一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理及应用制造技术

本发明专利技术涉及环境水处理技术领域，且公开了一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理的应用，包括以下步骤：步骤一

【技术实现步骤摘要】
一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理及应用


[0001]本专利技术涉及环境水处理
，具体为一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理及应用
。

技术介绍

[0002]含硫污水的来源非常广泛，硫元素污染的水体不但会散发恶臭，带来生理感官上的不适，更会伴随着腐蚀性与生物毒性，对管道设备造成损伤破坏，毒害污染区域的动植物，甚至威胁到人们的生命健康
。
如何经济
、
快速
、
高效地处理含硫污水，是一个长期困扰着人们的问题
。
[0003]在含硫污水中，硫元素的存在方式和价态分布多种多样，从最低价态
(
‑2价
)
的硫化氢
、
硫醇到最高价态
(+6
价
)
的硫酸盐，均会对水质造成不同程度的危害
。
含硫化合物污染中，硫化氢
、
硫代硫酸钠等还原性硫化合物给水体带来的影响较大
。
因此，对水体中低价态还原硫化合物的降解，是含硫污水处理技术的重中之重
。
[0004]微生物在自然界的硫元素循环中扮演着重要的角色，与传统方法相比，污水的微生物处理技术具有绿色
、
环保，且成本低
、
效益高等优势
。
硫氧化细菌
(SOB)
在自然界广泛分布，能够氧化低价态的含硫化合物并转化为对环境危害较小的高价含硫化合物，从而治理污染物
。
硫氧化细菌可以从不同环境中富集分离出来，这些微生物可以代谢硫代硫酸盐
、
硫化物和单质硫等低价态硫，将其作为能量来源，在满足自身生长需求的同时促进硫元素的自然循环，同时达到污水处理的效果
。
[0005]乳酸寡养单胞菌
(Stenotrophomonas lactitubi)
是寡养单胞菌属的一员，该属的微生物有较多污水处理应用价值，例如作为高效除氮菌剂
(
包海花，一株寡养单胞菌及其应用和微生物菌剂
.
河南省，中原环保股份有限公司，
2020
‑
12
‑
01.)、
降解有机含磷农药
(
邓蜀艳
.
寡养单胞菌
G1
对有机磷农药降解的研究
[D].
安徽农业大学，
2014.)、
降解甲苯
(
肖建军，李亚龙，杨琦
.
寡养单胞菌降解石油污染土壤中的甲苯
[J].
环境工程，
2018,36(04):186
‑
189.)
等
。
[0006]寡养单胞菌属中的某些种已被证明具有硫氧化能力，本专利技术专利从工业污水活性污泥中分离到一株乳酸寡养单胞菌，发现该菌具有较好的硫氧化能力
。

