抗凝血酶原抗体检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种抗凝血酶原抗体检测试剂盒，属于检测试剂盒技术领域

【技术实现步骤摘要】
抗凝血酶原抗体检测试剂盒


[0001]本专利技术属于检测试剂盒
，涉及一种抗凝血酶原抗体检测试剂盒
。

技术介绍

[0002]抗磷脂综合征
(antiphospholipid syndrome
，
APS)
是以反复血栓形成
、
病态妊娠以及血清中抗磷脂抗体
(antiphospholipid antibody
，
aPL)
持续阳性为特征的一种自身免疫性疾病
。
与抗磷脂综合征关系最密切的抗体和狼疮抗凝物
(lupus anticoagulant
，
LA)
是判断
APS
危险度最好的抗体
。
[0003]凝血酶原
(II
因子
)
是最常见的一种磷脂结合蛋白，其分子量为
72Kda。
凝血酶原通过凝血酶原酶复合物触发纤维蛋白原向纤维蛋白的转化，从而表现出促凝血活性
。
凝血酶原
(PT)
属于抗磷脂抗体，特异性作用于带负电荷的磷脂，这种磷脂是生物细胞膜和凝血素的组成部分
,
而抗磷脂综合征
(APS)
是指身体中存在磷脂抗体进而引发血管栓塞
、
血小板减少
、
习惯性流产等临床症状的一组症候群，在系统性红斑狼疮及相关疾病患者体内出现抗磷脂抗体是一种典型的续发性抗磷脂综合症
(APS)。/>与之相对应，没有其它自身免疫疾病患者体内出现的抗磷脂抗体称为原发抗磷脂综合症
(APS)。
现有临床研究表明反复性流产与抗磷脂抗体有密切的关系，且凝血酶原抗体与流产的
APS
患者高度相关
。
[0004]抗凝血酶原抗体的实验室检测可以为系统性红斑狼疮或类狼疮疾病是否形成血栓的辅助诊断提供参考依据
。
[0005]凝血酶原在机体内和带负电荷的磷脂结合，如，磷脂酰丝氨酸
、
心磷脂
、
磷脂酰乙醇胺等
。
传统的凝血酶原检测方法一般采用磷脂酰丝氨酸
、
心磷脂
、
磷脂酰乙醇胺作为偶联物，将凝血酶原蛋白偶联至载体上；根据载体不同，可分为酶联免疫吸附法
、
化学发光法
。
[0006]传统的凝血酶原抗体检测方法，因为凝血酶原与负电荷磷脂的偶联效率不高，导致抗凝血酶原抗体的检测灵敏度较低，因此在临床上会频繁出现血清抗体阴性的抗磷脂综合征
(seronegative antiphospholipid syndrome,SN
‑
APS)
案例，这一现象长期困扰临床诊疗
。
[0007]为了解决存在的上述问题，需要提供一种试剂盒，其可以通过高效偶联“负电荷磷脂
‑
凝血酶原蛋白”至载体上，检测抗凝血酶原抗体，将可能的影响因素降低至最低，对进行
APS
，尤其是
SN
‑
APS
检测，准确性更高
。

