猪笼草的组织培养繁殖方法技术

本发明专利技术涉及猪笼草的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。猪笼草（ＮｅｐｅｎｔｈｅｓＬ．）又称猪仔笼、食虫草、担水桶、公仔瓶、招财进宝、水罐植物等，在我国，人们给它取了一个吉祥的商业名字“袋袋平安”。它属于猪笼草科猪笼草属，本科植物仅此一属，有７０余个种，分布于东半球热带地区，在我国的广东等地虽有野生分布，但在２０世纪８０年代以前，很少应用于栽培观赏。直到改革开放以后，我国多家植物园陆续从国外引进了多姿多彩的猪笼草园艺观赏种用于观赏和各种花卉展览后，其独特的造型和奇特的生活习性才真正引起人们的重视。猪笼草的繁殖常采用分株、压条等繁殖方法，繁殖系数低，以组织培养法可以加速其繁殖速度获得大量试管苗，可满足种苗市场的需要。本发明专利技术提供多种猪笼草的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。其外植体消毒方法、培养基成分独特，而且方法简单实惠，应用价值高。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及猪笼草的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。猪笼草虽然在我国的广东等地虽有野生分布，但在20世纪80年代以前，很少应用于栽培观赏。直到改革开放以后，我国多家植物园陆续从国外引进了多姿多彩的猪笼草园艺观赏种用于观赏和各种花卉展览后，其独特的造型和奇特的生活习性才真正引起人们的重视。但我国目前的商品猪笼草多为从国外引进的成品。猪笼草美丽的叶笼特别诱人，其大小和颜色各不相同，有的象小酒杯、有的象罐子、有的象竹筒，颜色五彩缤纷，具有极高的观赏价值，常用于室内盆栽或吊盆观赏，可点缀客室、花架、阳台和窗台或悬挂小庭园树下和走廊旁，其造型十分优雅别致，趣味盎然，深受人们的喜爱。猪笼草也可药用，其性味甘凉，可清热止咳，利尿，主治急慢性肝炎，叶片可制作凉茶，能避暑消热。其市场应用前景相当巨大。猪笼草的繁殖常采用分株、压条等繁殖方法，繁殖系数低，以组织培养法可以加速其繁殖速度获得大量试管苗，为满足种苗市场的需要提供一条有效的途径。目前，国内外未对猪笼草广泛引进的观赏品种，或杂交种进行组织培养和大规模生产，也未见有专利申请的报道。2.外植体诱导材料消毒的方法在生长季节选取生长旺盛猪笼草的3～4厘米长的的顶芽或带侧芽的茎段为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在70％酒精中浸泡30秒，再用0.1％升汞溶液消毒15分钟，无菌水冲洗4～5次，切掉基部伤口褐化部分，接种到培养基1/2MS+6-苄基嘌呤0.5-2.0毫克/升+萘乙酸0.05-0.1毫克/升+0％-0.05％活性炭。培养基均含蔗糖30克/升，pH 5.5-5.8，琼脂0.7％。培养温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天。5天后再转入新的同种培养基中防止褐化，40天左右能形成不定芽。加入活性炭能减慢褐变的速度和程度，有利于出芽。3.不定芽诱导和继代增殖将诱导出的不定芽切割后再继代培养在相同的培养基增殖。一般40天为1个继代增殖周期。每1个继代增殖周期由1个芽可增殖形成2～5个芽。继代多次后，可不用活性炭。4.生根培养丛芽高约3～4厘米高时，切下接种到生根培养基1/2MS+6-苄基嘌呤0.1毫克/升+萘乙酸0.5毫克/升+0％-0.05％活性炭培养基上，根刚长出时较白，然而生出黑色的根毛。生根率可达95％以上，每个分化芽有根数4～10条。加入活性炭能防止切口褐变并增加根数。5.试管苗移栽当不定根长至1.5厘米以上时，在自然光照下炼苗10天，然后打开瓶塞，再炼苗2天，然后用镊子把试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由沙和珍珠岩各半混合成的基质中。注意浇水、遮荫、保温，成活率可达85％以上。移栽后约40天后可上盆栽培。本专利技术所提供的猪笼草组织培养繁殖方法，具有出苗快，稳定性高，苗壮，种苗品质好、抗性强、生长良好等优势。