一株副短短芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及污水环境治理技术领域，且公开了一株副短短芽孢杆菌的应用，包括以下实验步骤：

【技术实现步骤摘要】
一株副短短芽孢杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及污水环境治理
，具体为一株副短短芽孢杆菌及其应用
。

技术介绍

[0002]我国现代化进程不断加快，人民生活水平日益提高
。
随之，生产生活产生大量含有机物的污水
、
畜牧养殖中产生大量的粪尿
、
农业种植中因为化肥随地表水径流等引起的面源污染
、
水产养殖中因为集约化和高密度规模养殖引起的水体富营养化等问题越来越严重，水污染处理的问题日益突出
。
[0003]在畜禽养殖
、
水产养殖等废水中，由于
NH4+
‑
N
含量显著高于普通污染水体
。
有高浓度氨污染物的养殖废水，若处置不当将导致严重的环境问题，威胁人类健康
。
水体中氨氮去除方法主要包括物理法
、
化学法
、
生物法等，探索研究和开发高效经济的氨氮去除方法，对提高污水处理效率及对人类生产生活具有重要意义
。
应用生物法进行脱氮，具有可持续性
、
生态绿色
、
成本低
、
容易操作
、
无二次污染
、
等优点，因此生物脱氮技术备受关注
。
[0004]水体脱氮除氨技术主要是通过微生物催化进行的生化反应实现氮素的利用或以氮气形式排放到空气中
。
包括硝化细菌的硝化反应
、
反硝化细菌的反硝化反应
、
氨氧化细菌的氨氧化转化等
。
由于多种生境中都存在脱氨氮的微生物，因此从不同环境条件下的采集样品，分离降低氨氮的微生物，经过人工繁殖后制备成微生物菌剂，就可应用于水体中的脱氮等处理
。

