一种诊断乳腺癌的分子标志物及其试剂盒与应用制造技术

本发明专利技术提供了一种诊断乳腺癌的分子标志物及其试剂盒与应用，涉及生物医学检测技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种诊断乳腺癌的分子标志物及其试剂盒与应用


[0001]本专利技术属于生物医学检测
，尤其涉及一种诊断乳腺癌的分子标志物及其试剂盒与应用
。

技术介绍

[0002]乳腺癌
(Breast cancer
，
BC)
已成为全球最常被诊断出的恶性肿瘤，每天都有大量的生命被夺走，并且其昂贵的治疗费用也给患者带来了巨大的经济负担
。BC
是一种异质性很强的疾病，可分为多种亚型，具有不同的组织学类型和生物学特征，从而具备独特的临床行为和治疗敏感性
。
[0003]在慢性炎症部位
(
包括肿瘤
)
的非淋巴组织中发育的异位淋巴器官称为三级淋巴结构
(Tertiary lymphoid structure
，
TLS)
，成熟
TLS
的结构特点就是存在
B
细胞富集区
。
越来越多的证据表明，在大多数类型的实体瘤中，
TLS
的存在与降低复发风险和增强免疫检查点阻断治疗
(Immune checkpoint blockade
，
ICB)
的疗效密切相关
。
虽然近年来，免疫治疗提高了患者在各种实体瘤或血液系统恶性肿瘤中的存活率，但大多数
BC
亚型对于
ICB
几乎没有反应，目前仅批准
ICB
用于
PD
‑/>L1
阳性三阴性乳腺癌
(Triple
‑
negative breast cancer
，
TNBC)
患者的治疗中
。
通常，
BC
并不被认为是一种免疫原性疾病，缺乏
T
淋巴细胞的浸润
、
免疫原性差和免疫抑制性肿瘤微环境是
BC
免疫治疗效果差的主要原因
。
最近的一项研究通过9基因
TLS
特征评估了
BC
中
TLS
的存在，并表明
TLS
的存在与早期肿瘤
TNM
分期呈正相关，同时，高
TLS
的
BC
患者表现出更好的预后，但在该研究中对
TLS
的评估依赖于常规诊断中不宜实施的方法
。
[0004]尽管目前已经在许多肿瘤中发现都存在
TLS
，但在不同研究中用于定义和表征
TLS
的标志物有所不同，这让
TLS
的后续对比研究变得复杂，同时，目前现有鉴定
TLS
的方法并不易于在日常临床工作中实施
。
因此，探索
TLS
的标准化测量方法有助于发挥
TLS
在不同疾病环境中的诊断和潜在预后价值
。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种诊断乳腺癌的分子标志物及其试剂盒与应用，本专利技术所述分子标志物可用于乳腺癌
TLS
的早期诊断，具有较高的敏感性和特异性
。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一种诊断乳腺癌的分子标志物，所述分子标志物为
CD20、CD8
和
CD23。
[0008]本专利技术提供了上述分子标志物在制备诊断乳腺癌早期诊断产品中的应用
。
[0009]本专利技术提供了上述分子标志物在制备分析三级淋巴结构产品中的应用
。
[0010]本专利技术还提供了一种诊断三级淋巴结构的试剂盒，包括：抗
CD20
抗体
、
抗
CD8
抗体
、
抗
CD23
抗体和免疫荧光二抗
。
[0011]优选的，所述免疫荧光二抗为
488
标记的羊抗鼠
IgG(H+L)
和
594
标记的羊抗鼠
IgG
(H+L)。
[0012]相对于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：
[0013]本专利技术首次采用
CD20、CD8
和
CD23
作为一个组合用于乳腺癌中
TLS
的早期诊断，具有较高的敏感性和特异性，有助于进一步改进诊断
TLS
的准确性，进而为肿瘤的个体化精准治疗提供更多有价值的线索
。
附图说明
[0014]图1‑
图3为多重免疫荧光结果，其中图1为实施例1多重免疫荧光中
CD20
免疫荧光阳性结果，对应波长
647
，荧光为绿色；图2为实施例1多重免疫荧光中
CD23
免疫荧光阳性结果，对应波长
488
，荧光为红色；图3为实施例1多重免疫荧光中
CD8
免疫荧光阴性结果，对应波长
594
，荧光为灰色；
[0015]图4为
TLS
阳性
H&E
染色切片的成像；
[0016]图5为
TLS
阳性
CD23
标志物免疫组化染色切片的成像；
[0017]图6为
CD20、CD8、Bcl6、CD23
单种免疫荧光标志物鉴定
TLS
的
ROC
曲线；图中
AUC(CD20)
＝
0.665
；
AUC(Bcl6)
＝
0.675
；
AUC(CD8)
＝
0.722
；
AUC(CD23)
＝
0.798
；
[0018]图7为两种免疫荧光标志物鉴定
TLS
的
ROC
曲线；图中
AUC(CD20&Bcl6)
＝
0.708
；
AUC(CD20&CD8)
＝
0.751
；
AUC(CD20&CD23)
＝
0.841
；
AUC(Bcl6&CD8)
＝
0.733
；
AUC(Bcl6&CD23)
＝
0.816
；
AUC(CD8&CD23)
＝
0.850
；
[0019]图8为三种免疫荧光标志物鉴定
TLS
的
ROC
曲线；图中<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种诊断乳腺癌的分子标志物，其特征在于，所述分子标志物为
CD20、CD8
和
CD23。2.
权利要求1所述分子标志物在制备诊断乳腺癌早期诊断产品中的应用
。3.
权利要求1所述分子标志物在制备分析三级淋巴结构产品中的应用
。4.
一种诊断三级淋巴结构的试剂盒，其特征在于，包括：抗
CD20
...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐诗聪，陈凯，刘德权，杨日荣，王青，宋颖，毕萍萍，孙珂，郭瑢，吕鸭凤，杨富盈，赵家雯，李秀钦，陈东，
申请(专利权)人：陈凯，
类型：发明
国别省市：