蚁灵口服液指纹图谱的建立方法技术

本发明专利技术公开了一种蚁灵口服液指纹图谱的建立方法

【技术实现步骤摘要】
蚁灵口服液指纹图谱的建立方法


[0001]本专利技术涉及药物分析检测
，具体涉及一种蚁灵口服液指纹图谱的建立方法
。

技术介绍

[0002]蚁灵口服液由鼎突多刺蚁（君药）
、
灵芝（臣药）
、
桑葚（臣药）
、
大枣（佐药）
、
陈皮（佐药）
、
续断（使药）制成，全方六味中药互相配伍，具有补肝肾
、
强筋骨之功效，主要用于肝肾亏损，筋骨不坚证，症见腰膝酸软，头晕眼花，体倦乏力，食少或兼睡眠不安者
。
[0003]蚁灵口服液现有质量标准中仅采用薄层色谱法，以橙皮苷作为对照品，以陈皮
、
黑蚂蚁
、
灵芝作为对照药材，分别进行定性鉴别，同时采用高效液相色谱法对蚁灵口服液中橙皮苷一个成分进行含量测定，质控指标成分较少，无法全面表征中药复方制剂的物质基础以及化学成分群的整体性和复杂性
。
为更好地控制蚁灵口服液的质量，本专利技术针对蚁灵口服液药效成分建立了制剂的指纹图谱
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种蚁灵口服液指纹图谱的建立方法，通过该方法建立蚁灵口服液的指纹图谱，并可以对蚁灵口服液中多个药材的多个药效成分进行定性分析，能较全面的反映蚁灵口服液的质量信息，保证产品质量均一稳定
。
[0005]本专利技术提供的一种蚁灵口服液指纹图谱的建立方法，所述蚁灵口服液由鼎突多刺蚁
、
>灵芝
、
桑葚
、
大枣
、
续断和陈皮组成；通过采用高效液相色谱法检测蚁灵口服液成分从而建立蚁灵口服液指纹图谱，所述建立方法包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：取蚁灵口服液，用水饱和的正丁醇提取，正丁醇层蒸干，残渣加甲醇溶解，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；（2）对照品溶液的制备：精密称取橙皮苷
、
柚皮芸香苷
、
川续断皂苷
VI、
川陈皮素
、
橘皮素对照品，加甲醇制成每
1ml
含有
200~500
μ
g
橙皮苷
、50~150
μ
g
柚皮芸香苷
、150~200
μ
g
川续断皂苷
VI、50~150
μ
g
川陈皮素
、50~150
μ
g
橘皮素的对照品溶液；（3）设置高效液相色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱温
25
‑
35℃
，流速为
0.8
‑
1.2ml/min
，检测波长为
200
‑
400nm
，并开启
PDA
检测；以乙腈为流动相
A
，以体积分数为
0.05
‑
0.15%
磷酸水溶液为流动相
B
，进行梯度洗脱，在体积比为
2~65︰98~35
的范围内梯度洗脱；分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液
5~20
μ
l
，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱；（4）将步骤（3）得到的液相色谱导入国家药典委中药色谱指纹图谱相似度评价系统
2012
版分析，得到蚁灵口服液的指纹图谱
。
[0006]优选地，所述步骤（1）的供试品溶液的制备包括：精密吸取蚁灵口服液
20ml
，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取4次，每次
30ml
，合并正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇
20ml
溶
解，
0.45
μ
m
微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液
。
[0007]优选地，所述步骤（2）的对照品溶液中橙皮苷的浓度为
387.63
μ
g
·
ml
‑1，柚皮芸香苷的浓度为
105.00 μ
g
·
ml
‑1，川续断皂苷
VI
的浓度为
149.07
μ
g
·
ml
‑1，川陈皮素的浓度为
105.38
μ
g
·
ml
‑1，橘皮素的浓度为
102.89
μ
g
·
ml
‑1。
[0008]优选地，所述步骤（3）包括：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以
Waters Symmetry C
18
为色谱柱，规格为
4.6mm
×
250mm
，5μ
m
，柱温
35℃
，流速为
1.0ml/min
，检测波长为
203nm
，并开启
PDA
检测；以乙腈为流动相
A
，以体积分数为
0.1%
磷酸水溶液为流动相
B
，进行梯度洗脱，流动相
A、B
的比例变化为
0~40min
，
A︰B
为
2%︰98%
→
30%︰70%
；
40~50min
，
A︰B
为
30%︰70%
→
44%︰56%
；
50~60min
，
A︰B
为
44%︰56%
→
65%︰35%
；分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液
10
μ
l
，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱
。
