一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌及筛选分离方法技术

本发明专利技术公开了一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌及筛选分离方法，属于芽孢杆菌领域。一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌，包括按照重量份数配制的以下组分：固态培养基30～50份、芽孢杆菌液10～15份、枯草芽孢杆菌液15～20份、好氧反硝化菌液10～15份、蜡状芽孢杆菌液10～15份、解淀粉芽孢杆15～20份，所述固态培养基的制备方法包括以下步骤：1）原料：牛肉膏粉3～6份，胰酪蛋白胨10～20份，氯化钠4～8份，琼脂15～30份，纯净水700～1500mL；2）制法：将纯净水700～1500mL加热至40～50℃。本发明专利技术能够提升菌种的繁殖能够力，从而提高降解亚硝酸盐的能力。硝酸盐的能力。

【技术实现步骤摘要】
一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌及筛选分离方法


[0001]本专利技术涉及芽孢杆菌领域，更具体地说，涉及一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌及筛选分离方法。

技术介绍

[0002]芽孢杆菌，能形成芽孢的杆菌或球菌；包括芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠球菌属等；它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处；芽孢杆菌为芽孢菌属的种类，革兰氏染色阳性，是一类好气性细菌；能分泌蛋白酶等多种酶类和抗生素，其可直接利用硝酸盐和亚硝酸盐，从而起到净化水质的作用。另外还能利用分泌的多种酶类和抗生素来抑制其他细菌的生长，进而减少甚至消灭水产养殖动物的病原体，减少疾病的发生，提高养殖效益。能够改善水生动物肠道微生物区系，增强动物的消化吸收功能，促进动物对钙、磷、铁的利用，促进维生素D的吸收，增强机体抗病力，降低饵料系数现有的芽孢杆菌在降解亚硝酸盐方面的能力较差，为了能够提高芽孢杆菌降解亚硝酸盐的能力，我们提出一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌及筛选分离方法。

