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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物基因工程,尤其涉及一种减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因及其载体、重组菌和应用。
技术介绍
1、马铃薯(solanum tuberosum),属于茄科(solanaceae)茄属(solanum)作物,是世界第三大粮食作物。
2、马铃薯种质资源丰富,其中,彩色马铃薯色泽鲜艳、营养丰富,具有较高的附加值和一定的市场发展潜力。彩色马铃薯富含花色素苷,具有抗氧化能力,在提高人体免疫力、抑制炎症反应和提高抗癌能力等方面具有重要作用。
3、据此,可对马铃薯块茎花青素调控因子进行研究鉴定及功能分析,以深入了解花青素的生物合成机制,为彩色马铃薯品种的创制提供理论基础。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种可减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因及其载体、重组菌和应用。
2、本专利技术采用以下技术方案解决上述技术问题:
3、一种减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因,所述stmyb_36基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、作为本专利技术的优选方式之一,所述stmyb_36基因的克隆步骤如下:提取彩色马铃薯总rna并反转录为cdna;设计特异性扩增引物stmyb 36-f和stmyb_36-r;以cdna为模板进行pcr扩增,获得目的基因stmyb_36;其中,特异性扩增引物stmyb_36-f和stmyb_36-r的序列分别如seq id no.2、seq
5、一种重组载体,包括上述减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因。
6、作为本专利技术的优选方式之一,所述重组载体具体为pri101-35s-stmyb_36-gfp。
7、作为本专利技术的优选方式之一,所述重组载体pri101-35s-stmyb_36-gfp的构建方法如下:利用同源重组法将stmyb_36基因序列插入到载体pri101-35s-gfp的sal i、bamh i酶切位点之间。
8、一种重组菌,包括上述减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因。
9、作为本专利技术的优选方式之一,所述重组菌的构建方法如下:将所述stmyb_36基因构建的重组载体pri101-35s-stmyb_36-gfp导入菌体。
10、所述重组载体pri101-35s-stmyb_36-gfp及对应构建的重组菌,用于验证stmyb_36基因与马铃薯块茎花青素累积之间的具体关系;经验证,本专利技术stmyb_36基因可以有效减少马铃薯块茎花青素累积。
11、对应地,本专利技术同时提供一种上述减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因的应用,即,可通过抑制stmyb_36基因的表达提升马铃薯花青素含量,为培育高花青素含量的马铃薯品种提供理论依据。
12、本专利技术相比现有技术的优点在于:本专利技术提供的stmyb_36基因可有效减少花青素累积,可通过抑制此基因表达来提升花青素含量,为培育高花青素含量的马铃薯品种提供理论依据。
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1.一种减少马铃薯块茎花青素累积的StMYB_36基因,其特征在于,所述StMYB_36基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的减少马铃薯块茎花青素累积的StMYB_36基因,其特征在于,所述StMYB_36基因的克隆步骤如下:提取彩色马铃薯总RNA并反转录为cDNA;设计特异性扩增引物StMYB_36-F和StMYB_36-R;以cDNA为模板进行PCR扩增,获得目的基因StMYB_36;其中,特异性扩增引物StMYB_36-F和StMYB_36-R的序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。
3.一种如权利要求1~2任一所述的减少马铃薯块茎花青素累积的StMYB_36基因的应用,其特征在于,通过抑制StMYB_36基因的表达提升马铃薯花青素含量,以培育高花青素含量的马铃薯品种。
4.一种重组载体,其特征在于,包括如权利要求1~2任一所述的减少马铃薯块茎花青素累积的StMYB_36基因。
5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体具体为pRI101-35S-StM
6.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体pRI101-35S-StMYB_36-GFP的构建方法如下:利用同源重组法将StMYB_36基因序列插入到载体pRI101-35S-GFP的Sal I、BamH I酶切位点之间。
7.一种重组菌,其特征在于,包括如权利要求1~2任一所述的减少马铃薯块茎花青素累积的StMYB_36基因。
8.根据权利要求7所述的重组菌,其特征在于,所述重组菌的构建方法如下:将所述StMYB_36基因构建的重组载体pRI101-35S-StMYB_36-GFP导入菌体。
...【技术特征摘要】
1.一种减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因,其特征在于,所述stmyb_36基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因,其特征在于,所述stmyb_36基因的克隆步骤如下:提取彩色马铃薯总rna并反转录为cdna;设计特异性扩增引物stmyb_36-f和stmyb_36-r;以cdna为模板进行pcr扩增,获得目的基因stmyb_36;其中,特异性扩增引物stmyb_36-f和stmyb_36-r的序列分别如seq id no.2、seq id no.3所示。
3.一种如权利要求1~2任一所述的减少马铃薯块茎花青素累积的stmyb_36基因的应用,其特征在于,通过抑制stmyb_36基因的表达提升马铃薯花青素含量,以培育高花青素含量的马铃薯品种。
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【专利技术属性】
技术研发人员:侯华兰,盛苏奥,王楠,彭雅轩,胡好,王童童,马宇,宋家凤,吕钊彦,朱晓彪,
申请(专利权)人:安徽农业大学,
类型:发明
国别省市:
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