【技术实现步骤摘要】
一种Trmt10a基因敲除小鼠模型、构建方法及其应用
[0001]本专利技术属于动物模型及其应用领域,具体涉及一种
Trmt10a
基因敲除小鼠模型
、
构建方法及其应用
。
技术介绍
[0002]tRNA
是翻译装置中将遗传信息解码为蛋白质的关键分子
。
在
tRNA
成熟过程中会发生多种转录后修饰,这些修饰参与调节
tRNA
的折叠
、
稳定性和
mRNA
翻译的有效性和准确性
。
与
tRNA
上大量的修饰相对应,在机体中存在多种
tRNA
修饰酶
。tRNA
修饰酶一般是进化保守的,在不同物种中催化类似
tRNA
的修饰
。
越来越多的证据表明,由相应的
tRNA
修饰酶基因突变导致的特异性
tRNA
修饰失调与一系列人类疾病相关
。
[0003]t ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种
Trmt10a
基因敲除小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述方法包括使用
CRISPR/Cas9
技术靶向敲除小鼠
Trmt10a
基因
。2.
如权利要求1所述的
Trmt10a
基因敲除小鼠模型的构建方法,其特征在于,靶向
Trmt10a
基因的第3号外显子,使第3号外显子产生
11bp
的碱基缺失
。3.
如权利要求1所述的
Trmt10a
基因敲除小鼠模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1
:基于
CRISPR/Cas9
技术,确定
Trmt10a
基因的敲除区域,根据确定的敲除区域设计特异性
sgRNA1
和
sgRNA2
,
sgRNA1
和
sgRNA2
的序列分别如
SEQ ID NO.1
和
SEQ ID NO.2
所示;
S2
:将有活性的
sgRNA1、sgRNA2、cas9 mRNA
显微注射入小鼠受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕雌鼠体内,待其怀孕产仔获得
F0
代小鼠;
S3
:将
F0
代杂合子小鼠与野生型小鼠杂交,筛选获得
F1
代杂合子小鼠
。S4
...
【专利技术属性】
技术研发人员:汪香婷,史庆华,孙慧慧,张博文,
申请(专利权)人:安徽省立医院中国科学技术大学附属第一医院,
类型:发明
国别省市:
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