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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因检测,具体涉及检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性的试剂、试剂盒及应用。
技术介绍
1、药物个体化差异是指不同个体间药物疗效与安全性的不一致性,这种差异带来的后果可能是药物治疗效果不理想,耽误最佳治疗时间,又或是造成血药浓度过高,出现药物不良反应概率增大,严重危害患者生命健康。
2、研究表明,影响药物个体化差异的因素有很多,如体重,年龄,基础疾病,多药使用等。另外,基因突变引起的基因多态性作为造成药物作用个体差异更加重要的成因却尚未得到足够重视。而随着人类基因组学与药物基因组学的发展,越来越多的研究表明,药物个体化差异和基因多态性关系密切。一项数据显示,药物基因组学对药物疗效和安全性的影响概率高达80%。
3、具体来说,体内参与药物吸收和处置的药物代谢酶、转运蛋白及相关受体基因多态性的改变是导致药物反应个体差异的决定性因素。如cyp2c19酶是人体中重要的药物代谢酶,代谢多达15%已知的治疗窗口狭窄药物,包括华法林、氯吡格雷和卡马西平等。其编码基因的多态性导致cyp2c19酶活性的个体差异,使人群出现超快代谢者(um)、快代谢者(em)、中间代谢者(im)和慢代谢者(pm)4种表型。不同基因表型对其相应药物的代谢速率产生了不同影响,从而影响药效发挥或引发毒副作用。因此,在临床上根据基因表型的不同调整用药剂量对保障患者生命健康,提高药物治疗的安全性、有效性以及成本效益具有重要意义。
4、基于此,自2006年起,用于个体化用药指导的基因检测产品包括cyp2c9,cyp2d6
5、目前关于cyp2c19基因单核苷酸多态性的检测方法主要包括基因测序法、普通荧光定量pcr法、基因芯片检测法等等。然而上述方法均具有操作复杂,检测周期长,所需检测的仪器设备复杂等缺点,且检测结果特异性及灵敏度均较低。
技术实现思路
1、本专利技术的第一方面的目的,在于提供一种检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性的试剂。
2、本专利技术的第二方面的目的,在于提供一种试剂盒。
3、本专利技术的第三方面的目的,在于提供一种检测系统。
4、本专利技术的第四方面的目的,在于提供本专利技术第一方面的试剂、第二方面的试剂盒、和/或第三方面的检测系统的应用。
5、本专利技术的第五方面的目的,在于提供一种非疾病诊断治疗目的的检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性的方法。
6、为了实现上述目的,本专利技术所采取的技术方案是:
7、本专利技术的第一个方面,提供一种检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性的试剂,包含:检测cyp2c19*17基因的探针和/或用于扩增cyp2c19*17基因的引物对;
8、所述检测cyp2c19*17基因的探针包括野生型探针和突变型探针;
9、所述野生型探针的序列如seq id no.19所示;
10、所述突变型探针的序列如seq id no.20所示;
11、所述野生型探针中的1个或多个位置的碱基被锁核酸修饰;
12、所述突变型探针中的1个或多个位置的碱基被锁核酸修饰;
13、所述用于扩增cyp2c19*17基因的引物对选自a)~f)中任意一组:
14、a)所述引物对的序列如seq id no.1、2所示;
15、b)所述引物对的序列如seq id no.3、4所示;
16、c)所述引物对的序列如seq id no.5、6所示;
17、d)所述引物对的序列如seq id no.7、8所示;
18、e)所述引物对的序列如seq id no.9、10所示;
19、f)所述引物对的序列如seq id no.11、12所示。
20、优选地,所述用于扩增cyp2c19*17基因的引物对选自a)~c)中任意一组。
21、优选地,所述用于扩增cyp2c19*17基因的引物对为b)。
22、优选地,所述野生型探针的5’端起第3位和第13位中的至少一个碱基被锁核酸修饰;进一步优选地,所述野生型探针的5’端起第3位和第13位的碱基被锁核酸修饰。
23、优选地,所述突变型探针的5’端起第3位和第13位中的至少一个碱基被锁核酸修饰;进一步优选地,所述突变型探针的5’端起第3位和第13位的碱基被锁核酸修饰。
