【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，更具体地说，尤其涉及一种用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液。
技术介绍
1、我国鼻炎患者数量庞大，耳鼻喉科疾病以鼻部病变最为常见，其中急性和慢性鼻炎、急性和慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎、鼻中隔畸形等四类病人就占鼻科病人的90％以上。我国人口基数庞大，再加上工业化社会的发展，过敏性鼻炎(又称变应性鼻炎)的致病因素不断增加，该病的发病率正逐年上升。环境污染是现代社会的必然产物，这个问题不解决，就意味着鼻炎出现的无穷可能性，就意味着人们对鼻炎药物的需求无止境。故过敏性鼻炎的早发现、早诊断、早用药非常必要。
2、过敏性鼻炎的诊断主要借助患者的临床症状体征、病史和过敏原检测结果，精准诊断出致病过敏原是过敏性鼻炎防治关键。血清过敏原特异性ige(sige)检测技术临床广泛应用，但诊断局部鼻黏膜高ige水平的ar(lar)受限。鼻分泌物sige检测对ar和lar诊断均有价值，但缺乏行业诊断标准和规范。明确鼻分泌物sige诊断标准将为ar的诊断带来革命性进步。同时，国际专家共识也指出ar患者鼻腔局部炎症状态是制定药物治疗的关键。基于鼻分泌物生物标志物发现有助于实时评估ar鼻腔局部炎症并指导用药选择。
3、血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体，人和动物的血清常用以进行各种血清学试验，帮助诊断疾病。血清的成份虽然有几百种之多，但是其相对组成还是比较稳定，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。另外，由于其他被检测物在提取时(如机械破碎、超声破碎，裂解液裂解等)，提取液成分的差异，最终提取程度有差异，从而难以
4、但是，由于鼻分泌物中某些待检蛋白含量非常少，且分泌物中含有组织液、黏蛋白、溶菌酶、及各种组织细胞裂解后的产物，其中包括蛋白酶和核酸酶，可以分解部分蛋白和核酸。因此，比分泌物的稳定性不如血清的稳定性。例如鼻分泌物中的嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ecp)和髓过氧化物酶(mpo)在鼻分泌物中会随时间降解。室温下，一周后降解掉50％以上。因此，鼻分泌物的保存成为需要解决的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于，提供一种用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，解决
技术介绍
中提出的问题，提高鼻分泌物样本的长期稳定性，最终实现稳定的获得适用于鼻局部检测的鼻分泌物样本。
2、为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，包括缓冲剂、蛋白保护剂、高分子聚合物、非离子表面活性剂、氨基酸、螯合剂、多元醇和防腐剂。
3、由于个体差异，鼻分泌物的ph值是变化的，缓冲剂能将鼻分泌物的ph值稳定在中性左右；蛋白保护剂能使鼻分泌物中的蛋白保持活性；高分子聚合物可以将鼻分泌物样本中的干扰蛋白包裹或聚合在一起，消除纤维蛋白等大分子蛋白的干扰，使得杂蛋白无法通过弱相互作用于抗原/抗体，同时减少样本与抗体之间可能的非特异性抗原/抗体结合；非离子表面活性剂可以提高鼻分泌物中的蛋白分散性，与多元醇协同作用，减少蛋白团聚的形成，最大限度的暴露抗原表位，从而提高检测结果的准确性；氨基酸能是蛋白质的基本构件分子，蛋白质由氨基酸构成，氨基酸类物质可提高蛋白质结构(抗原)的稳定性；螯合剂能与mg2+、ca2+、fe2+等二价金属离子结合，多数核酸酶类和有些蛋白酶类的作用需要mg2+，螯合剂可作为核酸酶、蛋白酶的抑制剂，保护鼻分泌物中的抗原不受核酸酶或蛋白酶的降解；多元醇类物质可增大保存液密度，使得鼻分泌物中的蛋白可以以悬浮的形式存在，减少蛋白团聚、交联的概率，进而达到稳定保存鼻分泌物的效果，避免因蛋白结块或团聚时间过长后会导致蛋白结合牢固，从而很难通过震荡再次分散的问题；防腐剂可以用来防治蛋白保存液长菌变质。
4、具体的，本专利技术用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液的组成为：摩尔浓度为10mm～100mm的缓冲剂、按照质量体积分数计的如下成分：0.1％～5％的蛋白保护剂、0.05％～5％的高分子聚合物、0.05％～5％的非离子表面活性剂、1％～10％的氨基酸、0.05％～5％的螯合剂、为1％～10％的多元醇和0.05％～5％的防腐剂。
5、优选地，所述缓冲剂包括mes缓冲液、磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、hepes缓冲液和tris缓冲液中的任意一种，保存液整体的ph为6.0～9.0。
6、优选地，所述蛋白保护剂包括蛋白类保护剂及多糖类保护剂；其中，蛋白类保护剂选自牛血清白蛋白、胎牛血清白蛋白、鱼明胶、明胶和酪蛋白中的至少一种，多糖类保护剂选自海藻糖、蔗糖、葡萄糖、乳糖、核糖中的至少一种。
7、优选地，所述高分子聚合物包括聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种；其中，聚乙二醇的重均分子量在2000～20000范围内，聚乙烯吡咯烷酮的重均分子量在10000～360000范围内。
8、优选地，所述非离子表面活性剂包括吐温表面活性剂、triton表面活性剂中的至少一种。
