【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体涉及卵磷脂小体染色试剂、制备方法和染色方法。
技术介绍
1、前列腺液中的卵磷脂小体的数量是诊断前列腺炎的重要指标，卵磷脂小体是前列腺正常功能的产物，合成精液的重要部分。
2、目前，前列腺液检测普遍采用的是湿片镜检的方法，如血细胞计数板法镜检常被用于前列腺按摩液(eps)常规检查。检查指标包括卵磷脂小体，根据卵磷脂小体在视野中的分布多少判定前列腺炎的严重程度，占屏幕的25％为+，50％为++，75％为+++，100％为++++，其中+++、++++为正常，+、++为异常。但卵磷脂小体为白色折光小球，直接取前列腺液涂片镜检时，前列腺液中的卵磷脂小体因其形态与前列腺液中的其他有形物质难以区分，做出准确的识别有很大困难。同时识别出的卵磷脂小体是依据极高的镜检经验做出判断，需要相关从业人员经过一系列培训，且涉及人工智能的机器视觉识别未染色的卵磷脂小体时难度大。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供卵磷脂小体染色试剂、制备方法和染色方法，本专利技术提供的卵磷脂小体染色试剂染色效率快，便于镜检时自动对焦，便于镜检时人工或仪器快速准确识别。
2、本专利技术提供了三苯甲烷类碱性染料和/或呫吨类染料在制备卵磷脂小体染色试剂或试剂盒中的应用。
3、现有的前列腺液镜检方法下，前列腺液中的卵磷脂小体识别难度大，对从业人员培训耗时长。与其他染色试剂相比，采用三苯甲烷类碱性染料、呫吨类染料对前列腺液进行染色后可有效的提高人工镜
4、在一些实施例中，所述呫吨类染料包括呫吨类酸性染料和呫吨类碱性染料，所述卵磷脂小体染色试剂或试剂盒中包括如下①～④中至少一项：
5、①、三苯甲烷类碱性染料中的至少一种；
6、②、呫吨类酸性染料中的至少一种；
7、③、呫吨类碱性性染料中的至少一种；
8、④、三苯甲烷类碱性染料和呫吨类碱性染料的混合物。
9、实验表明，三苯甲烷类酸性染料并不能使卵磷脂小体上色。且在单独染色能使卵磷脂小体上色的染料中，当两种或两种以上酸碱性质不相同的染料混合时，染料无染色效果或染色效果不佳。采用上述染色试剂能够更好的实现对卵磷脂小体的染色效果，提高其识别效率，从而获得更准确的技术效果。
10、在一些具体实施例中，所述三苯甲烷类碱性染料包括结晶紫、孔雀石绿、乙基紫、碱性蓝、碱性蓝7和碱性绿1中的至少一种；
11、所述呫吨类酸性染料包括伊红y，所述呫吨类碱性染料包括罗丹明类和/或吡罗红。
12、卵磷脂小体染色试剂，包括如下(1)～(4)中任意一项的染料：
13、(1)、三苯甲烷类碱性染料中的至少一种；
14、(2)、呫吨类碱性染料中的至少一种；
15、(3)、呫吨类酸性染料中的至少一种；
16、(4)、三苯甲烷类碱性染料和呫吨类碱性染料的混合物。
17、在一些实施例中，所述染料的工作浓度不低于0.02wt％。
18、进一步地，所述染料的工作浓度为0.039wt％～0.667wt％。
19、实验表明，在染料浓度较高时染色后背景噪音较大，卵磷脂小体往往与背景在一起难以分辨，随着浓度降低背景变的清晰，卵磷脂小体易于观察，但随着浓度的继续降低，会观察到染色效果开始变得不佳，上色模糊，又会提升分辨出卵磷脂小体的难度。
20、进一步优选的，所述染料的工作浓度为0.222wt％～0.4wt％。试验表明，在此浓度范围内，所述染料对卵磷脂小体的染色效果更佳，卵磷脂小体易于观察，从而获得更准确的技术效果。
21、在一些具体实施例中，所述染料为结晶紫，所述染料的工作浓度为0.222wt％。
22、实验表明，所述染料在此浓度染色效果最佳，染色背景最清晰，染色对比度最高，卵磷脂小体更易于观察，从而获得更准确的技术效果。
23、在一些具体实施例中，所述染料为孔雀石绿、乙基紫、罗丹明、吡罗红或伊红y，其工作浓度为0.25wt％，实验表明，在此工作浓度下，所述染料与样本混合后在染色效果较好。
24、在一些实施例中，所述三苯甲烷类碱性染料包括结晶紫、孔雀石绿、乙基紫、碱性蓝、碱性蓝7和碱性绿1中的至少一种；
25、所述呫吨类酸性染料包括伊红y，所述呫吨类碱性染料包括罗丹明类和/或吡罗红。
