【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种猪流行性腹泻病毒疫苗株与野毒株的pcr-hrm检测方法,属于病毒检测。
技术介绍
1、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,pedv)属于冠状病毒科冠状病毒属,病毒粒子的表面存在三种蛋白:膜蛋白(m)、纤突蛋白(s)、包膜蛋白(e),在病毒内部仅有核衣壳蛋白(n),这几种结构蛋白均由orf1基因阅读框编码。pedv是猪群中常流行的一种病毒,是检测阳性率较高的病毒之一。猪流行性腹泻(porcine epidemicdiarrhea,ped)是由pedv引起的以仔猪腹泻、呕吐和脱水为主要症状的一种急性、高度接触性肠道传染病,各种日龄的猪均易感,尤其是哺育仔猪,发病率高达100%,死亡率为60~100%。到目前为止,我国几乎所有的省份都报道了ped的发生和流行情况,这严重影响了我国养猪业的健康发展。对于ped的防控大多通过疫苗进行,但在实施免疫的同时,也存在免疫失败而被pedv野毒株感染的动物。鉴别pedv疫苗株和野毒株不仅可以评估养殖场是否有野毒株感染,而且对于猪场流行病学调查和
...【技术保护点】
1.一种用于猪流行性腹泻病毒的检测引物,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.5-6所示。
2.一种检测猪流行性腹泻病毒疫苗株和野毒株的方法,其特征在于,采用包括权利要求1所述检测引物的PCR-HRM反应体系,对含有猪流行性腹泻病毒的样本进行扩增和检测。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,采用所述PCR-HRM反应体系进行扩增的反应程序为:95℃预变性3min,95℃变性10s,52-65℃退火10s,72℃延伸10s,循环40次;95℃60s,40℃60s,65℃1s,97℃1s。
4.根据权利要求3所述的方法,其特
...【技术特征摘要】
1.一种用于猪流行性腹泻病毒的检测引物,其特征在于,核苷酸序列如seq id no.5-6所示。
2.一种检测猪流行性腹泻病毒疫苗株和野毒株的方法,其特征在于,采用包括权利要求1所述检测引物的pcr-hrm反应体系,对含有猪流行性腹泻病毒的样本进行扩增和检测。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,采用所述pcr-hrm反应体系进行扩增的反应程序为:95℃预变性3min,95℃变性10s,52-65℃退火10s,72℃延伸10s,循环40次;95℃60s,40℃60s,65℃1s,97℃1s。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述反应程序中退火温度为60℃。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述pcr-hrm反应体系为:green-2-go 2×qpcr-s mastermix体积为8-12μl,上、下游引物各0.2-0.4μl,temp 1-3μl...
【专利技术属性】
技术研发人员:贺笋,李媛,张盼,潘晓梅,曹剑,杜久斌,张超,
申请(专利权)人:天康制药股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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