凝集素-大分子载体偶联复合物用于分离糖基化外泌体的应用制造技术

本发明专利技术是申请号为202010060063.1的分案申请，本发明专利技术涉及一种凝集素

【技术实现步骤摘要】
凝集素
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大分子载体偶联复合物用于分离糖基化外泌体的应用
[0001]本专利技术是申请日为2020年01月19日，申请号为202010060063.1，专利技术创造名称为“一种用于分离临床样本中的糖基化外泌体的凝集素
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大分子载体偶联复合物”的中国申请的分案申请。


[0002]本专利技术属于生物医药及生物分离相关的
，涉及一种用于分离临床样本中的糖基化外泌体的凝集素
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大分子载体偶联复合物。

技术介绍

[0003]外泌体是细胞多泡内体与质膜融合时释放产生的具有生物活性的微小囊泡，其直径约为30～150nm，是细胞间通讯的重要介质之一；在人健康的生理情况下，外泌体可以在细胞之间运送DNA、蛋白质、mRNA、miRNA等多种生物活性物质，参与细胞通讯、细胞迁移、肿瘤细胞增长等多种过程，完成细胞间物质及信息的传递。文献研究发现，几乎所有类型的细胞均会分泌外泌体，并且在血液、唾液、尿液、脑脊液、积液和乳汁等体液中都能够提取到外泌体。
[0004]外泌体与肿瘤、慢性感染性疾病、自本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种凝集素
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大分子载体偶联复合物在分离临床样本中的糖基化外泌体中的应用，其特征在于，包括：大分子载体；和偶联在大分子载体外侧的凝集素；其中：所述凝集素包括：木菠萝凝集素、花生凝集素、豌豆凝集素(VVA和/或VVL)、刀豆凝集素、小扁豆凝集素、麦胚素、大豆凝集素、芸豆凝集素、蜗牛凝集素(HAA和/或HPA)中的任意一种或者两种及以上；所述大分子载体包括葡聚糖微球、琼脂糖微球、树脂或环氧树脂微球、聚苯乙烯微球中的任意一种或者两种及以上。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述大分子载体粒径分布范围为1μm
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200μm，优选为10μm
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200μm，更进一步优选为30μm
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150μm。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述凝集素
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大分子载体偶联复合物中，每1ml大分子载体上偶联有1
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20mg，优选为5
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15mg，进一步优选为10
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15mg凝集素。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述临床样本包括：血清、血浆、唾液、组织或细胞培养上清液、尿液、脑脊液、淋巴液中的任意一种。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述凝集素包括：木菠萝凝集素、花生凝集素、豌豆凝集素(VVA和/或VVL)、刀豆凝集素、小扁豆凝集素、麦胚素、大豆凝集素、芸豆凝集素中的任意一种或者两种及以上。6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述糖基化外泌体包括：N
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糖基化外泌体、O
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糖基化外泌体、岩藻糖基化外泌体的任意一种或两种及以上。7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述凝集素
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大分子载体偶联复合物保存液分装于包括亲和吸附离心管的分离装置中；所述亲和吸附离心管包括：上部离心管和外部保护套管两部分；所述上部离心管的直径小于外部保护套管的直径，所述上部离心管套设于外部保护套管内且在其上部外侧存在凸起的环形边缘或支柱用于支撑上部离心管的开口处高于外部保护套管；所述上部离心管包括离心管盖、离心管壁和与离心管壁固定连接的过滤膜底部，过滤膜底部所使用的过滤膜的孔径小于凝集素
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大分子载体偶联复合物的粒径，同时大于外泌体的粒径，所述凝集素
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大分子载体偶联复合物保存液保存于上部离心管中；可选地过滤膜孔径为150nm
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1000nm。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述分离临床样本中的糖基化外泌体采用包括下述步骤的方法进行：临床样本前处理：取前处理后的样本，可选地与清洗液混合均匀进行稀释，作为待检测样本；装载有凝集素
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大分子载体偶联复合物的亲和吸附离心管完全去除凝集素
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大分子载体偶联复合物保存液中的保存液部分，保留凝集素
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大分子载体偶联复合物，并更换新的外部套管；取待检测样本加入到除去保存液后的上部离心管中，室温静置孵育，去除样本；取清洗液加入上部离心管中，将亲和吸附离心管离心后将上部离心管取出，装入新的外部套管中，将原外部套管及其中液体全部弃去，用于清洗去除分离过程中非特异性结合的未发生糖基化的外泌体及其他杂质；本步骤进行1
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3次；取洗脱液，加入上部离心管，洗脱清洗后的凝集素
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大分子载体偶联复合物，室温静置，收集外部套管中的洗脱上清液，即为分...

【专利技术属性】
技术研发人员：林长青，陈天圣，郝昆，黄鹤，高琦，李艳召，许智慧，郄霜，赵广珍，
申请(专利权)人：北京尧景基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：