2.外植体诱导材料消毒的方法在生长季节选取生长旺盛猪笼草的3～4厘米长的的顶芽或带侧芽的茎段为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在70％酒精中浸泡30秒，再用0.1％升汞溶液消毒15分钟，无菌水冲洗4～5次，切掉基部伤口褐化部分，接种到培养基1/2MS+6-苄基嘌呤1.0毫克/升+萘乙酸0.05毫克/升+0.05％活性炭。5天后再转入新的同种培养基中防止褐化，40天左右能形成不定芽。3.不定芽诱导和继代增殖将诱导出的不定芽切割后再继代培养在相同的培养基增殖。一般40天为1个继代增殖周期。每1个继代增殖周期由1个芽可增殖形成3～4个芽。4.生根培养丛芽高约3～4厘米高时，切下接种到生根培养基1/2MS+6-苄基嘌呤0.1毫克/升+萘乙酸0.5毫克/升+0.05％活性炭培养基上，根刚长出时较白，然而生出黑色的根毛。生根率可达95％以上，每个分化芽有根数6～8条。5.试管苗移栽当不定根长至1.5厘米以上时，在自然光照下炼苗10天，然后打开瓶塞，再炼苗2天，然后用镊子把试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由沙和珍珠岩各半混合成的基质中。注意浇水、遮荫、保温，成活率可达95％以上。移栽后约40天后可上盆栽培。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪笼草组织培养繁殖方法，其特征在于该方法包括如下步骤：１）．外植体诱导材料消毒的方法：在生长季节选取生长旺盛猪笼草的３～４厘米长的的顶芽或带侧芽的茎段为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在７０％酒精中浸泡３０秒，再用０．１％升汞溶液消 毒１５分钟，无菌水冲洗４～５次，切掉基部伤口褐化部分，接种到培养基１／２ＭＳ＋６－苄基嘌呤１．０毫克／升＋萘乙酸０．０５毫克／升＋０．０５％活性炭。５天后再转入新的同种培养基中防止褐化，４０天能形成不定芽；２）。不定芽诱导和继代增殖：将 诱导出的不定芽切割后再继代培养在相同的培养基增殖。一般４０天为１个继代增殖周期，每１个继代增殖周期由１个芽可增殖形成３～４个芽；３）．生根培养：丛芽高约３～４厘米高时，切下接种到生根培养基１／２ＭＳ＋６－苄基嘌呤０．１毫克／升＋萘乙酸０ ．５毫克／升＋０．０５％活性炭培养基上，根刚长出时较白，然而生出黑色的根毛，生根率可达９５％，每个分化芽有根数６～８条。４）．试管苗移栽：当不定根长至１．５厘米以上时，在自然光照下炼苗１０天，然后打开瓶塞，再炼苗２天，然后用镊子把试管苗 从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由沙和珍珠岩各半混合成的基质中，注意浇水、遮荫、保温，成活率可达９５％以上。移栽后约４０天后可上盆栽培。...

【技术特征摘要】
1.一种猪笼草组织培养繁殖方法，其特征在于该方法包括如下步骤1).外植体诱导材料消毒的方法在生长季节选取生长旺盛猪笼草的3～4厘米长的的顶芽或带侧芽的茎段为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在70％酒精中浸泡30秒，再用0.1％升汞溶液消毒15分钟，无菌水冲洗4～5次，切掉基部伤口褐化部分，接种到培养基1/2MS+6-苄基嘌呤1.0毫克/升+萘乙酸0.05毫克/升+0.05％活性炭。5天后再转入新的同种培养基中防止褐化，40天能形成不定芽；2).不定芽诱导和继代增殖将诱导出的不定芽切割后再继代培养在相同的培养基增殖。一般40天为1个继代增殖周期，每1个继代增殖周期由1个芽可增殖形成3～4个芽；3).生根培养丛芽高约3～4厘米高时，切下接种到生根培养基1/2MS+6-苄基嘌呤0.1毫克/升+萘乙酸0.5毫克/升+0.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：段俊，曾宋君，
申请(专利权)人：中国科学院华南植物研究所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]