技术实现思路

[0008]本专利技术专利的目的是克服了上述现有技术中的缺点，提供一种抗凝血酶原抗体检测试剂盒，该抗凝血酶原抗体检测试剂盒可以高灵敏度地检测抗凝血酶原抗体，应用简便，并进一步提高抗磷脂综合征的准确性和灵敏度，检测结果为下一步准确治疗提供了有力依据，适于大规模推广应用
。
[0009]为了实现上述目的，本专利技术提供的抗凝血酶原抗体检测试剂盒具有如下构成：
[0010]本专利技术的第一个目的是提供一种抗凝血酶原抗体检测检测条，包括并排排列的两
条试纸，所述试纸上包括样品垫
、
结合垫
、
载体膜
、
吸水纸和底板，所述载体膜上设有检测线和对照线
。
[0011]在一种实施方式中，所述试纸上样品垫
、
结合垫
、
载体膜和吸水纸依次黏贴在底板上
。
[0012]在一种实施方式中，所述检测线包被有人凝血酶原蛋白
。
[0013]在一种实施方式中，所述抗人
IgG
标记抗体或抗人
IgM
标记抗体分别包被于两条试纸的结合垫上
。
[0014]在一种实施方式中，所述抗人
IgG
标记抗体或抗人
IgM
标记抗体经荧光微球标记
。
[0015]在一种实施方式中，所述对照线包被有羊抗鼠
IgG。
[0016]在一种实施方式中，所述人凝血酶原蛋白的浓度为
0.05
～
0.2mg/mL
，喷涂量为
0.5
～
1.5
μ
L/cm。
[0017]在一种实施方式中，经荧光微球标记的抗人
IgG
标记抗体或抗人
IgM
标记抗体的浓度大于2～5μ
g/mg
，喷涂量为8μ
L/cm。
[0018]正如本领域技术人员所熟知，检测条也可称之为检测卡
、
试剂盒或其他名称
。
[0019]在一种实施方式中，所述载体膜先经磷脂酰丝氨酸和心磷脂溶液浸泡，再经等离子处理，最后喷点经羧基活化的人凝血酶原蛋白
。
[0020]在一种实施方式中，所述磷脂酰丝氨酸的浓度为1～5％
(
质量浓度
)
；心磷脂的浓度为1～5％
(
质量浓度
)。
[0021]在一种实施方式中，利用酸化乙醇溶剂配制所述磷脂酰丝氨酸和心磷脂
。
[0022]在一种实施方式中，所述酸化乙醇溶剂为盐酸和乙醇的混合溶液，其中盐酸的浓度为5～
10
％
(
体积浓度，
V:V)
；乙醇的浓度为
50
～
90
％
(
体积浓度，
V:V)。
[0023]在一种实施方式中，所述等离子处理为将载体膜放入等离子反应室，填充氮气，预处理
25
～
120min。
[0024]在一种实施方式中，所述等离子反应室的工作参数为：功率为
150
～
300W
，压强为
15
～
35Pa
，气体流速为
50
～
250cc/min
，温度为
18
～
42℃。
[0025]在一种实施方式中，所述人凝血酶原蛋白采用
EDC
‑
NHS
活化法活化
。
[0026]在一种实施方式中，所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种抗磷脂综合征的检测条，其特征在于，包括并排排列的两条试纸，所述试纸上包括样品垫
、
结合垫
、
载体膜
、
吸水纸和底板，所述载体膜上设有检测线和对照线；所述检测线包被有人凝血酶原蛋白；所述抗人
IgG
标记抗体或抗人
IgM
标记抗体分别包被于两条试纸的结合垫上；所述对照线包被有羊抗鼠
IgG
；所述载体膜先经磷脂酰丝氨酸和心磷脂溶液浸泡，再经等离子处理，最后喷点经羧基活化的人凝血酶原蛋白
。2.
根据权利要求1所述的检测条，其特征在于，所述试纸上样品垫
、
结合垫
、
载体膜和吸水纸依次黏贴在底板上
。3.
根据权利要求1所述的检测条，其特征在于，所述抗人
IgG
标记抗体或抗人
IgM
标记抗体经荧光微球标记
。4.
根据权利要求1所述的检测条，其特征在于，所述人凝血酶原蛋白的浓度为
0.05
～
0.2mg/mL
，喷涂量为
0.5
～
1.5
μ
L/cm。5.
根据权利要求3所述的检测条，其特征在于，经荧光微球标记的抗人
IgG
标记抗体或抗人
IgM
标记...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦彦余，陈妮娜，吕惠敏，
申请(专利权)人：无锡嘉润诊断技术有限公司，
类型：发明
国别省市：