技术实现思路

[0003]1．要解决的技术问题本专利技术的目的在于提供一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌及筛选分离方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0004]2.技术方案一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌，包括按照重量份数配制的以下组分：固态培养基30～50份、芽孢杆菌液10～15份、枯草芽孢杆菌液15～20份、好氧反硝化菌液10～15份、蜡状芽孢杆菌液10～15份、解淀粉芽孢杆15～20份。/>[0005]进一步的，所述固态培养基的制备方法包括以下步骤：1）原料：牛肉膏粉3～6份，胰酪蛋白胨10～20份，氯化钠4～8份，琼脂15～30份，纯净水700～1500mL；2）制法：将纯净水700～1500mL加热至40～50℃，然后将牛肉膏粉3～6份，胰酪蛋白胨10～20份和氯化钠4～8份加入至纯净水700～1500mL中，并进行充分搅拌，使得原料溶解于纯净水中制成混合液；3）将混合液冷却至20～30℃，将琼脂15～30份添加至混合液中，并进行加热搅拌，直至琼脂15～30份与混合液充分混合后，静置冷却，形成固态培养基。
[0006]一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌的制备方法包括以下步骤：1）将芽孢杆菌液10～15份、枯草芽孢杆菌液15～20份、好氧反硝化菌液10～15份，蜡状芽孢杆菌液10～15份以及解淀粉芽孢杆15～20份混合，得到菌种混合液；2）将固态培养基30～50份与菌种混合液40～60份均匀混合，然后放置在发酵瓶
中，并以30～35℃发酵7～9天，得到发酵菌液；3）将辅料5～8份与发酵菌液40～60份均匀混合，并以35～45℃烘干，得到具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌。
[0007]进一步的，所述辅料由米糠10～15份、糖20～25份、石膏1～8份、熟石灰8～10份和饼肥5～8份混合制成。
[0008]一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌的筛选分离方法，包括以下步骤：S1、将具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌10～30份添加至牛肉膏蛋白胨液体20～40份培养基中，并充分搅拌均匀，并混合液放置在培养箱中，以30～37℃培养24～48h；S2、吸取混合液1～3ml于8～14ml无菌水中制成菌悬液，将菌悬液滴在固体培养基上，涂布均匀，放进摇床培养箱中以30～37℃培养24～48h；S3、挑取较大单菌落于液体培养基中分离纯化。
[0009]进一步的，所述牛肉膏蛋白胨液体培养基由牛肉膏10～30份、蛋白胨20～40份、氯化钾1～8份以及蒸馏水60～80份混合制成。
[0010]进一步的，所述液体培养基由胰蛋白陈3～6份、酵母膏8～9份、琼脂8～10份、双蒸馏水30～50份和氯化钠20～30份混合制成。
[0011]3.有益效果相比于现有技术，本专利技术的优点在于：1、将芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、好氧反硝化菌，蜡状芽孢杆菌以及解淀粉芽孢杆混合，得到菌种混合液，再将固态培养基与菌种混合液均匀混合，然后放置在发酵瓶中发酵，能够提升菌种的繁殖能够力，从而提高降解亚硝酸盐的能力。
[0012]2、通过添加好氧反硝化菌，能够显著提高芽孢杆菌降解亚硝酸盐的能力，此外，好氧反硝化菌还具有高效的氨氮净化能力。
具体实施方式
[0013]下面将结合本专利技术的实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0014]实施例一：一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌，包括按照重量份数配制的以下组分：固态培养基30份、芽孢杆菌液10份、枯草芽孢杆菌液15份、好氧反硝化菌液10份、蜡状芽孢杆菌液10份、解淀粉芽孢杆15份。
[0015]固态培养基的制备方法包括以下步骤：1）原料：牛肉膏粉3份，胰酪蛋白胨10份，氯化钠4份，琼脂15份，纯净水700mL；2）制法：将纯净水700mL加热至40℃，然后将牛肉膏粉3份，胰酪蛋白胨10份和氯化钠4份加入至纯净水700mL中，并进行充分搅拌，使得原料溶解于纯净水中制成混合液；3）将混合液冷却至20℃，将琼脂15份添加至混合液中，并进行加热搅拌，直至琼脂15份与混合液充分混合后，静置冷却，形成固态培养基。
[0016]一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌，其制备方法包括以下步骤：
1）将芽孢杆菌液10份、枯草芽孢杆菌液15份、好氧反硝化菌液10份，蜡状芽孢杆菌液10份以及解淀粉芽孢杆15份混合，得到菌种混合液；2）将固态培养基30份与菌种混合液40份均匀混合，然后放置在发酵瓶中，并以30℃发酵7天，得到发酵菌液；3）将辅料5份与发酵菌液40份均匀混合，并以35℃烘干，得到具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌。
[0017]辅料由米糠10份、糖20份、石膏1份、熟石灰8份和饼肥5份混合制成。
[0018]一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌的筛选分离方法，包括以下步骤：S1、将具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌10份添加至牛肉膏蛋白胨液体20份培养基中，并充分搅拌均匀，并混合液放置在培养箱中，以30℃培养24h；S2、吸取混合液1ml于8ml无菌水中制成菌悬液，将菌悬液滴在固体培养基上，涂布均匀，放进摇床培养箱中以30～℃培养24h；S3、挑取较大单菌落于液体培养基中分离纯化。
[0019]牛肉膏蛋白胨液体培养基由牛肉膏10份、蛋白胨20份、氯化钾1份以及蒸馏水60份混合制成，液体培养基由胰蛋白陈3份、酵母膏8份、琼脂8份、双蒸馏水30份和氯化钠20份混合制成。
[0020]实施例二：一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌，包括按照重量份数配制的以下组分：固态培养基40份、芽孢杆菌液13份、枯草芽孢杆菌液18份、好氧反硝化菌液13份、蜡状芽孢杆菌液12份、解淀粉芽孢杆17份。
[0021]固态培养基的制备方法包括以下步骤：1）本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌，其特征在于，包括按照重量份数配制的以下组分：固态培养基30～50份、芽孢杆菌液10～15份、枯草芽孢杆菌液15～20份、好氧反硝化菌液10～15份、蜡状芽孢杆菌液10～15份、解淀粉芽孢杆15～20份。2.根据权利要求1所述的一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌，其特征在于：所述固态培养基的制备方法包括以下步骤：1）原料：牛肉膏粉3～6份，胰酪蛋白胨10～20份，氯化钠4～8份，琼脂15～30份，纯净水700～1500mL；2）制法：将纯净水700～1500mL加热至40～50℃，然后将牛肉膏粉3～6份，胰酪蛋白胨10～20份和氯化钠4～8份加入至纯净水700～1500mL中，并进行充分搅拌，使得原料溶解于纯净水中制成混合液；3）将混合液冷却至20～30℃，将琼脂15～30份添加至混合液中，并进行加热搅拌，直至琼脂15～30份与混合液充分混合后，静置冷却，形成固态培养基。3.根据权利要求1所述的一种具有降解亚硝酸盐能力的芽孢杆菌，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：1）将芽孢杆菌液10～15份、枯草芽孢杆菌液15～20份、好氧反硝化菌液10～15份，蜡状芽孢杆菌液10～15份以及解淀粉芽孢杆15～20份混合，得到菌种混合液；2）将固态培养基30～50份与菌种混合液40～60份均匀混合，然后放置在发酵瓶中，并以3...

【专利技术属性】
技术研发人员：易鹏飞，易清，王庆红，
申请(专利权)人：广州微立旺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：