一种养血清脑醇提浸膏中有关物质含量测定方法技术

本发明专利技术涉及一种养血清脑醇提浸膏中有关物质含量测定方法，包括以下步骤：

【技术实现步骤摘要】
一种养血清脑醇提浸膏中有关物质含量测定方法


[0001]本专利技术属于药物检测领域，涉及一种养血清脑醇提浸膏中有关物质含量测定方法
。

技术介绍

[0002]养血清脑制剂是一种由当归
、
川芎
、
延胡索
、
决明子等
11
味中药作为原料药制备而成的中成药，具有养血平肝，活血通络作用，用于血虚肝旺所致头痛，眩晕眼花，心烦易怒，失眠多梦
。
养血清脑制剂在制备过程中部分中药采用醇提技术得到醇提浸膏，投入下一步制备，因此，醇提浸膏是养血清脑制剂的中间体，其制备方法如下：
[0003]当归
、
川芎
、
延胡索
、
决明子加
70
％乙醇回流提取二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，回收乙醇并浓缩至适量，即得
。
[0004]因此，养血清脑制剂醇提浸膏中，含有当归
、
川芎
、
延胡索
、
决明子中的药物成分
。
[0005]现有技术中尚无对当归
、
川芎
、
延胡索
、
决明子醇提物中阿魏酸
、
洋川芎内酯
A、
藁本内酯
、
橙黄决明素
、
大黄素和大黄酚的含量测定方法
。
[0006]文献
《UPLC
‑
Q
‑
>TOF/MS
E
方法分析养血清脑颗粒的化学成分
.
药学学报
,2016(5):797
‑
805》
公开了采用超高效液相色谱
‑
四级杆
‑
飞行时间
/
全信息串联质谱技术
,
对养血清脑颗粒的化学成分进行分析共鉴定出
142
种成分，但无法实现对中间体成分的含量测定
。
此外，专利
CN108061761B
虽然公开了养血清脑醇提浸膏中生物碱成分含量的检测方法，但该方法不能采用同一份样本检测阿魏酸
、
洋川芎内酯
A、
藁本内酯
、
橙黄决明素
、
大黄素和大黄酚的含量，增加了检测人员的工作量
。
[0007]随着中药现代化
、
国际化工作的深入开展
,
国内外药品监管机构均对中药质量控制提出了更严格的要求
。
为了提高中药产品质量一致性
,
加强对整个生产过程的质量控制，亟须开发一种准确和方便的养血清脑醇提浸膏中有关物质的质量检测和控制方法
。

