一种高产β-烟酰胺单核苷酸的工程菌及其构建方法和应用技术

本申请涉及一种高产β‑烟酰胺单核苷酸的工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程及生物工程技术领域。申请人在专利CN116042473A公开的前置研究基础上，通过引入NA合成NMN途径的两个关键基因pncB和NadE，成功通过质粒表达了这两个关键基因，增加了从NA合成NMN的代谢通路后，重组工程菌株终NMN产量高达27g/L，且几乎未检测到副产物NA，使得底物烟酰胺向NMN的摩尔转化率从57.15％提升至99.2％，具有显著的改善效果，本申请提供的高产β‑烟酰胺单核苷酸的工程菌及其构建方法，有利于节约发酵生产成本，且适合于工业化的扩大生产，将对β‑烟酰胺单核苷酸在食品、药品、化妆品和饲料等领域的应用具有重要的社会价值和经济意义。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及一种高产β-烟酰胺单核苷酸的工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程及生物工程。

技术介绍

1、β-烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide，nmn)是一种天然存在于人体内的核苷酸类物质，属于b族维生素的衍生物，其分子量为334.22，在生物体中主要用于合成nad+(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)，仅需一步催化反应，相对其他前体物质更具优势。根据文献报道，大量研究证明nmn具有延缓衰老、抗氧化、改善神经性疾病、治疗肥胖、治疗糖尿病、保护肠道等的功效。nmn广泛存在于天然的水果蔬菜中，例如西兰花、牛油果、西红柿等，也存在于生牛肉、鱼虾中，但含量不足以达到保健作用。

2、研究人员常通过酶催化法、发酵法合成nmn并可提取获得纯度大于99％的原料产品，使其用于化妆品、保健食品中，也在通过细胞、动物实验以及人体临床试验进一步探索nmn的应用，赋予nmn重要的经济价值。发酵法合成nmn是一种成本相对低廉、生产周期较短、可放大至工业化规模的生产方式。研究人员通过代谢工程研究，已经使nmn合成代谢通路逐渐清晰，加之基因工程、基因编本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产β-烟酰胺单核苷酸的工程菌，其特征在于，所述工程菌含有大肠杆菌来源的烟酸磷酸核糖基转移酶、Francisella tularensis来源的NAD+合酶。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述烟酸磷酸核糖基转移酶为pncB；优选的，所述pncB基因的氨基酸序列包含如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO.4具有至少98％序列同一性的氨基酸序列，和/或，

3.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌还含有烟酰胺磷酸核糖转移酶、NMN转运蛋白和PRPP合酶中的一种或两种及以上。

4.根据权利要求1-3...

【技术特征摘要】

1.一种高产β-烟酰胺单核苷酸的工程菌，其特征在于，所述工程菌含有大肠杆菌来源的烟酸磷酸核糖基转移酶、francisella tularensis来源的nad+合酶。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述烟酸磷酸核糖基转移酶为pncb；优选的，所述pncb基因的氨基酸序列包含如seq id no.4所示的氨基酸序列或与seq id no.4具有至少98％序列同一性的氨基酸序列，和/或，

3.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌还含有烟酰胺磷酸核糖转移酶、nmn转运蛋白和prpp合酶中的一种或两种及以上。

4.根据权利要求1-3任一所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌为谷氨酸棒杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌中的一种；优选的，所述工程菌为大肠杆菌。

5.生物材料，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟平，高萌，王瑞妍，
申请(专利权)人：北京华熙荣熙生物技术研究有限公司，
类型：发明
国别省市：