一种荧光微球的活化方法技术

本发明专利技术涉及医学检测技术领域，特别涉及一种荧光微球的活化方法

【技术实现步骤摘要】
一种荧光微球的活化方法、定量检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其制备方法


[0001]本专利技术涉及医学检测
，特别涉及一种荧光微球的活化方法
、
定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒及其制备方法
。

技术介绍

[0002]血清淀粉样蛋白
A
（
serum amyloid A protein
，
SAA
）是一种正向急性时相反应蛋白，是载脂蛋白家族中的一种异质类蛋白质，相对分子量约为
12000。SAA
是一种急性相蛋白并与血浆高密度脂蛋白（
HDL
）结合
。
[0003]SAA
是个灵敏的参数，它在炎性反应大约
8h
后开始升高，且超过参考范围上限时间早于
C
‑
反应蛋白（
C
‑
reactive protein
，
CRP
），然而
CRP
在正常人中的中位数值与参考范围上限的差距，大约有
10
倍
。
在
SAA
中仅有5倍
。
轻微感染，例如，许多病毒感染，
SAA
升高要比
CRP
更为常见
。
在感染性疾病中，
SAA
的绝对上升要高于
CRP
，因此
SAA
测定，尤其对“正常”与微小急性相反应可提供更好的鉴别
。
通常约
2/3
感冒患者
SAA
升高，但少于
1/2
的患者相同表现
CRP
升高
。
在病毒感染病例中，
SAA
和
CRP
浓度升高见于腺病毒感染者
。SAA
和
CRP
的反应形式在急性感染的恢复阶段是平行的，这同时适用于细菌和病毒感染
。
[0004]目前现有技术中，通常采用免疫分析技术检测
SAA
，而标记分子的活化程度低，结合抗体的能力低，对
SAA
的检测灵敏度低，仅能进行静脉血
SAA
的检测，未涉及指尖血
SAA
的检测，样本类型具有局限性
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种荧光微球的活化方法
、
定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒及其制备方法，旨在解决无法检测指尖血
SAA
的技术问题
。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提出一种荧光微球的活化方法，包括以下步骤：
S10、
将荧光微球分散于缓冲液中，得荧光微球溶液；
S20、
将活化液与所述荧光微球溶液混合，得荧光微球活化液；其中，所述活化液包括碳二亚铵溶液
、N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺钠溶液及二异丙基碳二亚胺溶液
。
[0007]可选地，步骤
S20
包括：
S201、
将碳二亚铵溶液与二异丙基碳二亚胺溶液混合，得混合液一；
S202、
将
N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺钠溶液与荧光微球溶液混合，得混合液二；
S203、
将混合液一与混合液二混合，得荧光微球活化液
。
[0008]本专利技术还提出一种定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒，用于检测待测血液样本中血清淀粉样蛋白
A
的含量，所述定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒包括试纸条
、
荧光微球标记结合物垫抗体及检测垫抗体；其中，所述荧光微球标记结合物垫抗体，包被于所述试纸条，用于与血清淀粉样蛋白
A
结合以形成“结合物垫抗体
‑
血清淀粉样蛋白
A”复合体，所述
荧光微球标记结合物垫抗体中的荧光微球包括采用如上述荧光微球的活化方法获得的荧光微球；所述检测垫抗体，包被于所述试纸条，用于与“结合物垫抗体
‑
血清淀粉样蛋白
A”复合体结合，以形成“结合物垫抗体
‑
血清淀粉样蛋白
A
‑
检测垫抗体”复合体
。
[0009]本专利技术还提出一种定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒的制备方法，用于制备上述的定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒，包括以下步骤：
S100、
将检测垫抗体包被在硝酸纤维素膜上，得检测垫；
S200、
将荧光微球标记在结合物垫抗体上，得荧光微球标记的结合物垫抗体，将荧光微球标记的结合物垫抗体包被在另一硝酸纤维素膜上，得结合物垫；
