【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品安全，具体为一种高灵敏度的食品安全检测方法。
技术介绍
1、抗生素和食源性致病菌是食品安全危害因子检测的重要指标，也是引发食品安全问题的重要因素，其中氯霉素类药物是应用广泛的抗菌素，曾对畜禽疾病控制和治疗起重要作用，但如果氯霉素类药物在食品中的残留量超标，在人体内长期积累，会对人体有严重的副作用，引起人体造血再生性障碍、消化系统损伤、神经系统疾病等疾病，因此探索出一种操作简便、反应快速并且测定结果准确度较高的检测方法具有一定的应用价值。
2、目前，检测氯霉素残留量含量的主要方法有：微生物测定法、色谱法、免疫分析法、生物传感器技术，但这些方法都需要昂贵的仪器，前处理复杂、操作过程繁琐、测试时间长，对检测人员要求高，选择性较差且不能满足现场快速检测的需求；化学发光功能化纳米材料可以将纳米材料独特的光学、磁学和催化等性能与化学发光的优点相融合，不但可以起到增强化学发光检测体系灵敏度的作用，还可以赋予纳米材料化学发光性能，对于生物、医药领域和食品安全检测领域都具有重要意义；电化学分析检测氯霉素具有操作简便、选择性较高、准确度较高和检测时间较短等多种优势；目前多数采取的是单一方法检测，检测准确度有待提升。
3、本专利技术通过制备化学发光功能化纳米材料修饰电极，利用电化学技术对食品中的添加剂进行检测，灵敏度高、可靠性好，拓展了化学发光检测的应用范围，同时也为食品安全提供了技术保障。
技术实现思路
1、本专利技术解决的技术问题是：提供了一种高灵敏度的食品
2、本专利技术的技术方案是：
3、一种高灵敏度的食品安全检测方法，检测方法包括以下步骤：
4、(1)将鲁米诺衍生物加入到去离子水中，分散均匀，加入质量浓度为2-5％的壳聚糖的冰醋酸溶液，在100-120℃下搅拌均匀，然后加入质量浓度为0.2-0.4％的氯金酸，持续搅拌1-3h，自然冷却，得到功能化纳米金储备液。
5、(2)将功能化纳米金储备液加入到氧化石墨烯的水溶液中，在20-35℃下搅拌24-48h，接着在转速为5000-8000r/min的条件下离心2-4次，每次离心10-30min，在ph为5-6的磷酸氢钠-柠檬酸盐缓冲液中沉淀分散，然后加入辣根过氧化物酶，继续搅拌，在3-6℃下静置，离心纯化得到电极修饰液。
6、(3)将玻碳电极在湿润的纳米氧化铝粉末的抛光布上进行抛光处理成镜面，在去离子水中超声波清洗20-40min，接着置于质量分数为20-40％的硝酸、10-30％的盐酸和30-70％的去离子水的混合液中浸泡5-15min，再用去离子水充分冲洗，自然晾干后浸泡于电极修饰液中，得到修饰工作电极。
7、(4)将对位酚类衍生物、待检测食品添加剂、邻氨基苯酚加入到ph为7-8的磷酸盐缓冲液中，配置成食品检测溶液，然后加入修饰工作电极、参比电极和对电极，采用循环伏安法进行检测。
8、优选的，所述步骤(1)中鲁米诺衍生物为鲁米诺、异鲁米诺或n-(4-氨丁基)-n-乙基异鲁米诺中的任意一种。
9、优选的，所述步骤(1)中壳聚糖和氯金酸的质量分别为鲁米诺衍生物质量的3-8％和150-180％。
10、优选的，所述步骤(2)中氧化石墨烯和辣根过氧化物酶的质量分别为功能化纳米金储备液的90-110％和10-20％。
11、优选的，所述步骤(3)中电极修饰液的浓度为2-15mg/ml。
12、优选的，所述步骤(4)中对位酚类衍生物为4-碘苯酚、4-叔丁基苯酚或4-甲基苯酚的任意一种。
13、优选的，所述步骤(4)中食品检测溶液中对位酚类衍生物的浓度为1×10-6-1×10-3mol/l；邻氨基苯酚的浓度为2.1-3.5×10-4mol/l。
14、优选的，所述步骤(4)中待检测食品添加剂为氯霉素，其浓度为1.2×10-5-6.2×10-5mol/l。
15、优选的，所述步骤(4)中循环伏安法的扫描速率为40-60mv/s，扫描范围为-0.5-0v。
16、优选的，所述步骤(4)中参比电极为ag/agcl电极，对电极为铂丝电极。
17、本专利技术的有益的技术效果是：
18、首先将鲁米诺衍生物和壳聚糖作为共还原剂，还原氯金酸得到功能化纳米金储备液，接着加入到氧化石墨烯的水溶液中，再将辣根过氧化物酶沉淀固载于氧化石墨烯的表面，得到电极修饰液，接着在将电极修饰液固定在玻碳电极表面，加入到磷酸盐缓冲液、对位酚类衍生物、氯霉素和邻氨基苯酚配置成的食品检测溶液，采用循环伏安法进行检测。
