一种基于表观遗传调控的制造技术

本发明专利技术属于药物制剂制备技术领域，具体涉及一种基于表观遗传调控的

【技术实现步骤摘要】
一种基于表观遗传调控的pH响应型脂质体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于药物制剂制备
，具体涉及一种基于表观遗传调控的
pH
响应型脂质体及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术
。
[0003]免疫疗法是继手术
、
放射疗法
、
化学疗法以及靶向药物治疗后近年来最热门的肿瘤治疗方式，开启了肿瘤治疗的新时代
。
然而，大多数患者并不能从中获益，免疫治疗的总体有效率仅为
10
％～
30
％，主要原因肿瘤发生了免疫逃逸
。2023
年
Science Translational Medicine
杂志一篇报道提出表观遗传失调是肿瘤发生免疫逃逸的重要原因
。
此外，英国爱丁堡大学
Steven M.Pollard
研究团队在
Cell
杂志上揭示了肿瘤通过表观遗传调控重塑肿瘤免疫微环境，破坏免疫原性和免疫识别机制，在最具侵略性的间充质多形性胶质母细胞瘤亚型中驱动获得免疫逃逸程序
。
基于此，开发基于调控表观遗传的疗法以抑制肿瘤免疫逃逸，对提高肿瘤免疫治疗具有重要意义，有望为肿瘤免疫治疗提供新思路
。
[0004]表观遗传是一种基因序列不发生变化，但基因表达水平
、
修饰等表观遗传是一种基因序列不发生变化，但基因表达水平
、
修饰等却可以产生可遗传改变的现象，它对基因调控主要包括3个方面，分别是
DNA
甲基化修饰
、
组蛋白修饰和非编码
RNA
调控
。DNA
甲基化是目前研究得最多的表观遗传学机制，它是一种常见的
DNA
修饰，指在
DNA
甲基转移酶
(DNA methyltransferase,DNMT)
催化作用下，以
S
‑
腺苷甲硫氨酸
(S
‑
adenosyl methionine,SAM)
作为甲基供体，通过共价键结合的方式获得一个甲基基团的化学修饰过程
。
异常的
DNA
高度甲基化会抑制基因的表达，肿瘤细胞正是利用这一点，使肿瘤抗原启动子高度甲基化，抑制肿瘤抗原表达，规避了抗原提呈细胞对肿瘤细胞表面抗原的摄取处理与递呈，逃避了免疫效应细胞的识别与杀伤
。
除利用高度
DNA
甲基化的表观遗传调控机制以抑制肿瘤抗原表达外，肿瘤细胞还可调控组蛋白乙酰化机制直接控制
PD
‑
L1。
其中
BET
蛋白家族成员溴结构域蛋白
4(bromodomain
‑
containing protein 4
，
BRD4)
重点参与了
PD
‑
L1
的表达，其可以与编码
PD
‑
L1
的
CD274
启动子和增强子区的乙酰化组蛋白
H3K27Ac
结合促进
PD
‑
L1
的表达，从而帮助肿瘤细胞逃避免疫监视和杀伤
。
然而，现有技术中鲜有将表观遗传学干预与免疫治疗相结合的治疗方法用于癌症治疗
。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足，专利技术人经长期的技术与实践探索，提供一种基于表观遗传调控的
pH
响应型脂质体及其制备方法和应用
。
本专利技术通过试验研究基于静电吸附作用压缩佐剂胞嘧啶
‑
磷酸
‑
鸟嘌呤
(cytosine
‑
phosphate
‑
guanine,CpG)
得到共载的阳离子脂质体
(G
‑
J/ZL)
，以促进抗原递呈细胞成熟
。
为降低阳离子脂质体的毒性，将
pH
敏感材料外壳材料羧甲基壳聚糖
‑
聚乙二醇
‑
天冬酰胺
‑
甘氨酸
‑
精氨酸
(CMCS
‑
PEG
‑
NGR
，
CPN)
与上述荷正电阳离子脂质体
G
‑
J/ZL
通过静电吸附组装得到适用于“双向调控”的
pH
响应型脂质体
CG
‑
J/ZL。
基于上述研究成果，从而完成本专利技术
。
[0006]为实现上述技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0007]本专利技术提供一种基于表观遗传调控的
pH
响应型脂质体，所述
pH
响应型脂质体包含内核，所述内核是由共载泽布拉林和
JQ
‑1的阳离子脂质体构成；和，
[0008]在所述内核上，包覆有外壳，所述外壳是由羧甲基壳聚糖
‑
聚乙二醇
‑
天冬酰胺
‑
甘氨酸
‑
精氨酸
(CMCS
‑
PEG
‑
NGR
，
CPN)
材料构成
。
[0009]在一个具体实施例中，所述阳离子脂质体还含有胞嘧啶
‑
磷酸
‑
鸟嘌呤
(cytosine
‑
phosphate
‑
guanine,CpG)
，所述胞嘧啶
‑
磷酸
‑
鸟嘌呤作为一种免疫佐剂，可诱发机体产生多种免疫学效应，提高系统免疫和黏膜免疫水平，从而增强上述脂质体的免疫治疗效果
。
[0010]泽布拉林是一种
DNA
甲基转移酶抑制剂，其不仅可以上调肿瘤相关抗原的表达，还可以通过癌睾丸抗原诱导肿瘤细胞上主要组织相容性复合体
(Major hi stocompatibility complex,MHC)I
类分子的增强，最终增加免疫系统对肿瘤细胞的识别
。
而
JQ1
是一种小分子抑制剂，可通过抑制
BRD4
表达下调免疫检查点
PD
‑
L1。
本专利技术通过将上述两种药物复配作为脂质体的药物活性成分使用，从而将表观遗传学干预与免疫治疗相结合，产生协同作用，从而有效增强癌症
(
如乳腺癌...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于表观遗传调控的
pH
响应型脂质体，其特征在于，所述
pH
响应型脂质体包含内核，所述内核是由共载泽布拉林和
JQ
‑1的阳离子脂质体构成；和，在所述内核上，包覆有外壳，所述外壳是由羧甲基壳聚糖
‑
聚乙二醇
‑
天冬酰胺
‑
甘氨酸
‑
精氨酸材料构成；所述阳离子脂质体还含有胞嘧啶
‑
磷酸
‑
鸟嘌呤
CpG
；所述泽布拉林和
JQ
‑1的质量比为1～
3:1。2.
根据权利要求1所述的
pH
响应型脂质体，其特征在于，所述
pH
响应型脂质体的平均粒径为
190.3
±
4.3nm
，平均电位为
‑
13.5
±
0.608mV。3.
权利要求1‑2任一项基于表观遗传调控的
pH
响应型脂质体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
S1、
阳离子脂质体制备：取大豆卵磷脂
、DOTAP
和胆固醇，并取
JQ
‑1溶于有机溶剂中，蒸发形成薄膜，除去残留有机溶剂；之后将泽布拉林溶液加入其中进行水化，之后将
CpG
溶液加入制备的阳离子脂质体中经处理后即得；
S2、
向步骤
S1
制得的阳离子脂质体中加入羧甲基壳聚糖
‑
聚乙二醇
‑
天冬酰胺
‑
甘氨酸
‑
精氨酸溶液，进行孵育，过滤后即得
。4.
如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤
S1
中，所述大豆卵磷脂
、DOTAP
和胆固醇的质量比为
10
‑
20:1
‑
2:3
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张娜，梁爽，刘美辰，刘永军，牟伟伟，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：