24、优选地,所述野生型探针和突变型探针的两端分别标记有荧光报告基团、和荧光淬灭基团。
25、优选地,所述野生型探针和突变型探针的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。
26、进一步优选地,所述野生型探针的5’端标记的荧光报告基团不同于突变型探针的5’端标记的荧光报告基团。
27、优选地,所述荧光报告基团为texas red、fam、hex、vic、rox和cy5中的至少一种。
28、优选地,所述荧光淬灭基团为bhq1、tamra、bbq-650、bhq2和bhq3中的至少一种。
29、优选地,所述野生型探针的5’端标记有cy5,所述突变型探针的5’端标记有texasred。
30、优选地,所述野生型探针和突变型探针的3’端标记有bhq2。
31、本专利技术的第二个方面,提供一种试剂盒,包含本专利技术第一个方面的试剂。
32、优选地,所述试剂盒还包含taq酶、dntps、mg2+和缓冲液中的至少一种。
33、优选地,所述试剂盒用于检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性。
34、本专利技术的第三个方面,提供一种检测系统,包含本专利技术第一个方面的试剂和第二个方面的试剂盒中的至少一种、以及荧光定量pcr仪。
35、优选地,所述检测系统用于检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性。
36、本专利技术的第四个方面,提供第一个方面的试剂、第二个方面的试剂盒、和/或第三个方面的检测系统在(1)~(2)中任一种中的应用;
37、(1)制备检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性的产品中的应用;
38、(2)非疾病诊断治疗目的的cyp2c19*17基因单核苷酸多态性检测。
39、本专利技术的第五个方面,提供一种非疾病治疗诊断目的的检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性的方法,包括采用本专利技术第一个方面的试剂、本专利技术第二个方面的试剂盒、和/或本专利技术第三个方面的检测系统的步骤。
40、优选地,所述方法包括如下步本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种试剂,包含:检测cyp2c19*17基因的探针和/或用于扩增cyp2c19*17基因的引物对;
2.根据权利要求1所述的试剂,其特征在于:
3.根据权利要求1或2所述的试剂,其特征在于:
4.根据权利要求3所述的试剂,其特征在于:
5.一种试剂盒,其特征在于:包含权利要求1~4中任一项所述的试剂。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包含Taq酶、dNTPs、Mg2+和缓冲液中的至少一种。
7.一种检测系统,包含权利要求1~4中任一项所述的试剂和权利要求5~6中任一项所述的试剂盒中的至少一种、以及荧光定量PCR仪。
8.权利要求1~4中任一项所述的试剂、权利要求5~6中任一项所述的试剂盒、和/或权利要求7所述的检测系统在(1)~(2)中任一种中的应用;
9.一种非疾病治疗诊断目的的检测cyp2c19*17基因单核苷酸多态性的方法,包括采用权利要求1~4中任一项所述的试剂、权利要求5~6中任一项所述的试剂盒、权利要求7所述的检测系统的步骤。
10.
...【技术特征摘要】
1.一种试剂,包含:检测cyp2c19*17基因的探针和/或用于扩增cyp2c19*17基因的引物对;
2.根据权利要求1所述的试剂,其特征在于:
3.根据权利要求1或2所述的试剂,其特征在于:
4.根据权利要求3所述的试剂,其特征在于:
5.一种试剂盒,其特征在于:包含权利要求1~4中任一项所述的试剂。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包含taq酶、dntps、mg2+和缓冲液中的至少一种。
7.一种检测系统,包含...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄穗汕,林子维,陈红英,郝宇,倪世明,李慧贤,
申请(专利权)人:广州白云山拜迪生物医药有限公司,
类型:发明
国别省市:
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