RBM22制造技术

技术编号:39801089 阅读:12 留言:0更新日期:2023-12-22 02:31
本发明专利技术涉及生物医药工程技术领域,提供了

【技术实现步骤摘要】
RBM22及其相关物质在治疗关节炎中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
,具体涉及
RNA
结合模体
22(RBM22)
作为靶点在制备治疗关节炎尤其类风湿性关节炎药物中的应用,还涉及包含其的载体和药物组合物


技术介绍

[0002]关节炎是一种进展较快

危害较大的炎症性免疫性疾病,其典型病理特征是全身多处关节处致病性促炎免疫细胞的浸润以及持续性炎症,导致不可逆的骨破坏及关节畸形

巨噬细胞和
T
淋巴细胞被公认是关节腔内最重要的致病细胞,前者通过分泌白细胞介素

12(IL

12)
促进
T
细胞中
γ
干扰素
(IFN

γ
)
的表达,而后者又反馈促进巨噬细胞的致病性激活

可以说,巨噬细胞和
T
淋巴细胞二者相互促进又彼此协同,进一步与病灶中的基质细胞相互作用,造成滑膜恶性增生以及骨质破坏,直接造成关节炎病理损伤

目前临床上主要使用非甾体抗炎药物或糖皮质激素等药物虽然能够快速消炎止痛,然而无法抑制骨关节和组织中的进展性炎症破坏

因此,通过研究关节炎发病的病理学过程和致病基因,从根本上阻断和干预关节疾病中免疫细胞异常活化的病理效应,具有重要的现实意义和临床转化前景

[0003]通过分析类风湿性关节炎患者和健康人的滑膜组织的差异表达基因,我们鉴定剪接体蛋白
RNA
结合模体
22(RNA

Binding Motif22,RBM22)
在类风湿性关节炎患者中病灶组织中的低表达可能参与了类风湿关节炎的发生
。RBM22
,又称为
Cwc2

ZC3H16
,全长
420
个氨基酸,在酵母及多种哺乳动物之间高度保守,提示该蛋白具有极为重要的生物学功能

目前对于该蛋白的研究较少,主要聚焦于其经典的剪接体催化中心的形成

一项对于酵母剪接体结构的研究发现酵母
Cwc2
是人
RBM22
的同系物,二者在功能和结构上都极为相似,通过与
U6snRNA

pre

mRNA
等剪接体重要的
RNA
元件发生物理接触,诱导剪接体形成激活的活性中心构象,参与
RNA
的可变剪接

而在人的
5q
综合征
(
一种特殊的骨髓增生异常综合症
)
中发现患者
CD34
+
细胞中位于5号染色体上的
RBM22
表达下降一半以上,可能与这种血液免疫疾病的发生有关

也有研究者通过生物信息学分析鉴定
RBM22
是一种肿瘤抑制因子,其突变或异常会导致前列腺癌的发生

因此激活或增强
RBM22
的活性对上述疾病存在潜在的治疗效应

虽然
RBM22
蛋白在类风湿性关节炎等自身免疫病中的作用尚无报道,但我们合理猜测
RBM22
低表达可能与关节炎的发生有关

[0004]综上所述,本领域迫切需要开发新的关节炎的缓解和治疗策略,抑制关节局部炎症微环境中的免疫细胞活化和致病效应,控制所导致的关节炎及其相关症状和
/
或其它并发症


技术实现思路

[0005]本专利技术针对上述问题进行,首先确认
RBM22
异常表达对关节炎尤其类风湿性关节炎的不利影响,然后基于该靶点观察
RBM22
异常表达消除或缓解后关节的恢复情况,进而确定
RBM22
在关节炎的发病和进展中的作用

[0006]本专利技术的研究过程如下:
[0007]使用
CRE

LOXP
系统敲除了小鼠髓系细胞中的
RBM22
,发现在小鼠的实验性关节炎模型中加重了小鼠全身多处关节的炎症反应,包括滑膜恶性增殖和致病免疫细胞浸润

通过分析
RBM22
敲除后巨噬细胞炎症因子表达,发现
IL

12
是受到
RBM22
控制的分泌型致病因子,参与了类风湿性关节炎疾病加重的病理过程

使用靶向
RBM22
基因的特异性小干扰
RNA(siRNA)
沉默
RBM22
的表达,也可以分别在人和小鼠的原代单核来源的巨噬细胞中上调
IL

12
的产生

据此得到结论,类风湿性关节炎中
RBM22
的低表达,通过上调
IL

12
的产生,在关节炎的发病和进展中发挥重要作用

[0008]基于上述实验结果,使用慢病毒过表达的方式,恢复
RBM22
的表达,以期降低关节炎局部微环境中单核
/
巨噬细胞产生的
IL

12
的水平,从而实现类风湿性关节炎的缓解和治疗


RBM22
基因的
DNA
片段克隆扩增,并插入名称为
GV643
的慢病毒载体中,成功构建了
RBM22
过表达的慢病毒,并将其命名为
lentivirus

RBM22。
接着,确认感染
lentivirus

RBM22
慢病毒可以成功过表达
RBM22
蛋白后,对人的原代单核
/
巨噬细胞使用上述
lentivirus

RBM22
慢病毒可以抑制单核
/
巨噬细胞中
IL

12
的产生,提示对类风湿性关节炎患者的关节微环境中异常活跃的免疫细胞起到抑制性作用,从而实现类风湿性关节炎的缓解和治疗

[0009]基于上述研究,本专利技术的具体技术方案如下:
[0010]本专利技术的第一方面,提供了
RBM22
促进剂在制备治疗关节炎或其并发症药物中的用途

[0011]其中,关节炎为巨噬细胞和
T
淋巴细胞致病引发的关节炎,包括类风湿性关节炎

关节炎的相关症状是以关节疼痛

肿胀
、<本文档来自技高网
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.RBM22
促进剂在制备治疗关节炎或其并发症药物中的用途
。2.
根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述关节炎为巨噬细胞和
T
淋巴细胞致病引发的关节炎,包括类风湿性关节炎
。3.
根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述
RBM22
促进剂选自如下情形的任意一种或多种:外源性
RBM22
蛋白或编码其的核酸

促进
RBM22
蛋白表达或活性功能的物质

促进编码
RBM22
蛋白的核酸分子过表达的物质

包裹
RBM22
蛋白编码核酸的脂质体或纳米材料

能够在体内转化为
RBM22
的前体蛋白或其偶联物或复合物
。4.
根据权利要求3所述的用途,其特征在于:其中,所述
RBM22
蛋白选自如下任一情形:
(a)、
具有
SEQ ID NO.2
所示氨基酸序列的多肽;
(b)、
具有与
SEQ ID NO.2
所示氨基酸序列同源或具有序列相同性,且具有抑制炎症因子产生和治疗关节炎及其相关症状或其它并发症的蛋白质或多肽;
(c)、(a)

(b)
的氨基酸序列中经过取代

缺失或添加一个或几个氨基酸

且具有抑制炎症因子产生和治疗关节炎症的蛋白质或多肽,或由
(a)

(b)
衍生的蛋白质或多肽,所述编码
RBM22
蛋白的核酸分子选自如下任一情形:
(i)
具有
SEQ ID NO.1
所示核苷酸序列的核酸分子;
(ii)
在严格条件下与
(i)
限定的核苷酸序列杂交的分子;
(iii)

SEQ ID NO.1
所示的核苷酸序列同源或具有序列相同性,且编码具有抑制...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘星光张赟恺
申请(专利权)人:中国人民解放军海军军医大学
类型:发明
国别省市:

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