【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业微生物，更具体的说是涉及一种枯草芽孢杆菌及其在植物真菌病害防治中的应用。
技术介绍
1、植物真菌病是由植物病原真菌引起的病害，约占植物病害的70～80％。一种作物上可发现几种甚至几十种真菌病害。常表现为霜霉、白粉、白锈、黑粉、锈粉、烟霉、黑痣、霉状物、蘑菇状物、棉絮状物、颗粒状物、绳索状物、粘质粒和小黑点等病征。真菌病害的症状与病原真菌的分类有密切关系，真菌病害严重影响着农业生产领域的发展。
2、在玉米生产中，玉米茎腐病是危害玉米种植的主要植物真菌病害之一，玉米茎腐病容易引起玉米倒伏、果穗枯萎，为机械化收割造成障碍，增加生产经济损失。玉米茎腐病的病原菌主要有三种类型：镰孢菌、腐霉菌、腐霉菌和镰孢菌复合侵染。我国大多数地区中，以腐霉菌和镰孢菌为主。禾谷镰孢是一种具有腐生性质的镰孢菌真菌，能在恶劣的环境中生存，在活体或者死亡的植株体上都可以寄生。禾谷镰孢形成的孢子，都可利用降雨和大风两种方法加以传播，而密度相对大的分生孢子则可利用暴雨迸溅进行传播。
3、目前，由于真菌性病害的气流和水流传播较突出，一般多采用化学药剂进行保护性防治，或通过改进栽培管理措施加以防治。化学防治虽然操作简单，效果显著，但存在会破坏环境的缺点；改进栽培管理技术对发病率的改善效果不明显。植物根际细菌是主要生长在植物根际土壤的细菌，与植物根系相互影响并提高植物生长速率，芽孢杆菌属和假单胞菌属是最早的植物根际细菌研究对象。芽孢杆菌可以在严酷的自然环境中产生芽孢，以便存续至今，故被广泛研究。在多数植物的根际土壤中大多都可以发现
4、因此，如何提供一种能够有效防控植物真菌病害，并且具有较广抑菌谱，能够达到良好植物真菌病害防治效果的枯草芽孢杆菌及其微生物菌剂是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了一种能够有效防控植物真菌病害，并且具有较广抑菌谱，能够达到良好植物真菌病害防治效果的枯草芽孢杆菌及其微生物菌剂，该菌株从玉米根际土壤中分离得到，对多种植物真菌病害具有良好的防治效果。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、一种枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)a3，分类命名为枯草芽孢杆菌bacillussubtilis，保藏日期为2021年11月22日，保藏号为cgmcc no.23953，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
4、该菌株16srdna序列如seq id no.1所示。
5、该枯草芽孢杆菌的形态特征为革兰氏阳性菌，细胞形态为杆状，菌落为为灰白色，不透明、表面干燥皱缩，边缘褶皱微微泛黄。能在ph6～9之间正常生长繁殖，生长温度为28～42℃。来源于感茎腐病严重的玉米根际土壤。
6、所述枯草芽孢杆菌在制备防治植物真菌病害药剂中的应用。
7、一种防治植物真菌病害的药剂，所述药剂所包括：枯草芽孢杆菌a3。
8、以上方案达到的技术效果是：与现有枯草芽孢杆菌相比，本专利技术能够达到优秀的田间防治效果，并且作用对象广泛，具有较广的抑菌谱。
9、进一步地，防治植物真菌病害的药剂还包括分散剂、紫外线保护及和成膜剂；其中，分散剂为cmc-na、紫外保护剂为山梨醇，二者的重量配比为3:1.5。成膜剂中壳聚糖质量浓度2％，戊二醛交联剂占壳聚糖质量的1.5％，成膜剂以使药剂全部覆盖玉米种子为最适用量。
10、一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
11、1)培养枯草芽孢杆菌a3，培养后进行发酵；
12、2)称取对应重量份数的枯草芽孢杆菌a3、分散剂、紫外线保护剂、成膜剂，混合均匀，得混合物；
13、3)将混合物与玉米种子按照1:50的比例进行包衣，即制得枯草芽孢杆菌菌剂。
14、进一步地，步骤1)中所述将枯草芽孢杆菌a3培养为在培养基中培养，所述培养基成分包括：蛋白胨5～15g/l，硫酸镁1～5g/l，蔗糖10～50g/l；ph值为6～9。所述发酵培养基成分优选包括：蛋白胨15g/l，硫酸镁1g/l，蔗糖30g/l，ph值为8。
15、进一步地，步骤1)具体操作为：将所述枯草芽孢杆菌接种至发酵培养基，在温度28～42℃、转速160～220rpm的条件下培养24～72h，得到发酵培养液；装液量为75ml/250ml～150ml/250ml，接种量为4.0～10.0％；
16、进一步地，所述发酵条件优选为：在温度37℃、转速220rpm、初始ph为8的条件下培养72h，装液量优选为125ml/250ml，接种量优选为10.0％。
17、所述枯草芽孢杆菌以种子液的形式接种至发酵培养基；所述种子液的接种量为4.0～10.0％，优选为10％；
18、所述种子液的制备方法优选包括：将所述枯草芽孢杆菌接种于种子培养基中培养，得到所述种子液；所述种子培养基优选包括：胰蛋白胨8.0～12.0g/l，氯化钠4.0～10.0g/l，酵母膏5～10.0g/l，ph6～9，更优选为蛋白胨10.0g/l，氯化钠10.0g/l，酵母膏5g/l，ph为7。
19、所述种子培养的温度优选为35～40℃，更优选为37℃，时间优选为12～24h，更优选为12h，转速优选为150～220rpm，更优选为220rpm。
20、综上所述，本专利技术通过筛选、培育出一种具有较广抗菌谱的枯草芽孢杆菌，能够有效防治植物真菌病害，尤其对禾谷镰孢、大斑病菌、层出镰孢、圆斑病菌、拟轮枝镰孢、新月弯孢具有良好的防治效果。本专利技术提供了一种能够达到良好植物真菌病害防治效果的枯草芽孢杆菌及其微生物菌剂。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)A3，分类命名为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis，保藏日期为2021年11月22日，保藏号为CGMCC No.23953，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌，其特征在于，该菌株16SrDNA序列如SEQ IDNo.1所示。
3.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌在制备防治植物真菌病害药剂中的应用。
4.一种防治植物真菌病害的药剂，其特征在于，所述药剂所包括：枯草芽孢杆菌A3。
5.根据权利要求4所述的一种防治植物真菌病害的药剂，其特征在于，还包括分散剂、紫外保护剂和成膜剂；
6.权利要求4-5任一所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
7.根据权利要求6所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于：
8.根据权利要求6所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于：
9.根据权利要求6所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于：<...
【技术特征摘要】
1.一种枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)a3，分类命名为枯草芽孢杆菌bacillussubtilis，保藏日期为2021年11月22日，保藏号为cgmcc no.23953，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌，其特征在于，该菌株16srdna序列如seq idno.1所示。
3.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌在制备防治植物真菌病害药剂中的应用。
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【专利技术属性】
技术研发人员：邢继红，贾师奇，张康，司贺龙，杜月，曹宏哲，董金皋，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：
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