技术实现思路

[0005](
一
)
解决的技术问题
[0006]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株副短短芽孢杆菌及其应用
。
[0007](
二
)
技术方案
[0008]本专利技术为实现上述第一专利技术目的，采用以下技术方案：
[0009]一株副短短芽孢杆菌
(Brevibacillus parabrevis LY12)
，其特征在于，所述该副短短芽孢杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心
(
简称
CCTCC)
，保藏编号为
CCTCC NO:M20231034
，保藏地址位于湖北省武汉市武汉大学，保藏日期为
2023
年6月
15
日
。
[0010]本专利技术为实现上述第二专利技术目的，采用以下技术方案：
S1
：准备实验所需的各培养基及配方，包括：无机盐
、
富集培养基一
、
富集培养基二和分离培养基；
[0011]S2
：富集培养基一上进行富集培养；
[0012]S3
：富集培养基二上进一步富集培养；
[0013]S4
：离培养基上进行分离培养；
[0014]S5
：分离培养基上分离纯化，获得最佳的一株菌株，并编号为
LY12
；
[0015]S6
：菌株
LY12
降氨氮浓度的测定；
[0016]S7
：菌株
LY12
降氨氮效果重复验证；
[0017]S8
：
LY12
菌株的鉴定
。
[0018]优选的，所述
S1
中，无机盐配方
(g/L)
包括：
NaCl
的含量为5，
K2HPO4的含量为
15
，
MgSO4的含量为5，富集培养基一
(g/L)
包括：葡萄糖的含量为
10
，
(NH4)2SO4的含量为2，无机盐的含量为
100
，富集培养基二
(g/L)
包括：葡萄糖的含量为5，
(NH4)2SO4的含量为4，无机盐的含量为
100
，分离培养基
(g/L)
包括：葡萄糖的含量为
0.5
，
(NH4)2SO4的含量为
0.75
，无机盐的含量为
100
，琼脂的含量为
20。
[0019]优选的，所述
S2
中包括：富集培养基一装液量
100mL/
瓶，用于降氨氮微生物的富集培养，从而便于分离，从水塘
、
养殖水体
、
污水处理厂
、
湖水
、
活性污泥等多处环境中采集样品，活性污泥固态样品以
1:10(
重量比
)
用无菌水稀释
10
倍后制成液体样品，不同样品各取
5mL
接种于含富集培养基
(100mL/
瓶
)
的瓶中，放入
37℃、180rpm
摇床培养
24h
，每种水样各接2瓶作为平行样重复
。
[0020]优选的，所述
S3
中包括：富集培养基二的成分中增加了
(NH4)2SO4，可以进一步富集对氨氮具有利用能力的微生物增殖，从而有利于进一步选择分离出降氨氮的菌
。
富集培养基二的装液量
100mL/
瓶，与富集培养基一一一对应，各取富集培养基一中富集培养后的菌液
5mL
分别接种于富集培养基二，放入
37℃、180rpm
摇床培养
24h。
[0021]优选的，所述
S4
中，分离培养基为固体培养基，倒平板后，冷却，取
100
μ
L
富集培养基二中富集培养的菌液，涂布于分离培养基平板上，涂布均匀后放入
37℃
培养箱中培养
24
～
48h。
[0022]优选的，所述
S5
中，挑取分离培养基上涂布后获得的单菌落，利用平板划线法接种于分离培养基上获得单菌落，分离纯化，连续3次，获得纯培养，观察菌落宏观形态
、
显微镜观察细胞形态，保存纯菌种，对获得的最佳的一株菌株编号为
LY12。
[0023]优选的，所述
S6
中，使用纳氏试剂分光度计法检测菌株
LY12
降氨氮的能力
。
[0024]优选的，所述
S7
中，将分离得到的降氨氮保藏菌株
LY12
在
LB
培养基上<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一株副短短芽孢杆菌
(Brevibacillus parabrevis LY12)
，其特征在于，所述该副短短芽孢杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心
(
简称
CCTCC)
，保藏编号为
CCTCC NO:M20231034
，保藏地址位于湖北省武汉市武汉大学，保藏日期为
2023
年6月
15
日
。2.
一株副短短芽孢杆菌的应用，其特征在于，包括以下实验步骤：
S1
：准备实验所需的各培养基及配方，包括：无机盐
、
富集培养基一
、
富集培养基二和分离培养基；
S2
：富集培养基一上进行富集培养；
S3
：富集培养基二上进一步富集培养；
S4
：离培养基上进行分离培养；
S5
：分离培养基上分离纯化，获得最佳的一株菌株，并编号为
LY12
；
S6
：菌株
LY12
降氨氮浓度的测定；
S7
：菌株
LY12
降氨氮效果重复验证；
S8
：
LY12
菌株的鉴定
。3.
根据权利要求2所述的一株副短短芽孢杆菌的应用，其特征在于：所述
S1
中，无机盐配方
(g/L)
包括：
NaCl
的含量为5，
K2HPO4的含量为
15
，
MgSO4的含量为5，富集培养基一
(g/L)
包括：葡萄糖的含量为
10
，
(NH4)2SO4的含量为2，无机盐的含量为
100
，富集培养基二
(g/L)
包括：葡萄糖的含量为5，
(NH4)2SO4的含量为4，无机盐的含量为
100
，分离培养基
(g/L)
包括：葡萄糖的含量为
0.5
，
(NH4)2SO4的含量为
0.75
，无机盐的含量为
100
，琼脂的含量为
20。4.
根据权利要求2所述的一株副短短芽孢杆菌的应用，其特征在于：所述
S2
中包括：富集培养基一装液量
100mL/
瓶，用于降氨氮微生物的富集培养，从而便于分离，从水塘
、
养殖水体
、
污水处理厂
、
湖水
、
活性污泥等多处环境中采集样品，活性污泥固态样品以
1:10(
重量比
)
用无菌水稀释
10
倍后制成液体样品，不同样品各取
5mL
接种于含富集培养基
(100mL/
瓶<...

【专利技术属性】
技术研发人员：易清，陈建，易鹏飞，
申请(专利权)人：广州微立旺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：