【技术实现步骤摘要】
本技术属于蛋白质分析化学,特别是涉及一种荧光分析仪。
技术介绍
1、蛋白测定是生物化学和分子生物学常用的分析手段。由于其重要性,已经有多种成熟的检测方法,其中有几种也被广泛的应用。
2、蛋白质测定一般分为两类:紫外吸收法或荧光法。紫外吸收法可以直接测定体液或蛋白质溶液中的总蛋白,但不能以这种方法测定组织的全细胞裂解物,并且核酸的存在会在与蛋白质相同的光谱范围内吸光,从而干扰蛋白质的检测。与之相反,荧光法通过荧光染料结合进行测定,可以对可见光区域的荧光进行测定,能够避免核酸的这种干扰。不过,即使荧光法有较紫外吸收法避免干扰的优点,但其缺点也是明显的,其需要通过与荧光染料结合来测定,蛋白无法进行回收,在进行微量蛋白测定时,这一缺点就限制了应用。
3、bca法是目前测定蛋白质浓度比较通用的方法,通过蛋白将cu2+还原为cu+,cu+与bca试剂形成紫色的络合物,将该水溶性复合物在562nm处的吸收值,与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。虽然该方法被广泛应用,但其间接的测量方法,蛋白无法回收,其较长的反应时间也带来很大的不便。
4、蛋白质含有三种不同的芳香族氨基酸,分别带有苯环、苯酚环和吲哚环。这些基团中的每一个都可以被紫外线激发而发出荧光。生物化学中主要通过色氨酸的荧光来分析蛋白质的结构与功能。色氨酸荧光法(wf)测定总蛋白是一种简单、灵敏和直接的方法,其检测速度快、蛋白可回收、灵敏度高,是一种替代bca检测的行之有效的方法。
5、既往,用于进行色氨酸荧光法测定的设备,大多采用荧光光
技术实现思路
1、本技术在于公开一种荧光分析仪,包括检测色氨酸含量的检测光路,所述检测光路包括荧光激发光路和荧光检测光路。
2、在本技术的一些实施方式中,还包括检测管,所述检测管为石英管。
3、在本技术的一些实施方式中,所述荧光激发光路包括激发光源、激发端滤光片和激发端透镜。
4、在本技术的一些实施方式中,所述荧光检测光路包括发射段透镜、发射端滤光片和荧光接收器件。
5、在本技术的一些实施方式中,所述激发光源为能发射260~300nm波长的光的光源,所述激发端滤光片光谱包括260~300nm的波长范围。所述激发光源可以为led。
6、在本技术的一些实施方式中,所述荧光接收器件为能接受320-380nm波长的光的接收器件,所述发射端滤光片光谱包括320-380nm的波长范围。所述荧光接收器件可以为光电倍增管。
7、在本技术的一些实施方式中,所述检测管的容量不超过200μl。
8、在本技术的一些实施方式中,所述检测管为毛细石英管。
9、在本技术的一些实施方式中,还包括uv测定光路。
10、在本技术的一些实施方式中,还包括检测管承托机构和密光机构。
11、所述检测管承托机构用于承托检测管,所述检测管用于盛放待测样本,所述密光机构用于对整个机构密光。
12、在本技术的一些实施方式中,所述石英管通过插接、粘合、卡接方式与所述检测管托架固定在一起。
13、在本技术的一些实施方式中,所述uv测定光路包括对应波长的滤光片。
14、在本技术的一些实施方式中,所述荧光检测光路与荧光激发光路的角度为90度。
15、在本技术的一些实施方式中,所述光学检测机构与石英管呈法向设置。
16、在本技术的一些实施方式中,所述uv测定光路与荧光激发光路呈直线设置。
17、有益效果:
18、本技术的荧光分析仪,在一些实施方式中,通过检测加注到检测管中蛋白的色氨酸受激发射的直接荧光来进行分析。待检测蛋白可以加注到所述石英管中进行直接检测,无需加入其他标记物,具有较高的灵敏度,无需反应时间,上样即检测,检测速度快,检测后的蛋白可以选择回收。在一些实施方式中,对于高浓度样本,还可以使用uv测定光路,通过测定待测样本在280nm的吸收峰,用紫外法对总蛋白进行测定。色氨酸荧光法与紫外吸收法的结合,可以对较高动态范围内的样本进行检测。
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1.一种荧光分析仪,其特征在于,包括检测色氨酸含量的检测光路,所述检测光路包括荧光激发光路和荧光检测光路。
2.根据权利要求1所述的荧光分析仪,其特征在于,还包括检测管,所述检测管为石英管。
3.根据权利要求1或2所述的荧光分析仪,所述荧光激发光路包括激发光源、激发端滤光片和激发端透镜。
4.根据权利要求3所述的荧光分析仪,其特征在于,所述激发光源为能发射260~300nm波长的光的光源,所述激发端滤光片光谱包括260~300nm的波长范围。
5.根据权利要求1或2所述的荧光分析仪,所述荧光检测光路包括发射端透镜、发射端滤光片和荧光接收器件。
6.根据权利要求5所述的荧光分析仪,其特征在于,所述荧光接收器件为能接受320-380nm波长的光的接收器件,所述发射端滤光片光谱包括320-380nm的波长范围。
7.根据权利要求2所述的荧光分析仪,其特征在于,所述检测管的容量不超过200μL。
8.根据权利要求7所述的荧光分析仪,其特征在于,所述检测管为毛细石英管。
9.根据权利要求1或2所
10.根据权利要求1或2所述的荧光分析仪,其特征在于,还包括检测管承托机构和密光机构。
...【技术特征摘要】
1.一种荧光分析仪,其特征在于,包括检测色氨酸含量的检测光路,所述检测光路包括荧光激发光路和荧光检测光路。
2.根据权利要求1所述的荧光分析仪,其特征在于,还包括检测管,所述检测管为石英管。
3.根据权利要求1或2所述的荧光分析仪,所述荧光激发光路包括激发光源、激发端滤光片和激发端透镜。
4.根据权利要求3所述的荧光分析仪,其特征在于,所述激发光源为能发射260~300nm波长的光的光源,所述激发端滤光片光谱包括260~300nm的波长范围。
5.根据权利要求1或2所述的荧光分析仪,所述荧光检测光路包括发射端透镜、发射...
【专利技术属性】
技术研发人员:王宪华,钱希江,王健辉,田文双,李天奇,
申请(专利权)人:北京贝泰科技有限公司,
类型:新型
国别省市:
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