一种乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒及其制备方法，所述制备方法包括将依他硝唑溶液和含有紫杉醇的

【技术实现步骤摘要】
一种乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒及其制备方法
。

技术介绍

[0002]肿瘤组织中存在乏氧细胞，乏氧细胞增加了肿瘤对电离辐射的抗拒性，即降低了肿瘤的放射敏感性
。
就放疗而言，乏氧现象的存在导致放疗中肿瘤细胞对电离辐射
(X
线或
γ
线
)
的耐受
。
[0003]目前认为应用放射增敏剂是最有希望解决这个难题的方法
。
放射增敏剂是提高肿瘤细胞对放疗的敏感性，增强放射线对肿瘤细胞的杀伤率，改善放疗效果的药物
。
由于放射增敏药物存在一定的毒副作用，所以目前联合用药是比较现实
、
稳妥
、
易行的提高疗效并减低毒性的途径
。
[0004]依他硝唑是最有代表性的硝基咪唑类高电子亲和力的放射增敏药物之一，是硝基咪唑的酰胺衍生物，其增敏作用是通过降低细胞内天然放射保护剂谷胱甘肽水平来发挥，它能够选择性地与乏氧细胞结合并模拟氧的放射增敏作用
。
[0005]紫杉醇是新一代抗肿瘤化疗药物，其抑癌机理是作用于微管
/
微管蛋白系统，促进微管蛋白装配成微管，抑制微管解聚，从而导致微管束排列异常，形成星状体，使纺锤体失去正常功能，致使癌细胞死亡
。
近年研究发现紫杉醇具有放射增敏作用，其机理是通过抑制有丝分裂，导致细胞停留在细胞周期的
G2
期，而
G2
期是对放射极为敏感的阶段，从而达到增敏作用
。
[0006]纳米生物技术是国际生物
的前沿和热点，在医药卫生领域有着广泛应用和明确的产业化前景，其中纳米药物是药物研究领域中一个很有生命力的新方向，由于药物本身或其载体为纳米尺度，故具有一些特别的性质，与传统分子药物相比纳米药物的最大优点在于：纳米药物利用纳米颗粒的小尺寸效应
、
容易进入细胞而实现高疗效；纳米药物的比表面积大
、
链接或载带的功能基团或活性中心多，可以实现治疗与疗效跟踪同步化；载体材料性能优越，便于生物降解或吸收；纳米具有的多孔
、
中空
、
多层等结构特性，易于药物缓释控制，改变药物在体内的半衰期；药物纳米载体可提高难溶药物的溶解率和吸收率等
。
近年来，靶向纳米递药系统在多种疾病特别是肿瘤治疗中展示了巨大潜力与应用价值，相关研究与开发备受瞩目，多种药物已处于临床前期
、
临床
I
期与临床Ⅱ期研究中
。
将抗体结合在载药纳米粒上，与目标细胞表面的抗原进行特异性结合，使药物能够准确送到靶区，实现对病灶组织的主动靶向治疗，从而提高疗效，减少给药剂量和毒性反应
。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒及其制备方法，该纳米粒能够靶向乏氧肿瘤细胞，并能够持续释放放射曾敏药物，能够显著抑制肿
瘤细胞的克隆
。
[0008]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0009]本专利技术第一方面提供了一种乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
[0010](a)
将依他硝唑溶液和含有紫杉醇的
PLGA
二氯甲烷溶液进行混合搅拌，得到初次乳化液；
[0011](b)
将初次乳化液添加至
PVA
水溶液中搅拌
、
超声处理，得到悬浊液，再去除悬浊液中的二氯甲烷
、
离心
、
洗涤
、
冷冻干燥，得到联合装载紫杉醇和依他硝唑纳米粒；
[0012](c)
将联合装载紫杉醇和依他硝唑纳米粒分散于磷酸二氢钠溶液中，得到纳米粒悬液，向纳米粒悬液中添加
EDC
溶液和
NHS
溶液并搅拌以活化
PLGA
的羧基，得到混合液；
[0013](d)
向混合液中添加
VEGF
单抗溶液进行反应
(
即
VEGF
单抗的氨基通过酰胺键与纳米粒
PLGA
的羧基端共价结合
)
，再经离心
、
洗涤
、
冷冻干燥，即得乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒
。
[0014]优选地，所述步骤
(a)
中，依他硝唑溶液和含有紫杉醇的
PLGA
二氯甲烷溶液的体积比为
1∶(15
～
25)。
[0015]优选地，所述步骤
(a)
中，依他硝唑溶液浓度为
20
～
40mg/ml
，含有紫杉醇的
PLGA
二氯甲烷溶液中紫杉醇浓度为1～
1.5mg/ml
，
PLGA
的质量浓度为2％～3％
。
[0016]优选地，所述步骤
(b)
中，初次乳化液和
PVA
水溶液的体积比为
1∶(4
～
6)。
[0017]优选地，所述步骤
(b)
中，
PVA
水溶液的质量浓度为
0.8
％～
1.5
％
。
[0018]优选地，所述步骤
(b)
中，离心转速为
2800
～
3200rpm。
[0019]优选地，所述步骤
(c)
中，纳米粒悬液中联合装载紫杉醇和依他硝唑纳米粒的浓度为4～
6mg/ml
，纳米粒悬液的
pH
值为6～
6.5。
[0020]优选地，所述步骤
(c)
中，纳米粒悬液
、EDC
溶液和
NHS
溶液体积比为
(80
～
120)∶1∶1
；
[0021]EDC
溶液浓度为
40
～
60mg/ml
，
NHS
溶液浓度为
40
～
60mg/ml。
[0022]优选地，所述步骤
(c)
中，搅拌时间不低于
20min。
[0023]优选地，所述步骤
(d)
中，混合液和
VEGF
单抗溶液的体积比为
1∶(0.8
～
1.2)
；
[0024]VEGF
单抗溶液浓度为
0.8
～本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(a)
将依他硝唑溶液和含有紫杉醇的
PLGA
二氯甲烷溶液进行混合搅拌，得到初次乳化液；
(b)
将初次乳化液添加至
PVA
水溶液中搅拌
、
超声处理，得到悬浊液，再去除悬浊液中的二氯甲烷
、
离心
、
洗涤
、
冷冻干燥，得到联合装载紫杉醇和依他硝唑纳米粒；
(c)
将联合装载紫杉醇和依他硝唑纳米粒分散于磷酸二氢钠溶液中，得到纳米粒悬液，向纳米粒悬液中添加
EDC
溶液和
NHS
溶液并搅拌，得到混合液；
(d)
向混合液中添加
VEGF
单抗溶液进行反应，再经离心
、
洗涤
、
冷冻干燥，即得乏氧肿瘤细胞靶向和高效放射增敏的纳米粒
。2.
根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤
(a)
中，依他硝唑溶液和含有紫杉醇的
PLGA
二氯甲烷溶液的体积比为
1∶(15
～
25)。3.
根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤
(a)
中，依他硝唑溶液浓度为
20
～
40mg/ml
，含有紫杉醇的
PLGA
二氯甲烷溶液中紫杉醇浓度为1～
1.5mg/ml
，
PLGA
的质量浓度为2％～3％
。4.
根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤
(b)
中，初次乳化液和
PVA
水溶液的体积比为
1∶(4
～
6)。5.
根据权利要求1所述的制...

【专利技术属性】
技术研发人员：金成，
申请(专利权)人：西电集团医院，
类型：发明
国别省市：