滨海刺芹愈伤组织类囊泡的提取方法及其在制备抗氧化或抗炎皮肤产品中的应用技术

本发明专利技术涉及一种滨海刺芹愈伤组织类囊泡的提取方法及其在制备抗氧化或抗炎皮肤产品中的应用，提供一种滨海刺芹愈伤组织类囊泡在用于制备抗氧化或抗炎皮肤产品中的应用，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡在产品中的浓度为

【技术实现步骤摘要】
滨海刺芹愈伤组织类囊泡的提取方法及其在制备抗氧化或抗炎皮肤产品中的应用


[0001]本专利技术属于护肤品或药品
，涉及一种滨海刺芹愈伤组织类囊泡的提取方法及其在制备抗氧化或抗炎皮肤产品中的应用，皮肤产品包括：氧化或抗炎皮肤产品
。

技术介绍

[0002]滨海刺芹，属伞形科刺芹属，是一种欧洲原生的海岸植物，生长于海岸沙地和卵石滩等地，长期承受土壤养分含量低
、
霜冻
、
强碱风
、
高温和日晒等极端环境，使其进化成为一种生命力极其强大的盐生植物，富含高活性类黄酮
、
多酚
、
多元醇脂肪酸等
。
在医学上，经常被用作镇痛消炎的药物，且其强大的抗氧化能力，也受到了大量化妆品的青睐
。
[0003]类囊泡是由细胞分泌释放到外部环境中，直径为
40
‑
150nm
的纳米级囊泡，具有磷脂双分子层结构，内含
mRNA、miRNA、
蛋白质等
。
能够参与细胞间通讯，调节受体细胞的基因表达
、
刺激信号通路等作用
。
随着研究的深入，也发现了植物类囊泡，通过透射电镜检测，其形态结构与动物来源外泌体类似，同样具有磷脂双分子层结构，含有
mRNA、miRNA
和蛋白质等成分
。
植物源性类囊泡不仅来源广泛，安全无毒，并且免疫原性低，同样能够促进物种间的生物信息交流
。
>[0004]目前，植物类囊泡的提取主要通过对整株植物的功效部位或者愈伤组织经过破碎后提取获得
。
但这种方法效率低，需要大量的整株植物的功效部位，并且通过破碎后获得植物类囊泡的纯度也较低
。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种滨海刺芹愈伤组织类囊泡的提取方法及其在制备抗氧化或抗炎皮肤产品中的应用
。
[0006]本专利技术采用一种使用切向流柱层析方法从滨海刺芹愈伤组织培养液中提取滨海刺芹愈伤组织类囊泡，并对类囊泡进行了抗氧化和抗炎功效评价，探索其在护肤品中应用的可能性
。
[0007]本专利技术的专利技术人发现愈伤组织培养液中含有大量愈伤组织分泌的类囊泡，相比处理整株植物或愈伤组织，获得的类囊泡纯度更高，且不含有机溶剂，对皮肤刺激小
。
通过验证发现滨海刺芹愈伤组织类囊泡与其愈伤组织或提取物相比，具有更好的抗氧化或美白功效
。
[0008]解决方案
[0009]为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：第一方面，本专利技术提供一种滨海刺芹愈伤组织类囊泡在制备抗氧化或抗炎皮肤产品中的应用，可选地，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡来源于滨海刺芹愈伤组织培养液
。
[0010]进一步地，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡在产品中的浓度为
108~10
12
Particles/mL
，可选地为
109~10
12
Particles/mL
，可选地为
10
10
~10
12
Particles/mL
，可选地为
10
11
~
10
12
Particles/mL。
[0011]进一步地，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡能抑制
COX
‑2表达和
/
或抑制
ROS
生成，可选地，抗氧化或抗炎皮肤产品为抑制
COX
‑2表达和
/
或抑制
ROS
生成的产品
。
[0012]进一步地，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡采用如下方法制备：1）将滨海刺芹愈伤组织进行光照培养，收集培养液；2）从步骤1）的培养液中分离获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液，浓缩，纯化，获得滨海刺芹愈伤组织类囊泡
。
[0013]第二方面，提供一种滨海刺芹愈伤组织类囊泡的提取方法，包括如下步骤：1）将滨海刺芹愈伤组织进行光照培养，收集培养液；2）从步骤1）的培养液中分离获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液，浓缩，纯化，获得滨海刺芹愈伤组织类囊泡
。
[0014]上述第一方面或第二方面中，步骤2）中，获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液的方式包括离心
