一种下调表达制造技术

本发明专利技术提供了一种下调表达

【技术实现步骤摘要】
一种下调表达GmSST1基因的DNA序列、载体、菌株及其在培育耐盐植物中的应用


[0001]本专利技术属于分子生物学
，尤其涉及一种下调表达
GmSST1
基因的
DNA
序列
、
载体
、
菌株及其在培育耐盐植物中的应用
。

技术介绍

[0002]大豆是重要的粮油经济作物，也是植物蛋白质的主要来源
。
然而，当前中国大豆的产量仅占世界总产量较小部分，远远不能满足国内消费者对大豆的需求
。
中国大约有盐渍化土壤
3.69
×
107hm2(Foyer C H,Noctor G.Oxygen processing in photosynthesis:regulation and signalling.New Phytol,2000,146(3):367
‑
421.)。
随着耕地面积逐渐减少，提高作物耐盐性显得非常重要
。
就大豆而言，栽培大豆是属于中度耐盐的植物，盐胁迫条件下，大豆的结瘤
、
生长
、
农艺性状
、
种子质量和数量都受到明显影响
。
如果能够培育耐盐碱的大豆品种，将这一部分耕地加以利用，则能够很大程度增加我国的大豆产量，缓解我国对进口大豆的依赖
。
[0003]在分子水平解析调控大豆耐盐的机制为在生产上更合理高效地利用盐渍化土壤奠定了重要基础
。
尽管此前在大豆中报道了
GmCHX1、GmCDF1、GsERD15B
等基因参与调控大豆的耐盐能力
(Qi,X.,et al.,Identification ofa novel salt tolerance gene in wild soybean by whole
‑
genome sequencing.Nat Commun,2014.5:p.4340.
；
Zhang,W.,et al.,A cation diffusion facilitator,GmCDF1,negatively regulates salt tolerance in soybean.PLoS Genet,2019.15(1):p.e1007798.
；
Jin,T.,et al.,Natural variation in the promoter of GsERD15B affects salt tolerance in soybean.Plant Biotechnol J,2021.19(6):p.1155
‑
1169.)
，但仍然需要大力挖掘与大豆耐盐有关的更多的元件或功能基因，从而可为在生产上更为充分地利用盐渍化土壤提供数据支持
。
[0004]了解植物对盐胁迫的生理
、
代谢和生物化学反应，挖掘自然界中与耐盐相关的遗传资源，对培育耐盐作物极为重要
。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种下调表达或沉默
GmSST1
基因的
DNA
序列
、
载体
、
菌株及其在培育耐盐植物中的应用
。
[0006]本专利技术提供了
GmSST1
基因在培育耐盐植物中的应用，在植物中下调表达或沉默
GmSST1
基因
。
[0007]本专利技术提供了
GmSST1
基因在提高植物鲜重和株高中的应用，在植物中下调表达或沉默
GmSST1
基因
。
[0008]优选的，所述
GmSST1
基因的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：1所示
。
[0009]本专利技术提供了一种下调表达或沉默
GmSST1
基因的
DNA
片段，所述
DNA
片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：2或
SEQ ID NO
：3所示
。
[0010]本专利技术提供了一种下调表达或沉默
GmSST1
基因的重组载体，所述重组载体包括初始载体和所述的下调表达
GmSST1
基因的
DNA
片段
。
[0011]优选的，所述初始载体包括
pEGAD
表达载体，所述下调
GmSST1
基因表达的
DNA
片段连接至所述初始载体的
Sma I
和
BamH I
酶切位点之间
。
[0012]本专利技术提供了一种下调表达或沉默
GmSST1
基因的重组菌株，所述重组菌株在原始菌株中转化有所述的重组载体
。
[0013]优选的，所述原始菌株为植物农杆菌
。
[0014]本专利技术提供了一种培育耐盐植物的方法，包括以下步骤：
[0015]1)
用所述的重组菌株侵染植物子叶获得外植体；
[0016]2)
将所述外植体转至培养基中培养2～
4d
后，转接至新的培养基中诱导毛状根；
[0017]3)
待所述毛状根长达到7～
8cm
，真叶长出，将毛状根复合苗移栽至基质中培养获得耐盐植物
。
[0018]优选的，步骤
1)
中所述侵染的时间为
20
～
50min
；所述重组菌株菌液的
OD
600
为
0.5
～
0.8。
[0019]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术首次发现了
GmSST1
基因与植物耐盐性能的关系，提供了
GmSST1
基因在培育耐盐植物中的应用，下调表达或沉默
GmSST1
基因能够显著提升植物的耐盐能力
。
[0020]本专利技术针对
GmSST1
基因设计获得了能够下调表达或沉默
GmSST1
基因的
DNA
片段；所述
DNA
片段能够显著下调
GmSST1
基因的表达或沉默
GmSST1
基因
。
[0021]本专利技术构建了下调表达或沉默
GmSST1
基因的重组载体以及重组菌株，用所述重组菌株侵染植物，能够实现在植物体内下调表达或沉默
GmSST1
基因，提高植物的耐盐能力，提高植物的株高和鲜叶重量；对提高植物产量有重大意义
。
附图说明
[0022]图1为下调表达或沉默...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.GmSST1
基因在培育耐盐植物中的应用，其特征在于，在植物中下调表达或沉默
GmSST1
基因
。2.GmSST1
基因在提高植物株高和鲜重中的应用，其特征在于，在植物中下调表达或沉默
GmSST1
基因
。3.
根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述
GmSST1
基因的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：1所示
。4.
一种下调表达或沉默
GmSST1
基因的
DNA
片段，其特征在于，所述
DNA
片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：2或
SEQ ID NO
：3所示
。5.
一种下调表达或沉默
GmSST1
基因的重组载体，其特征在于，所述重组载体包括初始载体和权利要求4所述的下调表达或沉默
GmSST1
基因的
DNA
片段
。6.
根据权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述初始载体包括
pEGAD
表达载体，所述下调表达或沉默
GmSS...

【专利技术属性】
技术研发人员：李霞，王慧，王志娟，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：