【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物和细胞生物学领域，具体涉及一种用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备拟胚体的方法。
技术介绍
1、诱导多能干细胞或胚胎干细胞可以通过特定培养条件形成拟胚体。拟胚体是在体外一定条件下自发形成的类似早期胚胎的球体结构，包括外胚层、中胚层和内胚层三个胚层，具有早期胚胎发生过程中形态及分子变化特点。利用诱导多能干细胞和胚胎干细胞制备拟胚体在研究胚胎和器官发育、构建类器官和疾病模型、再生医学及细胞治疗等方面应用前景广泛。
2、目前常见的拟胚体制备方法主要有静态悬浮培养、离心法、旋转悬浮培养、悬挂滴片法等。以超低黏附培养板为主的静态悬浮培养虽然能大规模生成拟胚体，但其形成的拟胚体形态和球径差异大、均一性较差，且培养板需经特殊处理，成本较高；一种诱导多能干细胞快速高效制备拟胚体的方法(cn111647552 a)使用离心法制备拟胚体，其离心后需要将细胞群收集并重悬，操作复杂，且细胞团易分散；悬挂滴片法形成的拟胚体虽然均一性较好，但操作复杂，不易大规模培养；旋转悬浮培养虽较静态悬浮培养更为适合大规模生产，但需要特殊的生物反应器，生产成本较高；用诱导多能干细胞或胚胎干细胞快速高效制备拟胚体的方法(cn111139218 a)中使用的水平摇动培养法虽然能单次大规模生产拟胚体，但生成的球体均一性较差。以上方法均难以在降低成本的同时实现简便、快速制备均一化的拟胚体。
3、因此，亟待开发一种能够简便、快速制备拟胚体的方法，同时保证拟胚体的体积大小均一化程度较高。
技术实现思路
...【技术保护点】
1.一种用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述细胞解离试剂为适宜解离诱导多能干细胞或胚胎干细胞中的一种。
3.根据权利要求2所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述细胞解离试剂为GCDR或ACCUTASE解离试剂。
4.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞便捷高效制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，步骤S2中稀释后细胞浓度为1000～100000个细胞/mL。
5.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述细胞培养板为96孔U型微孔板或384孔U型微孔板。
6.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述细胞培养基为适宜诱导多能干细胞或胚胎干细胞形成拟胚体的所有培养基。
7.根据权利要求6所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚
8.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述步骤S2中，接种细胞量为2×103个细胞/孔。
9.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述步骤S3中，离心转速条件为800rpm/分钟，离心时长为3分钟。
10.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述步骤S4中，培养时长为24h。
...【技术特征摘要】
1.一种用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述细胞解离试剂为适宜解离诱导多能干细胞或胚胎干细胞中的一种。
3.根据权利要求2所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述细胞解离试剂为gcdr或accutase解离试剂。
4.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞便捷高效制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，步骤s2中稀释后细胞浓度为1000～100000个细胞/ml。
5.根据权利要求1所述的用诱导多能干细胞或胚胎干细胞制备均一化拟胚体的方法，其特征在于，所述细胞培养板为96孔u型微孔板或384孔u型微孔板。
6.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈学军，魏月，刘占彪，靳倩，张瑞华，李丽琴，石童，石晶晶，宗星星，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院防化研究院，
类型：发明
国别省市：
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