扎米莲的繁殖方法技术

扎米莲的快速繁殖方法，是一种采用植物组织培养技术对扎米莲进行大规模快速繁殖的方法，包括外植体的选取与处理、球状块茎或芽的诱导培养和试管苗的移栽等步骤。本发明专利技术方法能克服现有技术繁殖扎米莲周期长或繁殖率低的不足，而且具有取材方便、操作简便的优点。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种扎米莲的快速繁殖方法，具体地讲，是指采用组织培养方法快速繁殖扎米莲的方法。
技术介绍
扎米莲(Zamioculcas zamiifolia Engl.)为天南星科扎米莲属的极适合室内栽培观赏的阴生观叶植物，原产非洲坦桑尼亚和赞比亚，近年从国外引进，因其株型典雅美观，从其地下球茎抽出肥厚且带数对绿色小叶的叶柄，深受人们喜爱。目前园艺生产上普遍采用叶片插条扦插形成球茎或利用种子繁殖来繁殖种苗，而采用叶片插条繁殖法的繁殖周期太长(每叶片每年才形成一个球茎)，而其种子结实率很低，种子繁殖也因受季节、产量的影响及进口的限制，而无法满足快速繁殖的需要。采用组织培养技术对扎米莲进行繁殖的方法目前也已有报道(如黄青峰，汤红玲，庄明川.扎米叶的组织培养与植株再生.植物生理学通讯，2002，38(3)249)，它是通过诱导愈伤组织途径产生幼芽，再诱导幼芽生根形成试管苗，但这种方法的不同阶段必须采用不同的培养基，比较耗时耗力，愈伤组织产生变异的可能性也较大。(三)专利技术的内容本专利技术的目的在于提供一种采用植物组织培养技术对扎米莲进行大规模快速繁殖的方法，它能克服现有技术繁殖扎米莲周期长或繁殖率低的不足，而且具有取材方便、操作简便的优点。本专利技术方法具体包括如下步骤(1)外植体的选取与处理以扎米莲嫩叶为外植体，经洗净消毒后，切成适合于接种的具叶脉小段。(2)球状块茎或芽的诱导培养将处理后的外植体接入如下配方的培养基中培养105-110天，外植体经历如下三个阶段，得到具球茎的小苗外植体表面产生球形小块茎—→球状块茎的上部产生具叶鞘的小叶芽，下部长出根—→上部叶芽中长出复叶。培养基配方为改良MS培养基+2，4-D0.0～1.0mg/L+NAA0.02～1.0mg/L+6-BA2.0～4.0mg/L+4-PU0.2～1.0mg/L，pH5.8-6.0；培养条件为温度25±2℃，光照强度为1500-2500lux，每天12-14h光照。(3)试管苗的移栽将具球茎小苗移栽至蛭石、椰糠及菜园土的混合基质中，薄膜封口，保温保湿并置于散射光下，3-4天后去掉薄膜，移至遮荫大棚中生长。在步骤(1)中，外植体通常选用浅黄绿色或绿色的幼嫩叶片。清洗、灭菌和外植体切取的具体方法是先用0.1％的洗涤精溶液小心洗净，流水冲洗20-30分钟后，接着用75％酒精处理30-40秒，再用0.1％升汞消毒灭菌8-12分钟，用无菌去离子水漂洗4-5次，在无菌条件下用灭菌的医用手术刀将叶片切成1.5-2.0cm大小的具叶脉的叶片外植体。在本专利技术中，所述的MS培养基(Murashige和SKoog1962)是本领域常用的培养基，在组织培养方面的教材或著作中均可查到其配方。改良MS培养基是指其铁盐(FeSO4.7H2O)用量为55.6mg/L，EDTA-Na2(乙二胺四乙酸二钠)用量为74.6mg/L，琼脂的质量百分数为0.6～0.7％，其余均与MS培养基相同。2，4-D表示2，4-二氯苯氧乙酸，NAA是α-萘乙酸，6-BA是6-苄基氨基嘌呤，4-PU是指N-(2-氯-4-吡啶基)-N-苯基脲，它们均是本领域常用的药物，可以通过购买获得。Lux是光照强度的计量单位，即勒克斯。h表示小时。在步骤(2)中，培养基的最佳配方为(培养基中生长调节剂的浓度单位为mg/L)改良MS培养基+2，4-D0.5+6-BA3.0+NAA0.1+4-PU0.2，改良MS培养基中琼脂的质量百分数为0.65％。叶片外植体接到培养基上一周后，叶片卷曲肿胀逐渐增厚增长，四周后可见到从增厚变粗的叶片外植体表面产生浅绿色的球状小块茎，平均每个叶片外植体表面产生3-4个小块茎，随着培养时间的延长，叶片表面分化产生的小块茎也越多，体积也逐渐增大，至培养90天时，平均每个叶片外植体表面产生3-15个球形小块茎，在相同培养基上继代培养二周后，除继续从叶片表面长出幼小的球块茎外，从最先形成的浅绿色球状块茎的上部则产生具叶鞘的小叶芽，产生小叶芽的频率为4-7个/球状快茎；同时在每球状块茎下部产生出3-6条具密布白色根毛的浅绿色粗壮的根。待从球状块茎上产生的具叶鞘的叶芽中长出具一对生小卵圆叶组成的复叶，或具两对对生小叶的浅绿色的羽状复叶，进入第三步操作。在步骤(3)中，采用的混合基质为蛭石、椰糠及菜园土等体积比混合。试管苗的成活率可达到99％以上，且栽培30-35天后就可从移栽的小苗上长出健康的新叶片。与现有技术相比，本专利技术方法具有如下的优点或效果(1)具有繁殖系数高，繁殖速度快的优势，一个叶片全年至少可产生出128棵既具球状块茎又具芽和根的优质试管苗。