【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、抗体(诸如igg)对其抗原的敏锐特异性使抗体成为治疗剂的首要靶向平台；然而，igg的典型血清半衰期为至少三周，对于放射性同位素(包括α发射同位素，诸如ac-225，和β发射同位素，诸如lu-177和y-90)的递送是不利的，这特别是由于暴露延长和慢性脱靶毒性。工程化的较小抗体形式(例如，单体scfv、仅重链抗体或单结构域抗体片段)的出现提供了对形式较小(例如，15kda至30kda)并且血清半衰期短得多(例如，30分钟至2小时)的全尺寸(full-size)抗体(例如，igg(约150kda))的敏锐特异性(bates a,power,c,antibodies(basel)8:28(2019))。遗憾的是，由于保留和肿瘤摄取较差，这些短半衰期不允许足够长的时间来实现有效的靶标结合，并且此外，肾系统对这些小抗体形式的血浆清除可能导致肾组织中的同位素积聚以及有问题的脱靶毒性。
2、225-ac是α发射放射性同位素中最具细胞毒性的放射性同位素之一，并且单个衰变事件可以通过引起双链dna断裂和随后的细胞死亡来有效破坏癌细胞。α发射放射性同位素的效力使它们作为细胞杀伤剂而具有吸引力，能够克服响应于其他疗法所观察到的获得性抗性。然而遗憾的是，由于体内不同位置的衰变事件，关于全身施用以及在靶组织与非靶组织中实现所需剂量测定，仍然存在许多挑战。α发射放射性核素作为靶向治疗剂的应用的关键是能够调节子体核素在体内的分布以便限制毒性。这继而与母体核素的产生时间、治疗剂施用时间、子体核素的衰变路径和半衰期、循环时间以及递送媒
3、关于在治疗剂中使用具有α发射放射性同位素的抗体和抗体片段的另一个令人困惑的问题是，干扰放射性衰变可能特别损害抗体组分和靶向序列，甚至在治疗之前。在可以将α发射体标记的抗体片段施用于患者之前，可能发生抗体片段的放射分解，从而减少靶向的量(参见例如，larsen r,bruland o,j labelled cmpd radiopharm.36:1009-18(1995))，并且在治疗性给药所需的较高比活性下，免疫反应性可能随着放射化学质量而迅速下降。salako等人,j nucl med.39(4):667-670(1998)。例如，α发射体释放的高电离密度在1,000戈瑞(gy)或更高的剂量下经由放射分解损害同位素标记的fab片段的免疫反应性。类似地，在超过1,200gy的剂量下观察到α发射同位素标记的抗体的显著放射分解(zalutsky m等人,j nucl med.42(10):1508-15(2001))。因此，鉴定α发射放射性同位素的适当的靶向递送媒介物并不简单。
4、此外，靶向放射镜递送平台(包括α发射和β发射放射性同位素)还存在其他问题，在设计此类平台时需要同时优化，例如免疫原性、特异性、组织穿透、稳定性、制造的简易性和可接受的治疗窗。
技术实现思路
1、本专利技术涉及免疫缀合物或放射性免疫缀合物、包含它们的组合物以及使用此类免疫缀合物和组合物的方法。本专利技术的免疫缀合物和组合物具有多个用途，例如，用于递送放射性同位素以杀伤靶细胞(例如，表达放射性免疫缀合物所结合的靶抗原的癌细胞)；用于检测和表征对象体内的恶性细胞(例如，靶抗原表达)；以及用于诊断和治疗多种疾病和病状，诸如例如癌症、肿瘤和涉及表达抗原的细胞的其他生长异常。
2、本专利技术通过特异性递送平台组分的选择和特定组合解决了在体内α粒子发射体的靶向递送中固有的许多挑战。本专利技术的发射α粒子的放射性同位素递送平台提供相较于传统igg更短的半衰期，但相比于较小单体抗体片段形式更长的半衰期。此类半衰期允许降低由α发射体引起的毒性，同时使抗体片段在体内保留足够长的时间以发挥治疗活性。例如，本公开的发射α粒子的放射性同位素递送平台表现出增强的肿瘤靶向和减少的在放射敏感性组织(诸如骨髓和肾)中的积聚。另外且令人惊讶的是，本专利技术的发射α粒子的放射性同位素递送平台表现出针对具有不同抗原密度的肿瘤的优异的肿瘤结合和标记性质，这可能是一些免疫缀合物的一些用途的限制。
3、在一个方面，本文描述了一种免疫缀合物，其包含：a)抗原结合区；b)免疫球蛋白重链恒定区；和c)螯合剂；其中免疫缀合物的分子量介于60kda与110kda之间。在某些实施方案中，抗原结合区包含scfv多肽或vhh多肽。在某些实施方案中，抗原结合区包含scfv多肽。在某些实施方案中，抗原结合区包含vhh多肽。在某些实施方案中，抗原结合区是人源化的。在某些实施方案中，抗原结合区特异性结合her2或dll3。在某些实施方案中，抗原结合区特异性结合her2。在某些实施方案中，免疫缀合物的抗原结合区包含：a)重链cdr1，其包含seq id no:21所示的氨基酸序列；b)重链cdr2，其包含seq id no:22所示的氨基酸序列；和c)重链cdr3，其包含seq id no:23所示的氨基酸序列，并且结合her2。在某些实施方案中，免疫缀合物的抗原结合区包含与seq id no:20所示的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％或100％同一性并且结合her2的序列。在某些实施方案中，抗原结合区特异性结合dll3。在某些实施方案中，免疫缀合物的抗原结合区包含：a)重链cdr1，其包含seqid no:31所示的氨基酸序列；b)重链cdr2，其包含seq id no:32所示的氨基酸序列；和c)重链cdr3，其包含seq id no:33所示的氨基酸序列，并且结合dll3。在某些实施方案中，免疫缀合物的抗原结合区包含与seq id no:30所示的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％或100％同一性并且结合dll3的序列。在某些实施方案中，免疫球蛋白重链恒定区包含免疫球蛋白的ch2结构域、免疫球蛋白的ch3结构域或免疫球蛋白的ch2和ch3结构域。在某些实施方案中，免疫球蛋白重链恒定区包含免疫球蛋白的ch2和ch3结构域。在某些实施方案中，免疫球蛋白重链恒定区是人免疫球蛋白重链恒定区。在某些实施方案中，免疫球蛋白重链恒定区是iga、igg1、igg2、igg3或igg4同种型。在某些实施方案中，免疫球蛋白重链恒定区是igg1同种型。在某些实施方案中，免疫球蛋白重链恒定区是igg4同种型。在某些实施方案中，免疫球蛋白重链恒定区包含降低免疫球蛋白重链恒定区的效应子功能或改变免疫缀合物与新本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种免疫缀合物，其包含：a)抗原结合区；b)免疫球蛋白重链恒定区；和c)螯合剂；其中所述免疫缀合物的分子量介于60kDa与110kDa之间。