、
取离心上清液过滤获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液
。
[0015]上述第一方面或第二方面中，步骤2）中，中空纤维的截留分子量
≥100KD
，可选地为
100KD~800KD
，可选地为
100KD~750KD
，可选地为
100KD~300KD。
[0016]上述第一方面或第二方面中，步骤2）中，过滤方法采用
0.2
μ
m
至1μ
m
间不同孔径（可选地孔径为
0.6
μ
m~1
μ
m
，可选地孔径为
0.8
μ
m~1
μ
m
，优选孔径为1μ
m
）的深层过滤器
。
[0017]上述第一方面或第二方面中，步骤2）中，浓缩倍数为
50~200
倍或
80~150
倍或
100~150
倍
。
[0018]上述第一方面或第二方面中，所述滨海刺芹愈伤组织通过将滨海刺芹植株的部分组织诱导获得
。
[0019]上述第一方面或第二方面中，滨海刺芹植株的部分组织包括植株的顶端和腋生组织中的一种或两种
。
[0020]上述第一方面或第二方面中，所述滨海刺芹愈伤组织经诱导获得，诱导培养基包括：固体
MS
培养基，还添加有
0.5
‑
2mg/L3,6
‑
二氯
‑2‑
甲氧基苯甲酸和
0.5
‑
2mg/L
噻苯隆
。
具体地：可选地，叶腋分支的方法获得外植体茎芽，通过培养获得外植体，外植体培养基以
MS
培养基为基础，还含有琼脂
7.6g/L
，6‑
苄基腺嘌呤（
BAP
）
2.0mg/L
，
II
吲哚乙酸（
IAA
）
1mg/L
和赤霉素（
GA3）
2mg/L。
[0021]可选地，培养条件为：
55
±2μ
mol/m2s
光子照度，
16
±
2h
光照
/8
±
2h
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种滨海刺芹愈伤组织类囊泡在制备抗氧化或抗炎皮肤产品中的应用
。2.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡在产品中的浓度为
108~10
12
Particles/mL
或
10
10
~10
12
Particles/mL
；和
/
或，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡来源于滨海刺芹愈伤组织培养液；和
/
或，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡能抑制
COX
‑2表达和
/
或抑制
ROS
生成
。3.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述滨海刺芹愈伤组织类囊泡采用如下方法制备：1）将滨海刺芹愈伤组织进行光照培养，收集培养液；2）从步骤1）的培养液中分离获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液，浓缩，纯化，获得滨海刺芹愈伤组织类囊泡
。4.
根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2）中，获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液的方式包括离心
、
取离心上清液过滤获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液
。5.
根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤2）中，中空纤维的截留分子量
≥100KD
或
100KD~750KD
或
100KD~300KD
；和
/
或，步骤2）中，过滤方法采用
0.2
μ
m
至1μ
m
间不同孔径的深层过滤器；和
/
或，步骤2）中，浓缩倍数为
50~200
倍或
80~150
倍或
100~150
倍
。6.
一种滨海刺芹愈伤组织类囊泡的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：1）将滨海刺芹愈伤组织进行光照培养，收集培养液；2）从步骤1）的培养液中分离获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液，浓缩，纯化，获得滨海刺芹愈伤组织类囊泡
。7.
根据权利要求6所述的提取方法，其特征在于，步骤2）中，获得含有滨海刺芹愈伤组织类囊泡的上清液的方式包括离心
、
取离心上清液过滤获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈晨，张旭辉，高琦，朱加悦，
申请(专利权)人：北京尧景基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：