【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种土壤中拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法，属于植物生物技术的植物基因工程领域。
技术介绍
1、拟南芥又名阿拉伯芥、鼠耳芥、阿拉伯草，是一种小型开花植物，它作为一种模式生物，被广泛地应用于植物遗传学、细胞生物学、分子生物学，以及群体进化学等方面的研究中。可以说，植物科学的许多研究领域，都是首先以拟南芥为研究对象进行的，等研究方法和研究体系成熟后，再向其他物种推广。
2、拟南芥转化最便捷的方法为花序侵染法，用抽薹开花的花序做转基因的受体进行侵染，将花序浸泡在含有农杆菌的侵染液中数分钟，将植株上所有的花骨朵和花蕾侵染完全，待果荚成熟收获后即可进行筛选。拟南芥（载体植物抗性为卡那霉素）的筛选一般是在含卡那霉素的培养基上进行，需要首先配置培养基，灭菌后待温度降至合适的温度后加入卡纳霉素后倒板，然后对收获的拟南芥种子进行灭菌处理后播至含卡纳霉素的培养基上，一段时间后观察生长出的拟南芥苗子状态挑选出抗性苗再进行阳性鉴定。此种方法不仅耗时耗力，而且种子灭菌容易污染，影响抗性苗的筛选，因此本领域技术人员希望找到一种更省时省力的方法进行拟南芥筛选。
技术实现思路
1、为解决上述问题，本专利技术提供一种土壤中拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法，所述土壤中拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法包括以下步骤：
2、s1：将混合营养土的蛭石装到10*10*8的方盆里；
3、s2：将经过低温储存的待筛选拟南芥种子均匀地洒在土壤表面，每盆约播种1000颗左右，播种完毕后在表面喷洒4
4、s3：将待筛选拟南芥放置在25℃培养室里进行培养，待筛选拟南芥刚长出2片真叶时，用卡那霉素连续喷3～5次（每天一次），可筛选出阳性苗；
5、s4：将抗性苗移入新盆土中生长，待抗性苗在3-4周龄时，采0.5cm2左右叶片进行dna提取及鉴定。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种土壤中拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法，其特征在于：
2.如权利要求1所述的拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法，其特征在于S3中卡那霉素的浓度为600mg/L，60µl 浓度为100mg/ml卡那霉素加入至10ml水中。
3.如权利要求1所述的拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法，其特征在于S1中土壤混合比例为营养土∶蛭石=1∶2，土壤中含水量大约为30%左右。
4.如权利要求1所述的拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法，其特征在于S3中拟南芥培养条件为光∶暗周期比16∶8，湿度为60%，温度为25℃。
【技术特征摘要】
1.一种土壤中拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法，其特征在于：
2.如权利要求1所述的拟南芥卡那霉素抗性筛选的方法，其特征在于s3中卡那霉素的浓度为600mg/l，60µl 浓度为100mg/ml卡那霉素加入至10ml水中。
3.如权利要求1所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：祝艺懿，先志强，谭婷婷，
申请(专利权)人：葆光生物技术研究重庆有限公司，
类型：发明
国别省市：
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