技术实现思路

[0007](
一
)
解决的技术问题
[0008]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理及应用
。
[0009](
二
)
技术方案
[0010]本专利技术为实现上述第一专利技术目的，采用以下技术方案：
[0011]一株硫氧化细菌
(Stenotrophomonas lactitubi SOB
‑
1)
，该硫氧化细菌保藏于中国典型培养物保藏中心
(
简称
CCTCC)
，保藏编号为
CCTCC NO:M20231035
，保藏地址位于湖北
省武汉市武汉大学，保藏日期为
2023
年6月
15
日
。
[0012]本专利技术为实现上述第二专利技术目的，采用以下技术方案：
[0013]一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理的应用，包括以下步骤：
[0014]步骤一
、
对硫氧化细菌的筛选分离
[0015]1)
菌源富集驯化及初筛；
[0016]2)
准备多组实验用驯化培养基；
[0017]3)
微生物菌株分离纯化；
[0018]步骤二
、
对分离菌株的复筛及功能研究；
[0019]步骤三
、
对候选菌株的鉴定；
[0020]步骤四
、
应用条件优化
、
菌剂制备及净水效果试验
。
[0021]优选的，所述步骤一中，富集驯化分三轮进行，每轮使用的培养基中依次增加硫代硫酸钠的浓度并降低共底物的添加量，创造硫氧化细菌喜好的环境条件，提高培养基中硫氧化细菌的浓度以形成生长优势，同时通过提高筛选压力便于筛选分离到目标菌
。
[0022]优选的，所述步骤一中，需准备三组驯化培养基，分别为：
[0023]驯化培养基1：
4g/L Na2S2O3
·
5H2O、10g/L CH3COONa、1.2g/L K2HPO4、1.2g/L KH2PO4、0.5g/L NH4Cl、0.2g/L MgCl2
·
6H2O、0.2g/L FeCl3、2g/L
酵母提取物，溶剂为无菌水；
[0024]驯化培养基2：
8g/L Na2S2O3
·
5H2O、10g/L CH3COONa、1.2g/L K2HPO4、1.2g/L KH2PO4、0.5g/L NH4Cl、0.2g/L MgCl2
·
6H2O、0.2g/L FeCl3、1g/L
酵母提取物，溶剂为无菌水；
[0025]驯化培养基3：
16g/L Na2S2O3
·
5H2O、10g/L CH3COONa、1.2g/L K2HPO4、1.2g/L KH2PO4、0.5g/L NH4Cl、0.2g/L MgCl2
·
6H2O、0.2g/L FeCl3
，溶剂为无菌水
。
[0026]优选的，所述步骤一中，选择培养基中的混合培养液，
8000xg
离心
5min
，去除上清液并加入等量无菌水吹打混匀，之后用无菌水进行梯度稀释，得到
10
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5五种浓度的稀释液，将不同浓度的菌液涂布到
LB
固体培养基
(
蛋白胨
10g/L
，酵母提取物
5g/L
，氯化钠
10g/L
，琼脂
1.5
％
)
平板上，置于
37℃
恒温培养箱培养，定期观察培养基上菌株的生长本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一株硫氧化细菌
(Stenotrophomonas lactitubi SOB
‑
1)
，其特征在于，该硫氧化细菌保藏于中国典型培养物保藏中心
(
简称
CCTCC)
，保藏编号为
CCTCC NO:M 20231035
，保藏地址位于湖北省武汉市武汉大学，保藏日期为
2023
年6月
15
日
。2.
一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理及应用，其特征在于，包括以下步骤：步骤一
、
对硫氧化细菌的筛选分离
1)
菌源富集驯化及初筛；
2)
准备多组实验用驯化培养基；
3)
微生物菌株分离纯化；步骤二
、
对分离菌株的复筛及功能研究；步骤三
、
对候选菌株的鉴定；步骤四
、
应用条件优化
、
菌剂制备及净水效果试验
。3.
根据权利要求2所述的一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理的应用，其特征在于：所述步骤一中，富集驯化分三轮进行，每轮使用的培养基中依次增加硫代硫酸钠的浓度并降低共底物的添加量，创造硫氧化细菌喜好的环境条件，提高培养基中硫氧化细菌的浓度以形成生长优势，同时通过提高筛选压力便于筛选分离到目标菌
。4.
根据权利要求2所述的一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理的应用，其特征在于：所述步骤一中，需准备三组驯化培养基，分别为：驯化培养基1：
4g/L Na2S2O3
·
5H2O、10g/L CH3COONa、1.2g/L K2HPO4、1.2g/L KH2PO4、0.5g/L NH4Cl、0.2g/L MgCl2
·
6H2O、0.2g/L FeCl3、2g/L
酵母提取物，溶剂为无菌水；驯化培养基2：
8g/L Na2S2O3
·
5H2O、10g/L CH3COONa、1.2g/L K2HPO4、1.2g/L KH2PO4、0.5g/L NH4Cl、0.2g/L MgCl2
·
6H2O、0.2g/L FeCl3、1g/L
酵母提取物，溶剂为无菌水；驯化培养基3：
16g/L Na2S2O3
·
5H2O、10g/L CH3COONa、1.2g/L K2HPO4、1.2g/L KH2PO4、0.5g/L NH4Cl、0.2g/L MgCl2
·
6H2O、0.2g/L FeCl3
，溶剂为无菌水
。5.
根据权利要求1所述的一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理的应用，其特征在于：所述步骤一中，选择培养基中的混合培养液，
8000xg
离心
5min
，去除上清液并加入等量无菌水吹打混匀，之后用无菌水进行梯度稀释，得到
10
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5五种浓度的稀释液，将不同浓度的菌液涂布到
LB
固体培养基
(
蛋白胨
10g/L
，酵母提取物
5g/L
，氯化钠
10g/L
，琼脂
1.5
％
)
平板上，置于
37℃
恒温培养箱培养，定期观察培养基上菌株的生长情况，挑取菌落独立清晰
、
生长特征明显的不同菌落，通过划线分离法转接到
LB
固体培养基平板上，观察各平板上菌株的生长情况，若生长出的菌落形态不一致，则从该平板上重新挑取菌落进行划线分离和培养，多次重复此步骤直至培养基上生长的菌株形态一致，为不同菌株编号并置于冰箱保存
。6.
根据权利要求2所述的一株硫氧化细菌在含硫物质的氧化处理的应用，其特征在于：所述步骤二中包括：从长有纯菌株的
LB
固体平板上挑取菌落，接种到
5mL LB
液体培养基试管中，置于
37℃
恒温摇床以
180rpm
转速振荡培养，进行菌株活化，活化一天之后取培养基混合液
3mL
，
8000xg
离心
5min
除去上清，沉淀用
3mL
无菌水悬浮后以3％
(v/v)
的接种量接种到硫代硫酸钠去除培养基中，置于
37℃
恒温摇床以
180rpm
转速振荡培养三日，每
24h
对其进行
取样，
12000rpm...

【专利技术属性】
技术研发人员：易清，陈建，易鹏飞，
申请(专利权)人：广州微立旺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：