【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种细胞器介导的胞内耗散多肽组装体制备方法，属于生物医药领域。
技术介绍
1、发生在热力学平衡之外的耗散自组装过程是自然系统中多种形式的适应性和智能行为的基础。耗散自组装通过从外部输入能量并耗散该能量将无序的组件变成有序结构。在耗散组装过程中，燃料消耗促进前驱体转化为亚稳态结构。活化的单体经过组装形成超分子结构，这有利于单体的自发失活和前体的重组。由此产生的动态超分子纳米结构表现出复杂的动态特性，如自我修复、自我复制和振荡。在生命系统中创建耗散组装系统是最终目标之一，并可能为人工生物材料创造提供独特的途径。尽管出现了各种各样的化学反应循环，但在活细胞中操作燃料驱动的化学反应循环仍然具有挑战性，这主要是由于反应条件的生物相容性有限或试剂的反应选择性差。
2、lps刺激的巨噬细胞具有高浓度的细胞质谷胱甘肽(gsh)和高水平的细胞内活性氧(ros)，线粒体膜是细胞内ros的重要来源。由于炎症细胞和正常细胞之间的天然线粒体膜电位差异，离域的亲脂性阳离子可以选择性富集在炎症细胞的线粒体周围。具有独特氧化还原性能的含硒化合物是一种比较有前途的生物医学材料。与甲硫氨酸亚砜还原酶对亚砜基团的还原相比，硒氧化物基团很容易被gsh还原为硒醚基团。因此，当交替暴露于ros和gsh时，硒代甲硫氨酸可以在疏水性硒醚和亲水性硒氧化物基团之间发生可逆的氧化和还原。因此，将硒代甲硫氨酸残基引入多肽中有望产生氧化还原响应性多肽组装系统。
技术实现思路
1、本专利技术目的是通过多肽耗散组装循
2、本专利技术的技术方案为：
3、一种细胞器介导的胞内耗散多肽组装体，耗散组装前体为pmseo，其结构式如下：
4、
5、一种上述细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，耗散组装前体为pmseo，耗散组装产物为pmse，制备步骤如下：
6、1)设计合成具有线粒体靶向性的3-甲基吡啶基修饰的丙氨酸非天然氨基酸；将fmoc-l-3-(3-吡啶基)-丙氨酸溶于乙腈和dmf的混合物中进行合成。然后，在fmoc-l-3-(3-吡啶基)-丙氨酸溶液中滴入碘甲烷。将fmoc-l-3-(3-吡啶基)-丙氨酸与碘甲烷的混合物在室温下搅拌8h，然后加入冰乙醚，直至出现白色沉淀。沉淀经离心收集，用冰乙醚洗涤三次。最后，冷冻干燥得到产物fmoc-l-3-(3-甲基吡啶基)-丙氨酸，无需特异性纯化即可进行固相肽合成。
7、2)之后，通过常规的fmoc固相合成法合成多肽序列nh2-imseimsee-树脂，具体操作是，称量rink树脂置于反应器中，加入二氯甲烷溶胀树脂，将相对于rink树脂4倍当量的fmoc保护的氨基酸、4倍当量的hatu和6倍当量的diea溶解于dmf中与树脂反应1.5h，用25％哌啶去除fmoc保护基团；
8、3)在合成imseimsee之后，将相对于rink树脂4倍当量的fmoc-l-3-(3-甲基吡啶基)-丙氨酸、4倍当量的hatu和6倍当量的diea溶解于dmf中与树脂反应1.5h，用25％哌啶去除fmoc保护基团后，使用切割试剂将多肽pymeimseimsee从树脂上裂解下来。将3当量的过氧化氢加入到多肽溶液pmse中，将多肽冷冻干燥除去过量的过氧化氢。
9、本专利技术的优点和有益效果是：
10、(1)本专利技术采用的多肽序列具有良好的生物相容性，生物活性等优点。(2)本专利技术所有的反应条件非常温和，制备方法简单，操作简便。(3)本专利技术得到的多肽耗散组装体能够实现线粒体靶向，具有氧化还原响应形貌转变性能。(4)本专利技术制备的多肽耗散组装体系用于制备能够调控炎症细胞的氧化应激平衡的药物或载体平台，从而实现炎症治疗的功能。
11、下面将通过实例描述，阐述本专利技术的优点和效果。
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1.一种细胞器介导的胞内耗散多肽组装体，耗散组装前体为PMSeO，其结构式如下：
2.权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，所述耗散组装前体为PMSeO，耗散组装产物为PMSe，制备步骤如下：
3.根据权利要求2所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体PMSeO以及产物PMSe的表征，包括可逆氧化还原实验、MST、圆二色光谱、原子力显微镜和透射电子显微镜的表征，各种表征方法如下：
4.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，线粒体模拟膜的制备，方法如下：
5.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体PMSeO以及产物PMSe在线粒体模拟膜存在下的表征，包括可逆氧化还原实验、圆二色光谱、共聚焦激光扫描显微镜成像的表征，各种表征方法如下：
6.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体PMSeO的体外细胞毒性的
7.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体PMSeO的细胞摄取的表征，通过流式细胞仪和共聚焦显微镜确定PMSeO的细胞摄取情况，方法如下：
8.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体PMSeO的线粒体靶向的表征，通过共聚焦显微镜观察PMSeO的线粒体靶向情况，方法如下：
9.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体PMSeO的线粒体膜电位的表征，方法如下：
10.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体PMSeO调节细胞内促炎因子的表征，通过ELISA检测验证PMSeO调节细胞内促炎因子的情况，方法如下：
...【技术特征摘要】
1.一种细胞器介导的胞内耗散多肽组装体，耗散组装前体为pmseo，其结构式如下：
2.权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，所述耗散组装前体为pmseo，耗散组装产物为pmse，制备步骤如下：
3.根据权利要求2所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体pmseo以及产物pmse的表征，包括可逆氧化还原实验、mst、圆二色光谱、原子力显微镜和透射电子显微镜的表征，各种表征方法如下：
4.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，线粒体模拟膜的制备，方法如下：
5.根据权利要求1所述的细胞器介导的胞内耗散多肽组装体的制备方法，其特征在于，得到的多肽耗散组装前体pmseo以及产物pmse在线粒体模拟膜存在下的表征，包括可逆氧化还原实验、圆二色光谱、共聚焦激光扫描显微镜成像的表征，各种表征方法如下：
6.根据权利要求1所述的细...
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