9、优选地，所述氨基酸包括甘氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、谷氨酰胺和赖氨酸中的至少一种。
10、优选地，所述螯合剂包括枸橼酸或其盐、edta或其盐中的至少一种。
11、优选地，所述多元醇包括山梨醇、丙三醇、木糖醇、麦芽糖醇和甘露醇中的至少一种。
12、优选地，所述防腐剂包括proclin 300、硫柳汞钠、叠氮钠及庆大霉素中的至少一种。
13、借助本专利技术提供的技术方案，使用本专利技术蛋白保存液来保存鼻分泌物样本，不但能够使得鼻分泌物中的蛋白可以以悬浮的形式存在，减少蛋白团聚、交联的概率，进而达到稳定保存鼻分泌物的效果，而且在离开低温环境后能够更长时间地保持生物活性物质的活性，从而能够解决现有技术中鼻分泌物离开低温储藏的环境后容易丧失活性的问题。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：包括缓冲剂、蛋白保护剂、高分子聚合物、非离子表面活性剂、氨基酸、螯合剂、多元醇和防腐剂。
2.根据权利要求1所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述蛋白保存液的组成为：摩尔浓度为10mM～100mM的缓冲剂、按照质量体积分数计的如下成分：0.1％～5％的蛋白保护剂、0.05％～5％的高分子聚合物、0.05％～5％的非离子表面活性剂、1％～10％的氨基酸、0.05％～5％的螯合剂、为1％～10％的多元醇和0.05％～5％的防腐剂。
3.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述缓冲剂包括MES缓冲液、磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、HEPES缓冲液和Tris缓冲液中的任意一种，保存液整体的pH为6.0～9.0。
4.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述蛋白保护剂包括蛋白类保护剂及多糖类保护剂；其中，蛋白类保护剂选自牛血清白蛋白、胎牛血清白蛋白、鱼明胶、明胶和酪蛋白中的至少一种，多糖类保护剂选自海藻糖、蔗糖、葡萄糖
5.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述高分子聚合物包括聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种；其中，聚乙二醇的重均分子量在2000～20000范围内，聚乙烯吡咯烷酮的重均分子量在10000～360000范围内。
6.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述非离子表面活性剂包括吐温表面活性剂、Triton表面活性剂中的至少一种。
7.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述氨基酸包括甘氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、谷氨酰胺和赖氨酸中的至少一种。
8.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述螯合剂包括枸橼酸或其盐、EDTA或其盐中的至少一种。
9.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述多元醇包括山梨醇、丙三醇、木糖醇、麦芽糖醇和甘露醇中的至少一种。
10.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述防腐剂包括Proclin 300、硫柳汞钠、叠氮钠及庆大霉素中的至少一种。
...【技术特征摘要】
1.一种用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：包括缓冲剂、蛋白保护剂、高分子聚合物、非离子表面活性剂、氨基酸、螯合剂、多元醇和防腐剂。
2.根据权利要求1所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述蛋白保存液的组成为：摩尔浓度为10mm～100mm的缓冲剂、按照质量体积分数计的如下成分：0.1％～5％的蛋白保护剂、0.05％～5％的高分子聚合物、0.05％～5％的非离子表面活性剂、1％～10％的氨基酸、0.05％～5％的螯合剂、为1％～10％的多元醇和0.05％～5％的防腐剂。
3.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述缓冲剂包括mes缓冲液、磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、hepes缓冲液和tris缓冲液中的任意一种，保存液整体的ph为6.0～9.0。
4.根据权利要求1或2所述的用于鼻分泌物样本保存的蛋白保存液，其特征在于：所述蛋白保护剂包括蛋白类保护剂及多糖类保护剂；其中，蛋白类保护剂选自牛血清白蛋白、胎牛血清白蛋白、鱼明胶、明胶和酪蛋白中的至少一种，多糖类保护剂选自海藻糖、蔗糖、葡萄糖、乳糖、核糖中的至少一种。
5.根据权利要求1或2所...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈琰，陈建军，柯义凡，
申请(专利权)人：武汉中敏泰克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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