一种样本保存液制造技术

本发明专利技术提供了一种样本保存液

【技术实现步骤摘要】
一种样本保存液、利用其保存病毒样本的方法及试剂盒


[0001]本专利技术涉及分子生物学检测
，具体涉及一种病毒样本的保存试剂，尤其涉及一种样本保存液
、
利用其保存病毒样本的方法及试剂盒
。

技术介绍

[0002]病毒是一种没有细胞结构的特殊生物，由蛋白质外壳和内部的遗传物质
(DNA
或
RNA)
组成
。
病毒结构简单，个体微小，没有代谢机构，没有酶系统，不能独立生存，只能寄生在宿主细胞内，依赖宿主细胞中的物质和能量完成生命活动，根据其包含的遗传信息进行复制
、
转录和翻译，产生新一代病毒，实现复制式增殖
。
复制增殖后的新一代病毒可裂解原宿主细胞，感染新的宿主细胞进行下一轮复制式增殖
。
[0003]受试对象的咽拭子，经过病毒核酸提取
、
纯化和
PCR
扩增鉴定后，检测的病毒核酸结果可以作为临床参考的依据之一
。
但由于外源及内源性核酸酶的存在及其酶活性相当稳定等原因，使得在咽拭子中提取和纯化高质量的病毒核酸相对比较困难
。
[0004]目前，市面上的样本保存液主要用作定性筛查，实际应用中由于灵敏度低等原因容易造成漏检，或者由于提取核酸不完全造成定量偏差，不能很好地反映样本的真实浓度
。
样本保存液配方对核酸的质量和得率有很大的影响，因此研发稳定
、
得率高的样本保存液是本领域不断探索的课题
。
对于咽拭子病毒核酸，使用的样本保存液大多为生理盐水
、
无核酶纯化水
、Hank
′
s
缓冲液
、
高浓度胍盐溶液
(
盐酸胍或异硫氰酸胍
)
等
。
此外，传统的样本保存液一般需要低温保存，冰盒冷冻运输，使用成本较高；对核酸的保存时间部分厂家仅保证
48
小时内，对核酸的保存稳定性差
。
部分产品不含胍盐，无灭活病毒作用，容易出现医源感染等问题
。
[0005]因此，提供一种能在常温下保存待测样本
、
降低目的核酸降解率的样本保存液，对于提高病毒检测准确率具有重要的意义
。

技术实现思路

[0006]针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种样本保存液
、
利用其保存病毒样本的方法及试剂盒
。
所述样本保存液成分简单，制备方法简单，各组分之间协同配合且浓度适宜，能显著提高样本中核酸的稳定性
。
[0007]为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]第一方面，本专利技术提供一种样本保存液，其特征在于，所述样本保存液包括如下组分：
[0009][0010]本专利技术所述的样本保存液以
Tris
‑
HCl
为缓冲液，成分包括胍盐
GUSCN、
螯合剂
EDTA
‑
2Na
和表面活性剂
Triton X
‑
100
，所述样本保存液中各组分协同配合，并在各自合适的浓度下起到保存样本的作用
。
[0011]所述样本保存液可以在室温下保存，也能够在室温下保存采集得到的样本，节省核酸保存液在采集和运输过程中因冷冻或冷藏而增加的成本；同时，所述样本保存液能显著提高样本中核酸的稳定性，减少其降解量，使核酸保存的时间长达
14
天，在检测样本量剧增导致检测时间延长时，提高核酸的稳定性对于提高检测结果准确性
、
防止漏检具有重要的意义
。
[0012]本专利技术中，所述样本保存液异硫氰酸胍的摩尔浓度可以是
1M、1.2M、1.5M、1.8M、2M、2.2M、2.5M、2.8M、3M、3.2M、3.5M、3.8M、4M、4.2M、4.5M、4.8M、
或
5M
等
。
[0013]所述乙二胺四乙酸二钠的摩尔浓度可以是
5mM、6mM、8mM、10mM、12mM、14mM、15mM、16mM、18mM、20mM、22mM、24mM、25mM、28mM、30mM、32mM、35mM、38mM、40mM、42mM、44mM、45mM、48mM
或
50mM
等
。
[0014]所述
Triton X
‑
100
的质量浓度可以是
1wt
％
、1.2wt
％
、1.4wt
％
、1.5wt
％
、1.6wt
％
、1.8wt
％
、2wt
％
、2.4wt
％
、2.5wt
％
、2.8wt
％
、3wt
％
、3.2wt
％
、3.5wt
％
、3.6wt
％
、3.8wt
％
、4wt
％
、4.2wt
％
、4.5wt
％
、4.8wt
％或
5wt
％等
。
[0015]所述
Tris
的摩尔浓度可以是
10mM、15mM、20mM、100mM、100mM、100mM、100mM、100mM、100mM、100mM、100mM
或
100mM
等
。
[0016]优选地，所述样本保存液的
pH
为
7.6
～
8.0
，例如可以是
7.6、7.7、7.8、7.9
或
8.0。
[0017]作为本专利技术优选的技术方案，所述样本保存液中异硫氰酸胍的摩尔浓度为1～
2M
；优选地，所述乙二胺四乙酸二钠的摩尔浓度为
25
～
50mM
；优选地，所述
Triton X
‑
100
的质量浓度为1～
2wt
％；优选地，所述
Tris
‑
HCl
的摩尔浓度为
10
～
60mM。
[0018]本专利技术中，所述样本保存液中各组分的浓度在上述范围内时，样本保存液能够得到更加的保存效果
。
[0019]作为本专利技术优选的技术方案，所述样本保存液由如下组分组成：
[0020][0021]同时，所述样本保存液的
pH
为
7.6
～
8.0。
[0022]第二方面，本专利技术提供一种保存病毒样本的方法，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种样本保存液，其特征在于，所述样本保存液包括如下组分：
2.
根据权利要求1所述的样本保存液，其特征在于，所述样本保存液的
pH
为
7.6
～
8.0
；优选地，所述样本保存液的
pH
值使用
HCl
进行调节
。3.
根据权利要求1或2所述的样本保存液，其特征在于，所述样本保存液中异硫氰酸胍的摩尔浓度为1～
2M
；优选地，所述乙二胺四乙酸二钠的摩尔浓度为
25
～
50mM
；优选地，所述
Triton X
‑
100
的质量浓度为1～
2wt
％；优选地，所述
Tris
的摩尔浓度为
10
～
60mM。4.
根据权利要求1～3任一项所述的样本保存液，其特征在于，所述样本保存液由如下组分组成：所述样本保存液的
pH
为
7.6
～
8.0。5.
一种保存病毒样本的方法，其特征在于，所述方法包括：采集病毒样本置于如权利要求1～4任一项所述的样本保存液中，
18
～
28℃
的室温下保存；其中，所述病毒样本中核酸的稳定时限为
14
天
。6.
根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述病毒样本包括鼻拭子
...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭杰峰，欧少玲，孔燕萍，
申请(专利权)人：广州奕昕生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：