2.如权利要求1所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含scFv多肽或VHH多肽。
3.如权利要求1所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含scFv多肽。
4.如权利要求1所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含VHH多肽。
5.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区是人源化的。
6.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区特异性结合HER2或DLL3。
7.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区特异性结合HER2。
8.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含：a)重链CDR1，其包含SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列；b)重链CDR2，其包含SEQ ID NO:22所示的氨基酸序列；和c)重链CDR3，其包含SEQ ID NO:23所示的氨基酸序列，并且结合
9.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含与SEQ IDNO:20所示的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％或100％同一性并且结合HER2的序列。
10.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区特异性结合DLL3。
11.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含：a)重链CDR1，其包含SEQ ID NO:31所示的氨基酸序列；b)重链CDR2，其包含SEQ ID NO:32所示的氨基酸序列；和c)重链CDR3，其包含SEQ ID NO:33所示的氨基酸序列，并且结合DLL3。
12.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含与SEQ IDNO:30所示的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％或100％同一性并且结合DLL3的序列。
13.如权利要求1至12中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含免疫球蛋白的CH2结构域、免疫球蛋白的CH3结构域或免疫球蛋白的CH2和CH3结构域。
14.如权利要求1至12中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含免疫球蛋白的CH2和CH3结构域。
15.如权利要求1至14中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区是人免疫球蛋白重链恒定区。
16.如权利要求1至15中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区是IgA、IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同种型。
17.如权利要求1至15中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区是IgG1同种型。
18.如权利要求1至15中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区是IgG4同种型。
19.如权利要求1至18中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含降低所述免疫球蛋白重链恒定区的效应子功能或改变所述免疫缀合物与新生儿Fc受体(FcRn)的结合的对一个或多个氨基酸残基的改变。
20.如权利要求1至18中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含降低所述免疫球蛋白重链恒定区的效应子功能并且改变所述免疫缀合物与新生儿Fc受体(FcRn)的结合的对一个或多个氨基酸残基的改变。
21.如权利要求1至18中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含降低所述免疫球蛋白重链恒定区的效应子功能的对一个或多个氨基酸残基的改变。
22.如权利要求1至18中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含改变所述免疫缀合物与新生儿Fc受体(FcRn)的结合的对一个或多个氨基酸残基的改变。
23.如权利要求19至22中任一项所述的免疫缀合物，其中降低所述免疫球蛋白重链恒定区的所述效应子功能的所述对一个或多个氨基酸残基的改变是降低补体依赖性细胞毒性(CDC)、抗体依赖性细胞-细胞毒性(ADCC)、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP或其组合的改变。
24.如权利要求19至23中任一项所述的免疫缀合物，其中降低所述免疫球蛋白重链恒定区的所述效应子功能的所述对一个或多个氨基酸残基的改变选自由根据EU编号的以下组成的列表：(a)297A、297Q、297G或297D；(b)279F、279K或279L；(c)228P；(d)235A、235...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种免疫缀合物，其包含：a)抗原结合区；b)免疫球蛋白重链恒定区；和c)螯合剂；其中所述免疫缀合物的分子量介于60kda与110kda之间。
2.如权利要求1所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含scfv多肽或vhh多肽。