技术实现思路

[0008]本专利技术提供一种检测养血清脑醇提浸膏中阿魏酸
、
洋川芎内酯
A、
藁本内酯
、
橙黄决明素
、
大黄素
、
大黄酚含量的方法，首先通过固相萃取柱预处理的方式，得到供试品溶液，再通过
UPLC
技术对样品液进行分析，得到以上各组分的含量
。
另外的，本专利技术还提供了检测养血清脑醇提浸膏中阿魏酸
、
洋川芎内酯
A、
藁本内酯
、
橙黄决明素
、
大黄素
、
大黄酚以及生物碱，包括延胡索乙素
、
延胡索甲素
、
四氢非洲防己碱
、
四氢黄连碱和四氢小檗碱的含量的方法
。
首先通过固相萃取柱预处理的方式，采用不同的洗脱液洗脱固相萃取柱，从一份样品中先后获得两份供试品溶液，再通过
UPLC
技术对样品液进行分析，得到上述
11
种相关组分的含量
。
本专利技术公开的测定方法具有精密度
、
重复性
、
样品稳定性和加样回收率良好的优点，结果符合含量测定方法学要求，且从一份样品中得到两份供试品溶液的方法有简化了检测步骤，缩短了检测时间的优点
。
[0009]本专利技术要求保护以下技术方案：
[0010]一种养血清脑醇提浸膏中有关物质含量测定方法，包括以下步骤：
[0011](1)
供试品溶液1的配制：养血清脑醇提浸膏
0.06
‑
0.14g
用含
0.5
‑5％乙酸的
60
‑
70
％甲醇水溶液溶解；上样至阳离子交换固相萃取柱，用洗脱液
A
洗脱得到供试品溶液1；其中，所述洗脱液
A
为含
0.5
‑5％乙酸的
60
‑
70
％甲醇水溶液；
[0012]任选的步骤
(2)
，供试品溶液2的配制：萃取柱继续用洗脱液
B
洗脱得到供试品溶液2；其中，所述洗脱液
B
为1‑
15
％氨水甲醇溶液；所述1‑
15
％氨水甲醇溶液是指1‑
15
％氨水
80
‑
100
％甲醇溶液；
[0013](3)
含量测定：将供试品溶液1和
/
或供试品溶液2分别注入超高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品溶液中有关物质的含量
。
[0014]其中，对于供试品溶液1的测定，色谱条件如下：
[0015]色谱柱类型：适用于
UPLC
的十八烷基硅烷键合硅胶柱；
[0016]流动相：流动相
A
为
0.2
％甲酸水溶液，流动相
B
为乙腈；
[0017]梯度洗脱：流速：
0.35
‑
0.45mL/min
；检测波长：
265
‑
290nm
；所述梯度洗脱程序如下表所示
。
[0018]时间
(min)
流动相
A
流动相
B090104762487327115545154060181090199010219010
[0019]进样量在1‑3μ
L
，优选为2μ
L。
[0020]优选的，梯度洗脱流速为
0.4mL/min
，检测波长为
280nm。
[0021]所述适用于
UPLC
的十八烷基硅烷键合硅胶柱选自
Waters HSS T3
色谱柱
(2.1x100mm)
，
Kinetex(2.1x100mm)...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种养血清脑醇提浸膏中有关物质含量测定方法，包括以下步骤：
(1)
供试品溶液1的配制：养血清脑醇提浸膏
0.06
‑
0.14g
用含
0.5
‑5％乙酸的
60
‑
70
％甲醇水溶液溶解；上样至阳离子交换固相萃取柱，用洗脱液
A
洗脱得到供试品溶液1；其中，所述洗脱液
A
为含
0.5
‑5％乙酸的
60
‑
70
％甲醇水溶液；任选的步骤
(2)
，供试品溶液2的配制：萃取柱继续用洗脱液
B
洗脱得到供试品溶液2；其中，所述洗脱液
B
为1‑
15
％氨水甲醇溶液；所述1‑
15
％氨水甲醇溶液是指1‑
15
％氨水
80
‑
100
％甲醇溶液；
(3)
含量测定：将供试品溶液1和
/
或供试品溶液2分别注入超高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品溶液中有关物质的含量；其中，对于供试品溶液1的测定，色谱条件如下：色谱柱类型：适用于
UPLC
的十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相：流动相
A
为
0.2
％甲酸水溶液，流动相
B
为乙腈；梯度洗脱：流速：
0.35
‑
0.45mL/min
；检测波长：
265
‑
290nm
；所述梯度洗脱程序如下表所示；时间
(min)
流动相
A
流动相
B090104762487327115545154060181090199010219010
其中，对于供试品溶液2的测定，色谱条件如下：色谱柱：
ACQUITY UPLC BEH C18
色谱柱或
ACQUITY UPLC CSH C18
色谱柱；流动相：流动相
A
为
0.05
％乙酸铵水溶液，流动相
B
为乙腈；梯度洗脱；流速：
0.35
‑
0.45mL/min
；检测波长：
270
‑
290nm
；所述梯度洗脱程序如下表
。2.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，根据需要，还包括以下步骤：对照品溶液1的制备：分别取阿魏酸
、
橙黄决明素
、
洋川芎内酯
A、
藁本内酯
、
大黄素和大
黄酚对照品，加甲醇配制成每毫升含阿魏酸
、
橙黄决明素
、
洋川芎内酯
A、
藁本内酯
、
大黄素和大黄酚分别为
0.01mg、0.04mg、1.00mg、0.15mg、0.01mg
和
0.005mg
的混合溶液；对照品溶液1作为供试品溶液1的标准对照品，在测定供试品溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：张学敏，徐波，陈红，牛涛，
申请(专利权)人：天津天士力现代中药资源有限公司，
类型：发明
国别省市：