(2)本专利技术提供的以叶片快速繁殖扎米莲的技术，由于叶片可全年获得，不受季节和气候的影响，因而，非常适合于全年批量大规模生产扎米莲的种苗。(3)与目前组织培养已有方法的报道——通过诱导愈伤组织途径产生幼芽，再诱导幼芽生根形成试管苗相比，本专利技术提供的扎米莲的快速繁殖方法不仅球状块茎的形成、球茎长芽长根的不同阶段都在同一培养基上完成，而且是直接从叶片外植体上勿经愈伤组织阶段产生球状块茎来获得扎米莲的试管苗，因而既省工又易于操作，还可有效地避免由愈伤组织产生的变异的不足。(4)由于我们所获得的扎米莲球状块茎上能自发分化产生多个幼芽及生长旺盛的幼根，因而采用这种具幼根和块茎的试管苗来大规模生产扎米莲盆苗，不仅移栽容易，成活率极高，而且以这类苗移栽的盆苗生长更快，株型更紧簇、美观。(四)具体的实施方式实施例1(1)外植体的选取与处理首先选取盆栽的扎米莲(Zamioculcaszamiifolia Engl.)的浅黄绿色或绿色的幼嫩羽状复叶的第二、第三片叶片(从羽状复叶顶端计算)，叶片先用0.1％的洗涤精溶液小心洗净后，自来水冲洗25分钟后，接着在无菌条件下，用75％酒精处理30秒，再用0.1％升汞消毒灭菌8分钟，用无菌去离子水漂洗4次(每次漂洗5分钟)，之后，在超净工作台上用灭菌的医用手术刀将叶片切成1.5-2.0cm的具叶脉的叶片外植体。(2)球状块茎或芽的诱导培养将切好的叶片外植体，接入下列培养基中培养改良MS培养基+2，4-D 0.5mg/L+6-BA 3.0mg/L+NAA0.1mg/L+4-PU 0.2mg/L，改良MS培养基中琼脂的质量百分数为0.65％，pH5.8-6.0，培养室温度25±2℃，光照强度为2000lux，每天14h光照。叶片外植体接到上述培养基上一周后，叶片卷曲肿胀并开始逐渐增厚增长，四周后所有的扎米莲叶片外植体都增厚扩大，并可观察到，从增厚变粗的叶片外植体表面或其切口边缘开始产生浅绿色的球状小块茎，平均每个叶片外植体产生3-4个小块茎。随着培养时间的延长，叶片表面分化产生的小块茎也越多，体积也逐渐增大，至培养90天时，平均每个叶片外植体表面产生15个球形小块茎，最多达18个球形块茎。之后，将球形块茎转接在相同培养基上继代培养2周后，除继续从叶片表面长出幼小的球状块茎外，从最先形成的浅绿色球状块茎的上部则开始不断产生具叶鞘的小叶芽，同时在每球状块茎下部产生出3-6条具密布白色根毛的浅绿色粗壮的根。之后从球状块茎上产生的具叶鞘的叶芽中长出具一对生小圆叶组成的复叶，或具两对对生小叶的浅绿色的羽状复叶。(3)试管苗的移栽将具根及几个完整本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种扎米莲的快速繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：（１）外植体的选取与处理：以扎米莲嫩叶为外植体，经洗净消毒后，切成适合于接种的具叶脉小段。（２）球状块茎或芽的诱导培养：将处理后的外植体接入如下配方的培养基中培养１０５－１１０天，得到具有球茎的小苗：改良ＭＳ培养基＋２，４－Ｄ ０．０～１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．０２～１．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ ２．０～４．０ｍｇ／Ｌ＋４－ＰＵ ０．２～１．０ｍｇ／Ｌ，ｐＨ５．８－６．０；培养条件为温度２５±２℃，光照强度为１５００－２５００ｌｕｘ，每天１２－１４ｈ光照。（３）试管苗的移栽：将具球茎小苗移栽至混合基质中，薄膜封口，保温保湿并置于散射光下，３－４天后去掉薄膜，移至遮荫大棚中生长。

【技术特征摘要】
1.一种扎米莲的快速繁殖方法，其特征在于包括如下步骤(1)外植体的选取与处理以扎米莲嫩叶为外植体，经洗净消毒后，切成适合于接种的具叶脉小段。(2)球状块茎或芽的诱导培养将处理后的外植体接入如下配方的培养基中培养105-110天，得到具有球茎的小苗改良MS培养基+2，4-D0.0～1.0mg/L+NAA0.02～1.0mg/L+6-BA2.0～4.0mg/L+4-PU0.2～1.0mg/L，pH5.8-6.0；培养条件为温度25±2℃，光照强度为1500-2500lux，每天12-14h光照。(3)试管苗的移栽将具球茎小苗移栽至混合基质中，薄膜封口，保温保湿并置于散射光下，3-4天后去掉薄膜，移至遮荫大棚中生长。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中，清洗、灭菌和外植体切取的具体操作是先用0.1％的洗涤精溶液洗净，流水冲洗2...

【专利技术属性】
技术研发人员：施和平，梁朋，
申请(专利权)人：华南师范大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]