3.如权利要求1所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含scfv多肽。
4.如权利要求1所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含vhh多肽。
5.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区是人源化的。
6.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区特异性结合her2或dll3。
7.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区特异性结合her2。
8.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含：a)重链cdr1，其包含seq id no:21所示的氨基酸序列；b)重链cdr2，其包含seq id no:22所示的氨基酸序列；和c)重链cdr3，其包含seq id no:23所示的氨基酸序列，并且结合her2。
9.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含与seq idno:20所示的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％或100％同一性并且结合her2的序列。
10.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区特异性结合dll3。
11.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含：a)重链cdr1，其包含seq id no:31所示的氨基酸序列；b)重链cdr2，其包含seq id no:32所示的氨基酸序列；和c)重链cdr3，其包含seq id no:33所示的氨基酸序列，并且结合dll3。
12.如权利要求1至4中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区包含与seq idno:30所示的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％或100％同一性并且结合dll3的序列。
13.如权利要求1至12中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含免疫球蛋白的ch2结构域、免疫球蛋白的ch3结构域或免疫球蛋白的ch2和ch3结构域。
14.如权利要求1至12中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含免疫球蛋白的ch2和ch3结构域。
15.如权利要求1至14中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区是人免疫球蛋白重链恒定区。
16.如权利要求1至15中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区是iga、igg1、igg2、igg3或igg4同种型。
17.如权利要求1至15中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区是igg1同种型。
18.如权利要求1至15中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区是igg4同种型。
19.如权利要求1至18中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含降低所述免疫球蛋白重链恒定区的效应子功能或改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的对一个或多个氨基酸残基的改变。
20.如权利要求1至18中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含降低所述免疫球蛋白重链恒定区的效应子功能并且改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的对一个或多个氨基酸残基的改变。
21.如权利要求1至18中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含降低所述免疫球蛋白重链恒定区的效应子功能的对一个或多个氨基酸残基的改变。
22.如权利要求1至18中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫球蛋白重链恒定区包含改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的对一个或多个氨基酸残基的改变。
23.如权利要求19至22中任一项所述的免疫缀合物，其中降低所述免疫球蛋白重链恒定区的所述效应子功能的所述对一个或多个氨基酸残基的改变是降低补体依赖性细胞毒性(cdc)、抗体依赖性细胞-细胞毒性(adcc)、抗体依赖性细胞吞噬作用adcp或其组合的改变。
24.如权利要求19至23中任一项所述的免疫缀合物，其中降低所述免疫球蛋白重链恒定区的所述效应子功能的所述对一个或多个氨基酸残基的改变选自由根据eu编号的以下组成的列表：(a)297a、297q、297g或297d；(b)279f、279k或279l；(c)228p；(d)235a、235e、235g、235q、235r或235s；(e)237a、237e、237k、237n或237r；(f)234a、234v或234f；(g)233p；(h)328a；(i)327q或327t；(j)329a、329g、329y或329r；(k)331s、(l)236f或236r；(m)238a、238e、238g、238h、238i、238v、238w或238y；(n)248a；(o)254d、254e、254g、254h、254i、254n、254p、254q、254t或254v；(p)255n；(q)256h、256k、256r或256v；(r)264s；(s)265h、265k、265s、265y或265a；(t)267g、267h、267i或267k；(u)268k、(v)269n或269q；(w)270a、270g、270m或270n；(x)271t、(y)272n；(z)292e、