一种DNA片段分选纯化磁珠的制备方法及其及应用技术

本发明专利技术属于纳米材料技术领域，公开了一种DNA片段分选纯化磁珠的制备方法及其及应用，具体公开了一种羧基磁珠的制备方法。本发明专利技术提供制备方法可稳定、大批量地制备亚微米级别DNA分选及纯化用的羧基磁珠，该方法工艺简单、容易控制和操作，成本低，产率高，安全性和稳定性好，易实现工业化规模生产。其制备技术简单，无需复杂设备，过程绿色环保。该方法制备得到的羧基磁珠磁吸速度较快、可避免操作过程中磁珠丢失，提高操作精准性，可以配合半自动化及全自动化移液工作站，实现高通量建库的需求，其分选得到的DNA片段可直接用于构建基因库，回收率及纯度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属纳米材料，具体涉及一种dna片段分选纯化磁珠的制备方法及其及应用。

技术介绍

1、四十多年来，测序技术经历了三次大飞跃，即以sanger测序法/化学降解法为代表的第一代测序技术的自动化、以roche 454/illimina solexa/abi solid为代表的第二代测序技术的高通量化以及以pacbio smrt/oxford nanopore为主要代表的第三代单分子测序技术的长读长化，极大地推进了现代生命科学研究的进程。二代测序和三代测序统称为下一代测序(ngs)，而ngs的应用主要在dna测序、rna测序、宏基因组测序、表观遗传学等几大领域。在dna测序中，从样品制备到文库制备及最终测序，大多步骤均要求精确高效化、易于自动化操作，并且许多高通量测序应用都要求核酸片段在特定范围内紧密分布，因此dna片段筛选在基因测序领域是不可或缺的环节，高分辨率筛选可降低下游测序深度、节约测序成本。

2、传统的核酸片段分选方法有溶液沉淀法和切胶回收法，但这些方法操作步骤均十分复杂，难实现自动化，无法和下游的ngs测序技术串联形成流水线操作。基本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种羧基磁珠的制备方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂热法包括以下步骤：将六水三氯化铁、乙二醇、一缩二乙二醇、醋酸钠和PEG混合，油浴条件下，搅拌1，反应1，磁铁吸附，洗涤，得到即得到单分散的Fe3O4磁核。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述油浴的温度为60～80℃；和/或，所述搅拌1的条件为200～400rpm搅拌50～70min；和/或，所述反应1的条件为150～300℃100～200rpm密闭反应20～30h；和/或，所述六水三氯化铁、乙二醇、一缩二乙二醇、醋酸钠和PEG的质量比为1:(1～4):...

【技术特征摘要】

1.一种羧基磁珠的制备方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂热法包括以下步骤：将六水三氯化铁、乙二醇、一缩二乙二醇、醋酸钠和peg混合，油浴条件下，搅拌1，反应1，磁铁吸附，洗涤，得到即得到单分散的fe3o4磁核。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述油浴的温度为60～80℃；和/或，所述搅拌1的条件为200～400rpm搅拌50～70min；和/或，所述反应1的条件为150～300℃100～200rpm密闭反应20～30h；和/或，所述六水三氯化铁、乙二醇、一缩二乙二醇、醋酸钠和peg的质量比为1:(1～4):(0.5～1.5):(5～9):(0.1～0.5)。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述溶胶凝胶法包括以下步骤：fe3o4磁核与无水乙醇、氨水混合，搅拌2，加入正硅酸四乙酯，反应2，磁铁吸附，得到硅基磁珠。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述搅拌2的条件为400～600r...

【专利技术属性】
技术研发人员：王亮，谭杰峰，谢碧瑜，覃孙婷，
申请(专利权)人：广州奕昕生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：