【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物培育，更具体地说，它涉及一种百部内生菌burkholderia gladioli lbr03及其应用。
技术介绍
1、灰霉病是植物第二大真菌病害，由病原真菌灰葡萄孢菌(botrytis cinerea)感染引起，会随着空气和土壤传播而侵染相关植物，能在植物的不同部位和不同发育阶段进行感染，即在作物生长过程的幼苗期到成熟期整个阶段都可进行侵染传播；其寄主范围广，可导致番茄、草莓、葡萄、茄子、各种花卉等几百种重要农产品和作物发生灰霉病，对农业生产造成严重的经济损失。灰葡萄孢菌是最重要的导致收获前和采后果实严重腐烂并影响果实品质的植物病原菌之一，且其产生的botrydial毒素物质能致宿主死亡。
2、目前，主要采用农业防治、化学防治、生物防治等几种方法进行治理。但由于灰霉病抗性品种的缺乏、农业防治操作难、成本消耗大，化学防治虽见效快，但易产生药害和环境影响。相比之下，生物防治是环境友好型、绿色、高效的防治方法。生物防治技术的科学合理运用既可以降低成本，也能能够提高作物的品质，有效抵御灰霉病的侵害，保证果农获得更大利益。
3、植物内生菌是指在健康植物的内部，生命周期的部分或整个阶段定殖宿主植物的根、茎、叶、花等器官中的微生物。它们通常不会引起明显的疾病症状，能与宿主植物之间互利共生的存在，并有利于植物的生长发育、生物多样性的增加以及增强寄主植物对各种病原菌和胁迫的抵抗。植物内生细菌为宿主植物提供病害防护，也是生防菌筛选的主要来源，为新型生防制剂的开发提供了充分的资源。
4、利用生物防
5、目前，国内外针对包括灰霉病在内的植物病害的生物防治已经取得了一定的成果，它的优势也相对于其他防治上更为突出：无污染、无化学残留、减缓病害的抗性等。但植物病害生物防治中拮抗菌的选择还不够多，每种拮抗菌的稳定性差异较大，尚需要更多的候选拮抗菌，使其能够更有效防治包括灰霉病在内的更多植物病害，提升番茄等果蔬作物品质和产量。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种百部内生菌burkholderia gladioli lbr03及其应用，将百部内生菌唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(burkholderia gladioli)lbr03用于防治番茄灰霉病，能够有效提升番茄品质和产量。
2、本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种百部内生菌burkholderia gladioli lbr03及其应用，所述百部内生菌命名为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(burkholderia gladioli)lbr03，保藏编号为cgmcc no.27657，于2023年6月20日保藏于中国科学院微生物研究所，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
3、本专利技术还提供百部内生菌唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(burkholderia gladioli)lbr03的分离和提纯方法，具体包括以下步骤：
4、①样品的预处理
5、将新鲜采集的健康植株百部的根块组织样品用流水冲洗干净表面的杂质，控干水分，依次采用75％乙醇浸泡1min、2％的次氯酸钠漂洗30s、75％乙醇浸泡1min消毒处理，最后用无菌水冲洗五遍；
6、②百部内生细菌的分离
7、在无菌条件下，将预处理的百部块根组织剪取于研钵中，加入生理盐水，充分研磨成匀浆液，经稀释后，吸取上清液均匀涂布于lb固体培养基上，涂布至培养基上液体干燥为止，封口，在37℃恒温箱中培养3～5d；期间每隔12h观察待培养基上是否长处肉眼可见的单菌落；
8、③内生细菌的纯化与保存
9、当涂板平板上长出新菌落时，根据菌落的不同形态，将不同的单菌落转入新的培养基中，反复多次划线纯化得到单菌落，并进行保存，短期保存方式如下：用灭菌的接种棒，取纯化后菌株的单菌落，然后接种于lb固体斜面培养基，在37℃恒温培养箱中培养24h，于4℃冰箱中保存；长期保存方式如下：配置50％的甘油高温灭菌备用，按1：1加入已纯化的菌液和50％的甘油于2ml保存管中，混匀，液氮冷却后，置于-80℃冰箱保存。
10、本专利技术还提供百部内生菌唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(burkholderia gladioli)lbr03的应用：所述百部内生菌可用于抑制灰霉菌在离体番茄果实上的生长。
11、本专利技术进一步设置为：所述百部内生菌可用于防治番茄灰霉病害。
12、本专利技术进一步设置为：所述百部内生菌可应用于促进番茄种子的萌发和番茄植株的生长。
13、综上所述，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术从药用植物百部的块根组织内分离得到具有良好拮抗番茄灰霉病害的burkholderia gladioli lbr03。经研究发现该内生拮抗菌的抑制作用机制可使灰霉菌菌丝扭曲、畸形，直接破坏灰霉菌丝的结构形态。从而得到lbr03菌株可抑制灰霉菌的生长和分生孢子的萌发，并将其应用于抑制灰霉菌在离体番茄果实上的生长。还发现lbr03菌株能成功定殖在番茄果实和植株上，为进一步有效防治番茄灰霉病害提供有效的应用途径。此外，lbr03菌株具有固氮、溶磷的作用，对番茄种子的萌发和植株的生长具有明显的促生效果。由此可见，将lbr03菌株应用于番茄的种植上，能够有效提升番茄的品质和产量。将lbr03菌株应用于番茄的保存上，也能够延长其保鲜效果，减轻灰霉病害。
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1.百部内生菌，其特征是：所述百部内生菌命名为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)LBR03，保藏编号为CGMCCNo.27657。
2.根据权利要求1所述的百部内生菌的应用，其特征是：所述百部内生菌可用于防治番茄灰霉病害。
3.根据权利要求1所述的百部内生菌的应用，其特征是：所述百部内生菌可应用于促进番茄种子的萌发和番茄植株的生长。
【技术特征摘要】
1.百部内生菌，其特征是：所述百部内生菌命名为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(burkholderia gladioli)lbr03，保藏编号为cgmccno.27657。
2.根据权利要求1所...
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