[0009]优选地，所述步骤（4）包括：采用国家药典委中药色谱指纹图谱相似度评价系统
2012
版，将步骤（3）得到的液相色谱的数据导入
、
多点校正
、
数据匹配，分析得到蚁灵口服液的指纹图谱
。
[0010]优选地，所述步骤（4）得到的蚁灵口服液的指纹图谱包括柚皮芸香苷对应的
19
号峰
、
橙皮苷对应的
21
号峰
、
川续断皂苷
VI
对应的
28
号峰
、
川陈皮素对应的
34
号峰
、
橘皮素对应的
36
号峰，其相对保留时间依次对应为
0.933、1.000、1.394、1.658、1.744。
[0011]优选地本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种蚁灵口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述蚁灵口服液由鼎突多刺蚁
、
灵芝
、
桑葚
、
大枣
、
续断和陈皮组成；通过采用高效液相色谱法检测蚁灵口服液成分从而建立蚁灵口服液指纹图谱，所述建立方法包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：取蚁灵口服液，用水饱和的正丁醇提取，正丁醇层蒸干，残渣加甲醇溶解，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；（2）对照品溶液的制备：精密称取橙皮苷
、
柚皮芸香苷
、
川续断皂苷
VI、
川陈皮素
、
橘皮素对照品，加甲醇制成每
1ml
含有
200~500
μ
g
橙皮苷
、50~150
μ
g
柚皮芸香苷
、150~200
μ
g
川续断皂苷
VI、50~150
μ
g
川陈皮素
、50~150
μ
g
橘皮素的对照品溶液；（3）设置高效液相色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱温
25
‑
35℃
，流速为
0.8
‑
1.2ml/min
，检测波长为
200
‑
400nm
，并开启
PDA
检测；以乙腈为流动相
A
，以体积分数为
0.05
‑
0.15%
磷酸水溶液为流动相
B
，进行梯度洗脱，在体积比为
2~65︰98~35
的范围内梯度洗脱；分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液
5~20
μ
l
，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱；（4）将步骤（3）得到的液相色谱导入国家药典委中药色谱指纹图谱相似度评价系统
2012
版分析，得到蚁灵口服液的指纹图谱
。2.
根据权利要求1所述的蚁灵口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤（1）的供试品溶液的制备包括：精密吸取蚁灵口服液
20ml
，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取4次，每次
30ml
，合并正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇
20ml
溶解，
0.45
μ
m
微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液
。3.
根据权利要求1所述的蚁灵口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤（2）的对照品溶液中橙皮苷的浓度为
387.63
μ
g
·
ml
‑1，柚皮芸香苷的浓度为
105.00 μ
g
·
ml
‑1，川续断皂苷
VI
的浓度为
149.07
μ
g
·
ml
‑1，川陈皮素的浓度为
105.38
μ
g
·
ml
‑1，橘皮素的浓度为
102.89
μ
g
·
ml
‑1。4.
根据权利要求1所述的蚁灵口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤（3）包括：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以
Waters Symmetry C
18
为色谱柱，规格为
4.6mm
×
250mm
，5μ
m
，柱温
35℃
，流速为
1.0ml/min
，检测波长为
203nm
，并开启
PDA
检测；以乙腈为流动相
A
，以体积分数为
0.1%
磷酸水溶液为流动相
B
，进行梯度洗脱，流动相
A、B
的比例变化为
0~40min
，
A︰B
为
2%︰98%
→
30%︰70%
；
40~50min
，
A︰B
为
30%︰70%
→
44%︰56%
；
50~60min
，
A︰B
为
44%︰56%
→
65%︰35%
；分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液
10
μ
l
，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对...

【专利技术属性】
技术研发人员：鄂秀辉，陆湘龙，王石齐，刘武占，孙霞，
申请(专利权)人：湖南迪诺制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：