基于水凝胶的细胞包裹方法技术

本发明专利技术提供基于水凝胶的细胞包裹方法

【技术实现步骤摘要】
基于水凝胶的细胞包裹方法、细胞或包裹有细胞的水凝胶颗粒及其体系、其用途及试剂盒


[0001]本专利技术涉及一种基于水凝胶的细胞包裹方法
、
细胞或包裹有细胞的水凝胶颗粒
、
其用途及试剂盒，属于细胞界面工程

。

技术介绍

[0002]近年来，以液滴微流控为代表的微流控技术因其具有小型化
、
低成本
、
高灵敏度
、
高特异性
、
高通量等优点，被广泛地用于细胞分析研究，成为细胞
/
单细胞操控与分析的有力工具
。
在液滴微流控装置中，通过将细胞
/
单细胞包裹在皮升至纳升级大小的液滴中，可获取细胞基因组学
、
转录组学
、
蛋白质组学或代谢组学水平的信息
。
[0003]水凝胶材料因其特有的溶液
‑
凝胶转化性能可以被引入到液滴微流控装置中用于细胞包裹
。
水凝胶材料可作为聚合前体包含在乳液水相中，在利用液滴本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于水凝胶的细胞包裹方法，其包括：
(a)
制备作为水相的细胞悬浮液，其含有细胞
、
海藻酸盐和培养基；
(b)
利用所述细胞悬浮液与油相通过液滴微流控装置制备乳液，以使所述乳液的至少部分液滴中包裹有细胞；
(c)
孵育所述乳液，然后使包裹有细胞的液滴中的海藻酸盐在交联剂的存在下交联，形成包裹有细胞的水凝胶颗粒；和
(d)
任选地，破乳，分离并收集包裹有细胞的水凝胶颗粒
。2.
根据权利要求1所述的细胞包裹方法，其中，在步骤
(a)
中，所述细胞悬浮液中还含有水溶性二价金属盐，优选氯化钙
、
溴化钙
、
碘化钙
、
硝酸钙
、
氯酸钙
、
高氯酸钙
、
碳酸氢钙
、
磷酸二氢钙
、
醋酸钙
、
葡萄糖酸钙
、
磷酸氢钙
、
乳酸钙
、
硝酸钙
、
氯化钡
、
硫酸钡
、
硝酸钡
、
碳酸钡和氰化钡中的一种或更多种；任选地，所述水溶性二价金属盐在所述细胞悬浮液中的浓度为2‑
8mM
，优选为
3.5
‑
7mM
或6‑
7mM。3.
根据权利要求1所述的细胞包裹方法，其中，所述步骤
(c)
包括：使所述乳液进行第一次孵育
0.5
‑
24
小时，优选
1.5
‑3小时；并在交联剂的存在下使所述乳液进行第二次孵育
10
‑
60
分钟，优选
15
‑
35
分钟，以使包裹有细胞的液滴中的海藻酸盐交联
。4.
根据权利要求3所述的细胞包裹方法，其中，所述交联剂在第一次孵育之前添加至所述乳液中，或者在第一次孵育之后且在第二次孵育之前添加至所述乳液中；和
/
或，其中将所述交联剂添加至所述乳液的油相中或者添加至乳液的水相中
。5.
根据权利要求3所述的细胞包裹方法，其中，在步骤
(c)
中，所述第一次孵育完成时，包裹有细胞的液滴的
pH
小于或等于
6.5
，优选
pH
为6‑
6.5。6.
根据权利要求1所述的细胞包裹方法，其中所述交联剂为二价金属离子硫酸盐；任选地，所述二价金属离子硫酸盐为硫酸钙
、
硫酸钡或其组合；任选地，所述二价金属离子硫酸盐可以为粉末
、
晶体或任意纳米结构
(
纳米管，纳米颗粒等
)
的形式
。7.
根据权利要求1‑6中任一项所述的细胞包裹方法，其中，在步骤
(d)
中得到的所述包裹细胞的水凝胶颗粒中的每一个包含单个细胞
、
两个细胞或大于两个细胞；任选地，步骤
(d)
包括先分离并收集包裹有单个
、
两个或更多个细胞的水凝胶颗粒，然后再收集并分离包裹有单个细胞的水凝胶颗粒；任选地，先分离并收集包裹有第一类型细胞的水凝胶颗粒，然后再收集并分离包裹有第二类型细胞的水凝胶颗粒
。8.
根据权利要求1‑6中任一项所述的细胞包裹方法，其中，所述细胞包括任何类型的细胞，优选人类细胞或哺乳动物细胞，比如癌细胞
、
体细胞
、<...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨梦甦，周小钰，王源，侯旭华，
申请(专利权)人：香港城市大学，
类型：发明
国别省市：