【技术实现步骤摘要】
凝集素
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磁性载体偶联复合物用于分离糖基化外泌体的应用
[0001]本专利技术是申请日为2020年01月19日,申请号为202010060055.7,专利技术创造名称为“一种用于分离临床样本中的糖基化外泌体的凝集素
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磁性载体偶联复合物”的中国申请的分案申请。
[0002]本专利技术属于生物医药及生物分离相关的
,涉及一种用于分离临床样本中的糖基化外泌体的凝集素
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磁性载体偶联复合物、及分离方法。
技术介绍
[0003]外泌体是细胞多泡内体与质膜融合时释放产生的具有生物活性的微小囊泡,其直径约为30~150nm,是细胞间通讯的重要介质之一;在人健康的生理情况下,外泌体可以在细胞之间运送DNA、蛋白质、mRNA、miRNA等多种生物活性物质,参与细胞通讯、细胞迁移、肿瘤细胞增长等多种过程,完成细胞间物质及信息的传递。文献研究发现,几乎所有类型的细胞均会分泌外泌体,并且在血液、唾液、尿液、脑脊液、积液和乳汁等体液中都能够提取到外泌体。
[0004]外泌体 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种凝集素
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磁性载体偶联复合物在分离临床样本中的糖基化外泌体中的应用,其特征在于:包括:磁性载体;和偶联在磁性载体外侧的凝集素;其中:所述凝集素包括:木菠萝凝集素、花生凝集素、豌豆凝集素(VVA和/或VVL)、刀豆凝集素、小扁豆凝集素、麦胚素、大豆凝集素、芸豆凝集素、蜗牛凝集素(HAA和/或HPA)中的任意一种或者两种及以上;所述磁性载体包括:葡聚糖磁珠、琼脂糖磁珠、树脂或环氧树脂磁珠、聚苯乙烯磁珠中的任意一种或者两种及以上。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述磁性载体粒径分布范围为1μm
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200μm,优选为10μm
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200μm,更进一步优选为30μm
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150μm。3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述凝集素
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磁性载体偶联复合物中,每1ml磁性载体上偶联有1
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20mg,优选为5
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15mg,进一步优选为10
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15mg凝集素。4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述临床样本包括:血清、血浆、唾液、组织或细胞培养上清液、尿液、脑脊液、淋巴液中的任意一种。5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述凝集素包括:木菠萝凝集素、花生凝集素、豌豆凝集素(VVA和/或VVL)、刀豆凝集素、小扁豆凝集素、麦胚素、大豆凝集素、芸豆凝集素中的任意一种或者两种及以上。6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述糖基化外泌体包括:N
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糖基化外泌体、O
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糖基化外泌体、岩藻糖基化外泌体中的任意一种或两种及以上。7.一种糖基化外泌体分离组合物在分离临床样本中的糖基化外泌体中的应用,其特征在于,所述糖基化外泌体分离组合物包括:权利要求1
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6之一所述的应用中的凝集素
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磁性载体偶联复合物,还包括:用于清洗去除分离过程中非特异性结合的、未发生糖基化的外泌体及其他杂质的清洗液,和用于洗脱特异性结合在凝集素
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磁性载体偶联复合物上的糖基化外泌体的洗脱液,所述洗脱液使洗脱后的外泌体外观形态完整,无破损或裂解。8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述清洗液为无金属盐离子的清洗缓冲液或纯化水,可选地为无金属盐离子的清洗缓冲液;和/或,所述洗脱液为溶有...
【专利技术属性】
技术研发人员:林长青,陈天圣,郝昆,黄鹤,高琦,李艳召,许智慧,郄霜,赵广珍,
申请(专利权)人:北京尧景基因技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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