柚木微繁方法技术

一种柚木微繁方法，其特征在于： １）选定外殖体供体植株，选取符合生产要求良种单株，采集枝芽作培养之用， ２）外殖体采集后带回组培工厂，先用清水洗净，无菌环境中用０．１５～０．２５％升汞消毒１５～２０分钟，再用无菌水清洗干净备用， ３）初代培养：即启动诱芽培养，将消毒并清洗干净的外殖体，即顶芽或带有腋芽的茎段接种于改良ＭＳ培养基为基本培养基，附加细胞分裂素６－ＢＡ（０．５～２ｍｇ／ｌ）的培养基上进行培养，培养室温度为２５～２８℃，自然散射光加日光灯辅助光照１２～１６小时，光强度２０００±１００Ｌｕｘ， ４）继代增殖培养：当初代培养获得的无菌芽长６～７ｃｍ时，可以进入继代增殖，将其分段切割，逐段转入新鲜的增殖培养基中培养，每３０天左右继代转接一次，继代培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ（０．１～２ｍｇ／ｌ）＋ＫＴ（０～１ｍｇ／ｌ）， ５）壮苗与炼苗：当试管苗高达１．５～５ｃｍ，从培养室移至炼苗室，进行光温炼苗，控制光照强度在５０００～１５０００Ｌｕｘ，使试管苗健壮，苗高达到８ｃｍ左右时可供移栽， ６）催根处理：炼苗２０天左右，选取壮苗进行移栽前催根处理，催根剂采用由ＩＢＡ、ＮＡＡ、ＩＡＡ等生长素组成的水剂或粉剂催根处理，浓度各为１００～１５０ｐｐｍ，水剂需先浸后移植，粉剂随粘随种， ７）试管苗移栽：催根处理过的柚木无根试管苗移栽至黄心土和沙等的混合基质中栽培，可直接移栽于装有基质的塑料袋中成为袋装苗；也可先用塑料盘装基质移栽，等盘苗生根长高后再移入塑料袋，移后加强管理，待苗高１５～４０ｃｍ时可提供大田生产定植。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术属于植物组织培养方法，特别是一种通过生物技术达到柚木良种快速繁殖和规模化生产的柚木微繁方法。
技术介绍
柚木(Tectona grandis L.)属马鞭草科柚木属，为热带高大阔叶半落叶乔木。柚木材质坚韧、结构致密、纹理美观、耐腐抗虫、加工性能优良，广泛用于建造舰船、港口、桥梁、车厢、房屋、高级地板、家具、以及镶贴板和贴面板等，是世界著名商品材，在国际上被誉为重要的热带硬木用材树种之一。柚木是异花授粉树种。由于柚木的特性随着地理种源的差异变化很大，具有丰富的遗传多样性，虽提供十分有利的可选择性，为良种选育提供遗传基础，然而，我国至今广为种植的几乎全是由种子育成的实生苗。这类有性后代，其特性分离严重，林相不整齐，可用原木产量不高。严重制约着我国柚木业的发展。虽引种百余年，终未形成产业化推广。世界上主要柚木种植国对实现柚木的良种化均十分重视，努力寻求良种克隆方法，随着生物技术学科的发展，二十世纪八十年代在国内外相继开展了柚木的组织培养研究，并已取得十分可喜的进展，但国内未形成规模化生产，国外也很少报道，未能满足柚木大规模生产的需求。
技术实现思路
本专利技术旨在运用生物工程技术，在较短时期内快速大量繁殖良种种苗，建立优良个体的自根无性系，形成成套的柚木良种微繁方法。专利技术的目的是通过以下方案实现的外殖体供体的选定——外殖体采集——外殖体消毒灭菌——初代(启动)培养——继代培养(增殖培养)——壮苗与炼苗——催根处理——试管苗移植(袋苗或盘苗——袋苗)——供大田生产定植。下面进一步祥述本专利技术1、选定外殖体供体植株，选取符合生产要求良种单株，采集枝芽作培养之用。2、外殖体采集后带回组培工厂，先用清水洗净，无菌环境中用0.15～0.25％升汞消毒15～20分钟，再用无菌水清洗干净备用。