达显著升高(图1)。进一步地，通过qrt-pcr在更大样本量的急性冠状动脉综合征及冠脉正常者外周血单个核细胞进行lncrna-acsd表达验证，发现lncrna-acsd在急性冠状动脉综合征中表达显著升高，差异显著(图2)；roc曲线显示lncrna-acsd在急性冠状动脉综合征的诊断中具有较好的临床价值(图3)；为明确外周血中lncrna-acsd水平对acs的诊断价值，采用qrt-pcr检测在胸痛患者外周血单个核细胞中lncrna-acsd水平，通过受试者工作特征曲线(roc)分析，发现lncrna-acsd诊断冠状动脉粥样硬化的准确度较高，可辅助诊断急性冠状动脉综合征。
5、第二方面，本专利技术提供了一种lncrna-acsd在制备如下任一项产品中的应用：
6、(1)在制备诊断急性冠状动脉综合征的产品中的应用；
7、(2)在制备筛查急性冠状动脉综合征的产品中的应用；
8、(3)在制备评估急性冠状动脉综合征风险的产品中的应用。
9、进一步的，所述产品包括检测lncrna-acsd表达水平的试剂；
10、更进一步的，所述产品包括检测lncrna-acsd表达水平的荧光定量pcr试剂；
11、更进一步的，所述检测lncrna-acsd表达水平的荧光定量pcr试剂为特异性检测lncrna-acsd表达水平的引物对，所述引物对包含正向引物(5’-tagtggtatgattctcgctttgg-3’)及反向引物(5’-cgccgattgcagtatttgtta-3’)。
12、再进一步的，所述产品为芯片、制剂、试纸条或试剂盒。
13、进一步的，所述产品的检测样本为外周静脉血；更进一步的，所述样本为外周血单个核细胞；再进一步的，所述样本为从外周静脉血分离得到的外周血单个核细胞。
14、第三方面，本专利技术提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括检测lncrna-acsd表达水平的试剂；且所述试剂盒为应用于如下任一项应用的试剂盒：
15、(1)用于急性冠状动脉综合征诊断的试剂盒；
16、(2)用于急性冠状动脉综合征筛查的试剂盒；
17、(3)用于急性冠状动脉综合征风险评估的试剂盒；
18、优选地，所述试剂盒包括特异性检测lncrna-acsd表达水平的引物对。
19、所述引物对包含正向引物(5’-tagtggtatgattctcgctttgg-3’)及反向引物(5’-cgccgattgcagtatttgtta-3’)。
20、进一步地，所述试剂盒还包括特异性检测gapdh表达水平的引物对、荧光染料。
21、优选的，所述荧光染料为sybr green荧光染料或tb green荧光染料。
22、优选的，所述的特异性检测gapdh表达水平的引物对包括gapdh正向引物(5’-gaacgggaagctcactgg-3’)和gapdh反向引物(5’-gcctgcttcaccaccttct-3’)。
23、本专利技术相对于现有技术，具有如下的优点及有益效果：
24、本专利技术证明了lncrna-acsd在急性冠状动脉综合征患者及冠脉正常者的外周血单个核细胞中存在差异，在诊断急性冠状动脉综合征临床诊断方面具有较好的价值(auc＝0.875，95％ci:0.80本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种急性冠状动脉综合征生物标志物，其特征在于：所述生物标志物为lncRNA-ACSD，所述lncRNA-ACSD的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1中所述的lncRNA-ACSD在制备如下任一项产品中的应用，其特征在于：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述产品包括检测lncRNA-ACSD表达水平的试剂。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述产品包括检测lncRNA-ACSD表达水平的荧光定量PCR试剂。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述检测lncRNA-ACSD表达水平的荧光定量PCR试剂为特异性检测lncRNA-ACSD表达水平的引物对，所述引物对包含正向引物：5’-TAGTGGTATGATTCTCGCTTTGG-3’；及反向引物：5’-CGCCGATTGCAGTATTTGTTA-3’。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述产品为芯片、制剂、试纸条或试剂盒。
7.根据权利要求2-6任一项所述的应用，其特征在于：所述产品的检测样本为外周静脉血
8.一种试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求3-5任一项中所述的试剂；且所述试剂盒为应用于如下任一项应用的试剂盒：
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括特异性检测GAPDH表达水平的引物对、荧光染料。
10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于：
...【技术特征摘要】
1.一种急性冠状动脉综合征生物标志物，其特征在于：所述生物标志物为lncrna-acsd，所述lncrna-acsd的序列如seq id no.1所示。
2.权利要求1中所述的lncrna-acsd在制备如下任一项产品中的应用，其特征在于：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述产品包括检测lncrna-acsd表达水平的试剂。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述产品包括检测lncrna-acsd表达水平的荧光定量pcr试剂。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述检测lncrna-acsd表达水平的荧光定量pcr试剂为特异性检测lncrna-acsd表达水平的引物对，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘苏东，古晓东，钟志雄，翁锐强，
申请(专利权)人：梅州市人民医院梅州市医学科学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。