【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学，具体涉及一种基于plla微球的骨支架制备方法。
技术介绍
1、骨组织工程为骨缺损的修复开辟了新的路径，它包括种子细胞、生物活性因子、支架材料三个方面，其中骨支架作为种子细胞和生长因子的载体，为种子细胞提供三维空间、营养和氧气，同时为废物运输提供通道，而且还要模拟周围组织的力学性能给新骨生长提供支撑，是骨组织工程的关键。
2、现有技术在制备plla骨支架方面存在以下一些缺陷：生物活性不足：传统的plla骨支架在表面没有引入生物活性因子或细胞黏附基质，对细胞的黏附、增殖和分化能力有限，有效促进骨组织的再生和修复。降解速率不匹配：传统的plla骨支架降解速率较慢，与骨组织的再生速度不匹配。这可能导致支架在早期阶段过于稳定，无法为新骨提供足够的支撑，而在较长时间后则可能导致支架过快降解，影响骨再生的质量和稳定性。缺乏持久性：传统的plla骨支架在长时间使用后可能会出现材料降解和结构疏松的问题，导致支架的稳定性下降和骨再生效果的减弱。
3、为此提出一种基于plla微球的骨支架制备方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于：为解决上述
技术介绍
中提到的问题，本专利技术提供了一种基于plla微球的骨支架制备方法。
2、本专利技术为了实现上述目的具体采用以下技术方案：
3、一种基于plla微球的骨支架制备方法，包括以下步骤：
4、步骤s1：通过单一热致相分离法，以聚左旋乳酸(plla)为原料，二氧六环和水为溶剂，制备
5、步骤s2：对plla大孔支架的表面进行改性；
6、步骤s3：引导细胞分化和骨组织再生；
7、步骤s4：将改性后的支架与骨髓基质细胞或其他目标细胞进行体外细胞培养；
8、步骤s5：通过检测细胞的矿物质沉积、碱性磷酸酶(alp)活性和细胞形态等指标，评估细胞对支架的反应。
9、进一步地，所述步骤s1中，包括如下操作步骤：
10、步骤s1.1：准备所需的聚左旋乳酸(plla)、二氧六环和水；
11、步骤s1.2：按照质量分数为5％的比例，将适量的plla加入二氧六环和水的混合溶剂中，并搅拌使其充分溶解得到plla溶液；
12、步骤s1.3：测量plla溶液的浊点；
13、步骤s1.4：在浊点的基础上，继续加热plla溶液，测量溶液的凝胶点；
14、步骤s1.5：将凝胶温度和凝胶时间设置好后，将plla溶液注入模具中，确保溶液能够填满模具空间；
15、步骤s1.6：将装有plla溶液的模具置于恒温水槽或烘箱中，根据凝胶温度和凝胶时间的设定，加热溶液使其凝；
16、步骤s1.7：等待凝胶完成后，将模具从恒温水槽或烘箱中取出，让其冷却到室温，使得plla固化，孔隙结构和纳米纤维固定，将制备好的plla支架从模具中取出，可以进行后续的洗涤和干燥等处理，最终得到含有100μm以上大孔、同时孔壁上分布均匀的纳米纤维的plla支架。
17、进一步地，所述步骤s2中包括以下操作步骤：
18、步骤s2.1：准备成骨细胞外基质溶液：将取自成骨细胞外基质中的骨基质和骨细胞外基质混合，得到成骨细胞外基质溶液；
19、步骤s2.2：制备plla纳米纤维：将plla溶于二氧六环中，利用静电纺丝技术制备plla纳米纤维；
20、步骤s2.3：成骨细胞外基质溶液涂覆plla纳米纤维：将成骨细胞外基质溶液涂覆在plla纳米纤维上，在烘箱中干燥，得到表面改性的plla纳米纤维。
21、进一步地，所述步骤s5包括细胞形态学观察、细胞增殖活性检测、细胞分化能力分析、细胞与支架表面相互作用的研究。
22、进一步地，所述步骤s3前需要对支架进行预处理，且等待改性完成后，对支架进行冷冻干燥、交联和辐照处理。
23、进一步地，所述步骤s2.2中在溶液中添加静电纺丝助剂。
24、本专利技术的有益效果如下：
25、本专利技术中使用到的plla是一种生物可降解和生物相容性良好的材料，可以被人体组织逐渐吸收和代谢，避免了对人体产生长期的异刺激。采用改性方法，可以在plla骨支架表面进行成骨外细胞基质(ecm)涂覆和静电纺丝沉积等处理，从而实现对支架表面结构和性能的调控。这样可以增强支架的生物活性、细胞黏附和骨再生能力。此外通过改性处理，可以在plla骨支架表面引入生物活性分子、药物或生长因子等，从而促进骨细胞的黏附、增殖和分化，以及骨组织的再生，有助于加速骨支架的降解和替代过程，同时促进新骨的形成和修复。
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1.一种基于PLLA微球的骨支架制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于PLLA微球的骨支架制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，包括如下操作步骤：
3.根据权利要求1所述的一种基于PLLA微球的骨支架制备方法，其特征在于，所述步骤S2中包括以下操作步骤：
4.根据权利要求1所述的一种基于PLLA微球的骨支架制备方法，其特征在于，所述步骤S5包括细胞形态学观察、细胞增殖活性检测、细胞分化能力分析、细胞与支架表面相互作用的研究。
5.据权利要求3所述的一种基于PLLA微球的骨支架制备方法，其特征在于，所述步骤S3前需要对支架进行预处理，且等待改性完成后，对支架进行冷冻干燥、交联和辐照处理。
6.根据权利要求1所述的一种基于PLLA微球的骨支架制备方法，其特征在于，所述步骤S2.2中在溶液中添加静电纺丝助剂。
【技术特征摘要】
1.一种基于plla微球的骨支架制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于plla微球的骨支架制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，包括如下操作步骤：
3.根据权利要求1所述的一种基于plla微球的骨支架制备方法，其特征在于，所述步骤s2中包括以下操作步骤：
4.根据权利要求1所述的一种基于plla微球的骨支架制备方法，其特征在于，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱菲，
申请(专利权)人：苏州芳华美容医院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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