19、氧化石墨烯是一种新型的、具有二维层片结构的零带隙半导体纳米材料，具有较大的比表面积和较优良的电子传递性能，金属纳米金颗粒能促进石墨烯片分离，两者复合对发光材料分子的富集发生协同作用，从而增强反应体系的化学发光信号，提高灵敏度；鲁米诺功能化纳米金与通过共价键作用直接键合在氧化石墨烯纳米材料的表面，辣根过氧化物酶由于表面含有丰富的环氧基、羟基和羧基等含氧官能团，能与氧化石墨烯通过共价作用固载，无需任何表面修饰和桥连试剂，将化学发光分子和催化剂分子同时修饰到表面，可能会得到一种具有优异发光性能和酶特异性的新型纳米电极修饰液，具有检测限低，灵敏度高的优势；将对位酚类衍生物作为化学发光增强剂和稳定剂，引入到化学发光体系中，将瞬时化学发光转变为稳态化学发光，显著延长了化学发光的反应时间，从而可以有效避免鲁米诺型化学发光试剂瞬时发光的缺点，设备相对简单，且不需要外部激发光源。
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1.一种高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，检测方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中鲁米诺衍生物为鲁米诺、异鲁米诺或N-(4-氨丁基)-N-乙基异鲁米诺中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中壳聚糖和氯金酸的质量分别为鲁米诺衍生物质量的3-8％和150-180％。
4.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中氧化石墨烯和辣根过氧化物酶的质量分别为功能化纳米金储备液的90-110％和10-20％。
5.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中电极修饰液的浓度为2-15mg/mL。
6.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中对位酚类衍生物为4-碘苯酚、4-叔丁基苯酚或4-甲基苯酚的任意一种。
7.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中食品检测溶液
8.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中待检测食品添加剂为氯霉素，其浓度为1.2×10-5-6.2×10-5mol/L。
9.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中循环伏安法的扫描速率为40-60mV/s，扫描范围为-0.5-0V。
10.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中参比电极为Ag/AgCl电极，对电极为铂丝电极。
...【技术特征摘要】
1.一种高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，检测方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中鲁米诺衍生物为鲁米诺、异鲁米诺或n-(4-氨丁基)-n-乙基异鲁米诺中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中壳聚糖和氯金酸的质量分别为鲁米诺衍生物质量的3-8％和150-180％。
4.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中氧化石墨烯和辣根过氧化物酶的质量分别为功能化纳米金储备液的90-110％和10-20％。
5.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中电极修饰液的浓度为2-15mg/ml。
6.根据权利要求1所述的高灵敏度的食品安全检测方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱熠，程明明，
申请(专利权)人：九江市检验检测认证中心，
类型：发明
国别省市：
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