【技术实现步骤摘要】
本专利技术属生物制剂检测
,具体涉及一种病毒制剂的定性检测方法。
技术介绍
^K^MM^MW'M^ (Ectropis obliqua nucleopolyhedrovirus,EoNPV) Mff 状病毒科,核型多角体病毒属,该病毒于1977年在我国首次发现。EoNPV是茶尺蠖的病原性 天敌,通过幼虫取食后在虫体内迅速增殖,致使其感染发病而死亡。目前这种病毒已可以通 过室内大量增殖,经配制形成产品,进行商业化生产,近年来,EoNPV作为一种高效病毒杀虫 剂在各省茶区广泛推广使用,对茶尺蠖进行有效的生物防治,产生了良好的社会、经济和生 态效益。因为这种病毒产品不同于一般的农药,它是一个活体,目前只有通过生物测定的方 法进行检测。也就是说,用病毒产品喂饲茶尺蠖幼虫,看是否发病来确定该生物农药产品是 否有效,这是因为核型多角体病毒是寄主专一性的,因而茶尺蠖病毒只能感染茶尺蠖幼虫。 这种传统的生物测定的方法使得目前在EoNPV病毒制剂的生产、使用过程中存在毒力指标 检测粗放、评价周期过长、制剂质量难以有效监控等问题。
技术实现思路
鉴于现有技术中存在的上述问题,本 ...
【技术保护点】
一种茶尺蠖核型多角体病毒的定性检测方法,其特征在于包括以下步骤:1)制备茶尺蠖核型多角体病毒单克隆抗体;2)样品检测;所述的步骤1)主要包括以下步骤:a.茶尺蠖核型多角体病毒的分离纯化;b.将纯化的茶尺蠖核型多角体病毒作为抗原对小鼠进行免疫;c.细胞融合和克隆:在加强免疫3天后取小鼠脾细胞和正处于对数生长期的骨髓瘤细胞在PEG6000的作用下进行细胞融合,每次融合后,将细胞接种于96孔培养板,用含HAT的1640完全培养基选择培养10天,然后将HAT改为HT培养1周;待细胞长至显微镜视野的1/4,取培养上清用ELISA法检测抗体,以茶尺蠖核型多角体病毒作为包被原对所选阳性细 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:肖强,付建玉,杜军利,唐美君,
申请(专利权)人:中国农业科学院茶叶研究所,
类型:发明
国别省市:86[中国|杭州]
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