26、本专利技术提供了所述的卵磷脂小体染色试剂的制备方法，包括取溶剂和如下ⅰ～ⅳ中任意一项混合后获得所述卵磷脂小体染色试剂：
27、ⅰ、三苯甲烷类碱性染料中的至少一种；
28、ⅱ、呫吨类碱性染料中的至少一种；
29、ⅲ、呫吨类酸性染料中的至少一种；
30、ⅳ、三苯甲烷类碱性染料和呫吨类碱性染料的混合物。
31、优选地，所述溶剂包括水、醇类或醇的水溶液。
32、在一些具体实施例中，每1l卵磷脂小体染色试剂由10g结晶紫和余量的水组成；
33、在一些具体实施例中，每1l卵磷脂小体染色试剂由20g罗丹明b和余量的水组成；
34、在一些具体实施例中，每1l卵磷脂小体染色试剂由10g罗丹明b、2.5g结晶紫和余量的水组成；
35、在一些具体实施例中，每1l卵磷脂小体染色试剂由10g伊红y、500ml乙醇和余量的水组成。
36、本专利技术提供了卵磷脂小体的染色方法，包括取所述的卵磷脂小体染色试剂或所述制备方法制得的卵磷脂小体染色试剂与样本混匀、涂片、镜检。
37、在一些实施例中，所述卵磷脂小体染色试剂与所述样本的体积比为1：(1～100)。
38、在一些具体实施例中，所述卵磷脂小体染色试剂为2wt％结晶紫溶液，所述卵磷脂小体染色试剂与所述样本的体积比1：(4～8)。
39、实验表明，与其他染色方法相比，采用上述卵磷脂小体染色试剂和体积比的染色方法下，所述卵磷脂小体的染色背景噪音小，卵磷脂小体易于观察，从而获得更准确的镜下观察效果。
40、优选地，所述卵磷脂小体染色试剂与所述样本的体积比1：8。
41、本专利技术提供了三苯甲烷类碱性染料、呫吨类染料在制备卵磷脂小体染色试剂或试剂盒中的应用，同时提供了卵磷脂小体染色试剂及其制备方法和染色方法。本专利技术提供的卵磷脂小体染色试剂实现了对前列腺液中的卵磷脂小体的快染色，有利于人工镜下观察，实现自动镜检下自动对焦，有利于人工智能识别，从而提高从业人员的快速判读和结果准确性。
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1.三苯甲烷类碱性染料和/或呫吨类染料在制备卵磷脂小体染色试剂或试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述呫吨类染料包括呫吨类酸性染料和呫吨类碱性染料，所述卵磷脂小体染色试剂或试剂盒中包括如下①～④中至少一项：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，
4.卵磷脂小体染色试剂，其特征在于，包括如下(1)～(4)中任意一项的染料：
5.根据权利要求4所述的卵磷脂小体染色试剂，其特征在于，所述染料的工作浓度不低于0.02wt％。
6.根据权利要求4或5所述的卵磷脂小体染色试剂，其特征在于，
7.权利要求4～6任一项所述的卵磷脂小体染色试剂的制备方法，其特征在于，包括取溶剂和如下Ⅰ～Ⅳ中任意一项混合后获得所述卵磷脂小体染色试剂：
8.卵磷脂小体的染色方法，其特征在于，包括取权利要求4～6任一项所述的卵磷脂小体染色试剂或权利要求7所述的制备方法制得的卵磷脂小体染色试剂与样本混匀、涂片、镜检。
9.根据权利要求8所述的染色方法，其特征在于，所述卵磷脂小体染色试剂与所述样本
...【技术特征摘要】
1.三苯甲烷类碱性染料和/或呫吨类染料在制备卵磷脂小体染色试剂或试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述呫吨类染料包括呫吨类酸性染料和呫吨类碱性染料，所述卵磷脂小体染色试剂或试剂盒中包括如下①～④中至少一项：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，
4.卵磷脂小体染色试剂，其特征在于，包括如下(1)～(4)中任意一项的染料：
5.根据权利要求4所述的卵磷脂小体染色试剂，其特征在于，所述染料的工作浓度不低于0.02wt％。
【专利技术属性】
技术研发人员：赵健，徐尚，孙武举，秦岩辉，李凯歌，吴书莹，张硕，王则宇，杨红云，付光宇，杨增利，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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