292f、292g或292i；(aa)293s；(bb)301w；(cc)304e；(dd)311e、311g或311s；(ee)316f；(ff)328v；(gg)330r；(hh)339e或339l；(ii)343i或343v；(jj)373a、373g或373s；(kk)376e、376w或376y；(ll)380d；(mm)382d或382p；(nn)385p；(oo)424h、424m或424v；(pp)434i；(qq)438g；(rr)439e、439h或439q；(ss)440a、440d、440e、440f、440m、440t或440v；(tt)k322a；(uu)l235e；(vv)l234a和l235a；(ww)l234a、l235a和g237a；(xx)l234a、l235a和p329g；(yy)l234f、l235e和p331s；(zz)l234a、l235e和g237a；(aaa)l234a、l235e、g237a和p331s；(bbb)l234a、l235a、g237a、p238s、h268a、a330s和p331s；(ccc)l234a、l235a和p329a；(ddd)g236r和l328r；(eee)g237a；(fff)f241a；(ggg)v264a；(hhh)d265a；(iii)d265a和n297a；(jjj)d265a和n297g；(kkk)d270a；(lll)a330l；(mmm)p331a或p331s；或(nnn)e233p；(ooo)l234a、l235e、g237a、a330s和p331s；或(ppp)(a)-(ppp)的任何组合。
25.如权利要求19至22中任一项所述的免疫缀合物，其中降低所述免疫球蛋白重链恒定区的所述效应子功能的所述对一个或多个氨基酸残基的改变包含根据eu编号的l234a、l235e、g237a、a330s和p331s。
26.如权利要求19至25中任一项所述的免疫缀合物，其中改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的所述对一个或多个氨基酸残基的氨基酸改变缩短所述免疫缀合物的血清半衰期。
27.如权利要求19至22中任一项所述的免疫缀合物，其中改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的所述对一个或多个氨基酸残基的改变是针对选自由根据eu编号的以下组成的列表的氨基酸残基：251、252、253、254、255、288、309、310、312、385、386、388、400、415、433、435、436、439、447及其组合。
28.如权利要求19至22中任一项所述的免疫缀合物，其中改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的所述对一个或多个氨基酸残基的改变是针对选自由根据eu编号的以下组成的列表的氨基酸残基：253、254、310、435、436及其组合。
29.如权利要求19至22中任一项所述的免疫缀合物，其中改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的所述对一个或多个氨基酸残基的改变是针对选自由根据eu编号的以下组成的列表的氨基酸残基：i253a、i253d、i253p、s254a、h310a、h310d、h310e、h310q、h435a、h435q、y436a及其组合。
30.如权利要求19至22中任一项所述的免疫缀合物，其中改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的所述对一个或多个氨基酸残基的改变是针对选自由根据eu编号的以下组成的列表的氨基酸残基：i253a、s254a、h310a、h435q、y436a及其组合。
31.如权利要求19至22中任一项所述的免疫缀合物，其中改变所述免疫缀合物与新生儿fc受体(fcrn)的结合的所述对一个或多个氨基酸残基的改变是针对选自由根据eu编号的以下组成的列表的氨基酸残基：i253a、h310a、h435q及其组合。
32.如权利要求19至31中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫缀合物的血清半衰期少于15天。
33.如权利要求19至31中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫缀合物的血清半衰期少于10天。
34.如权利要求19至31中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫缀合物的血清半衰期少于120小时。
35.如权利要求19至31中任一项所述的免疫缀合物，其中所述免疫缀合物的血清半衰期少于72小时。
36.如权利要求1至35中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区通过接头氨基酸序列或人igg铰链区偶联至所述免疫球蛋白重链恒定区。
37.如权利要求1至36中任一项所述的免疫缀合物，其中所述抗原结合区通过人igg铰链区偶联至所述免疫球蛋白重链恒定区。
38.如权利要求1至37中任一项所述的免疫缀合物，其中所述螯合剂是放射性同位素螯合剂。
39.如权利要求1至37中任一项所述的免疫缀合物，其中所述螯合剂是α发射体螯合剂。
40.如权利要求1至37中任一项所述的免疫缀合物，其中所述螯合剂是β-发射体螯合剂或γ-发射体螯合剂。
41.如权利要求1至38中任一项所述的免疫缀合物，其中所述螯合剂选自由以下组成的列表：dota、do3a、dotaga、dotaga酸酐、py4pa、py4pa-ncs、crown、macropa、macropa-ncs、heha、chxoctapa、bispa、noneunpa及其组合。
42.如权利要求1至38中任一项所述的免疫缀合物，其中所述螯合剂选自由以下组成的列表：dotma、dotpa、do3am-乙酸、dotp、dotmp、dota-4amp、cb-te2a、nota、notp、tetpa、teta、pepa、h4octapa、h2dedpa、do2p、edta、dt...
【专利技术属性】
技术研发人员：亚当·乔祺，麦可·雅伯瑞，亚历山大·罗伦斯·曼德尔，拉杰·所罗门·维斯渥，
申请(专利权)人：雅博得乐医疗公司，
类型：发明
国别省市：
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