3、初代培养(启动诱芽培养)将消毒并清洗干净的外殖体(顶芽或带有腋芽的茎段)接种于改良MS培养基为基本培养基，附加细胞分裂素6-BA(0.5～2mg/l)的培养基上进行培养，培养室温度为25～28℃，自然散射光加日光灯辅助光照12～16小时，光强度2000±100Lux。4、继代增殖培养当初代培养获得的无菌芽长6～7cm时，可以进入继代增殖，将其分段切割，逐段转入新鲜的增殖培养基中培养，每30天左右继代转接一次，继代培养基为MS+6-BA(0.1～2mg/l)+KT(0～1mg/l)。5、壮苗与炼苗当试管苗高达1.5～5cm，从培养室移至炼苗室，进行光温炼苗，控制光照强度在5000～15000Lux。使试管苗健壮，苗高达到8cm左右时可供移栽。6、催根处理炼苗20天左右，选取壮苗进行移栽前催根处理，催根剂采用由IBA、NAA、IAA等生长素组成的水剂或粉剂催根处理，浓度各为100～150ppm。水剂需先浸后移植，粉剂随粘随种。7、试管苗移栽催根处理过的柚木无根试管苗移栽至黄心土和沙等的混合基质中栽培，可直接移栽于装有基质的塑料袋中成为袋装苗；也可先用塑料盘装基质移栽，等盘苗生根长高后再移入塑料袋，移后加强管理，待苗高15～40cm时可提供大田生产定植。本专利技术的优点1、月增殖率由2～3倍提高到4倍，加大了增殖力度，达到快繁要求，实现大规模推广种植的目标。2、无根试管苗在高效催根粉剂作用下，直接移栽，省工省时，大规模移苗成活率达到98％以上。本专利技术的技术达到低成本、低能耗、高工效、规模化生产的目的，具有实用价值与推广价值，有着广阔的应用前景。具体实施例方式1、从柚木林中选定速生、抗病、抗逆能力表现好的健康单株作为采集外植体母株。2、采集有休眠芽的枝条，作为外植体。3、用清水洗净外植体，在超净工作台上，用0.2％的升汞溶液消毒(浸泡)10-20分钟，要充分消毒。用无菌水清洗。4、将消毒好的枝条(顶芽或分枝)分段接入诱芽培养基(MS+6BA2ppm)，在26±2℃的培养室中，光照2000Lux左右。5、培养10天左右，萌出新芽，20-30天，枝芽长6-7cm时，进入继代培养。6、将上述枝芽切段，每段带1-2对芽，接入继代培养基(MS+6BA0.8ppm)一个月左右，再进行继续转接，直至够量，进入壮苗、炼苗阶段。7、选高达1.5-5cm的试管苗，从培养室移至炼苗室在自然光下(5000-15000Lux)炼苗，使试管苗健壮，叶色青绿，茎干挺拔。8、炼苗20天左右，用浓度各为100ppm的IBA、NAA、IAA催根粉处理，随粘随种，种在装有黄心土和沙等的混合基质的育苗袋中育苗，苗高15-40cm时可提供大田生产定植。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种柚木微繁方法，其特征在于1)选定外殖体供体植株，选取符合生产要求良种单株，采集枝芽作培养之用，2)外殖体采集后带回组培工厂，先用清水洗净，无菌环境中用0.15～0.25％升汞消毒15～20分钟，再用无菌水清洗干净备用，3)初代培养即启动诱芽培养，将消毒并清洗干净的外殖体，即顶芽或带有腋芽的茎段接种于改良MS培养基为基本培养基，附加细胞分裂素6-BA(0.5～2mg/l)的培养基上进行培养，培养室温度为25～28℃，自然散射光加日光灯辅助光照12～16小时，光强度2000±100Lux，4)继代增殖培养当初代培养获得的无菌芽长6～7cm时，可以进入继代增殖，将其分段切割，逐段转入新鲜的增殖培养基中培养，每30天左右继代转接一次，继代...

【专利技术属性】
技术研发人员：樊云芳，曾宪松，丁勤，黄莹，赖齐贤，
申请(专利权)人：海南华翠棕榈园有限公司，
类型：发明
国别省市：