S300、
将样本垫
、
结合物垫
、
检测垫及吸水垫依次抵接并贴合在背板上，得试纸条；其中，所述检测垫抗体包括第二检测抗体及第二质控抗体；所述结合物垫抗体包括第一检测抗体及第一质控抗体；所述荧光微球的活化方法包括以下步骤：
S10、
将荧光微球分散于缓冲液中，得荧光微球溶液；
S20、
将活化液与所述荧光微球溶液混合，得荧光微球活化液；所述活化液包括碳二亚铵溶液
、N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺钠溶液及二异丙基碳二亚胺溶液
。
[0010]可选地，第一检测抗体包括血清淀粉样蛋白
A
第一抗体，第二检测抗体包括血清淀粉样蛋白
A
第二抗体；第一质控抗体包括羊抗鸡
IgY
抗体，第二质控抗体包括鸡
IgY
抗体
。
[0011]可选地，步骤
S200
中制备荧光微球标记的结合物垫抗体的步骤包括：
S210、
将荧光微球分散于缓冲液中，得荧光微球溶液；
S220、
将活化液与荧光微球溶液混合，得荧光微球活化液；
S230、
将第一检测抗体及第一质控抗体分别与荧光微球活化液混合，得荧光微球偶联液；
S240、
将封闭液与荧光微球偶联液混合，得荧光微球标记的结合物垫抗体；其中，所述活化液包括碳二亚铵溶液
、N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺钠溶液及二异丙基碳二亚胺溶液
。
[0012]可选地，步骤
S220
包括：
S221、
将碳二亚铵溶液与二异丙基碳二亚胺溶液混合，得混合液一；
S222、
将
N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺钠溶液与荧光微球溶液混合，得混合液二；
S223、
将混合液一与混合液二混合，得荧本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种荧光微球的活化方法，其特征在于，包括以下步骤：
S10、
将荧光微球分散于缓冲液中，得荧光微球溶液；
S20、
将活化液与所述荧光微球溶液混合，得荧光微球活化液；其中，所述活化液包括碳二亚铵溶液
、N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺钠溶液及二异丙基碳二亚胺溶液
。2.
如权利要求1所述的荧光微球的活化方法，其特征在于，步骤
S20
包括：
S201、
将碳二亚铵溶液与二异丙基碳二亚胺溶液混合，得混合液一；
S202、
将
N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺钠溶液与荧光微球溶液混合，得混合液二；
S203、
将混合液一与混合液二混合，得荧光微球活化液
。3.
一种定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒，用于检测待测血液样本中血清淀粉样蛋白
A
的含量，其特征在于，包括：试纸条；荧光微球标记结合物垫抗体，包被于所述试纸条，用于与血清淀粉样蛋白
A
结合以形成“结合物垫抗体
‑
血清淀粉样蛋白
A”复合体；以及，检测垫抗体，包被于所述试纸条，用于与“结合物垫抗体
‑
血清淀粉样蛋白
A”复合体结合，以形成“结合物垫抗体
‑
血清淀粉样蛋白
A
‑
检测垫抗体”复合体；其中，所述荧光微球标记结合物垫抗体中的荧光微球包括采用如权利要求1至2任意一项所述的荧光微球的活化方法获得的荧光微球
。4.
一种定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒的制备方法，用于制备如权利要求3所述的定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒，其特征在于，包括以下步骤：
S100、
将检测垫抗体包被在硝酸纤维素膜上，得检测垫；
S200、
将荧光微球标记在结合物垫抗体上，得荧光微球标记的结合物垫抗体，将荧光微球标记的结合物垫抗体包被在另一硝酸纤维素膜上，得结合物垫；
S300、
将样本垫
、
结合物垫
、
检测垫及吸水垫依次抵接并贴合在背板上，得试纸条；其中，所述荧光微球包括采用如权利要求1或2所述的荧光微球的活化方法所活化的荧光微球；所述检测垫抗体包括第二检测抗体及第二质控抗体；所述结合物垫抗体包括第一检测抗体及第一质控抗体
。5.
如权利要求4所述的定量检测血清淀粉样蛋白
A
的试剂盒的制备方...

【专利技术属性】
技术研发人员：李由，林晓歌，刘莹，
申请(专利权)人：深圳市迈科龙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：