【技术实现步骤摘要】
一种儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法及其应用
[0001]本专利技术属于化学分析领域,具体涉及一种儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法及其应用,尤其涉及一种高通量的儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法及其应用
。
技术介绍
[0002]固相萃取法,是进行有机化合物测试
(
包括临床类应用
)
时一种极常用的前处理方法,检测对象包括尿儿茶酚胺
、
血儿茶酚胺
、
类固醇化合物
、
血管紧张素等
。
固相萃取法所用的
SPE
小柱或者
SPE
板虽然能得到较好的分离效果,但操作复杂,对实验员有较高的需求且不适合自动化高通量处理,而用磁性填料处理来替代
SPE
小柱或
SPE
板同时搭配
AgileBio
自动提取仪可以保证分离效果的同时减少人工操作的误差
。
然而目前适用于质谱样品的前处理仪同一批次最多只能分两个样品处理盘同时处理
32
个样品,且在最终上样时还需进行一次样品转移,操作步骤繁琐,无法满足高通量处理的需求
。
[0003]CN113917007A
公开了一种检测人尿液儿茶酚胺及其中间代谢物的试剂盒,包含如下试剂:
(1)
校准品溶液:分为六种浓度的校准品,每种浓度的校准品中均含有六种儿茶酚胺及其代谢物:肾上腺素
、
去甲肾上腺素
、 >多巴胺
、
甲氧基肾上腺素
、
甲氧基去甲肾上腺素
、3
‑
甲氧基酪胺,校准品的浓度范围为
1ng/mL
‑
3000ng/mL
;
(2)
质控品:包括质控品
QCL
,质控品
QCM
和质控品
QCH
;
(3)
内标液:包含6种儿茶酚胺及其代谢物的甲醇溶液混合液;
(4)
缓冲液
I
;
(5)
缓冲液
II
;
(6)
衍生液
。
该专利技术通过衍生反应处理样品,解决了样品中儿茶酚胺及其中间代谢物容易降解的难题,样品衍生后室温状态稳定
。
[0004]CN111175394A
公开了一种高通量液相色谱串联质谱法检测儿茶酚胺及其代谢物
(
肾上腺素
、
去甲肾上腺素
、
多巴胺
、
甲氧基肾上腺素
、
甲氧基去甲肾上腺素
、3
‑
甲氧基酪胺
)
的方法,包括:标准溶液配制
、
样本处理
、
样本检测以及计算公式
。
该方法可以同时检测儿茶酚胺及其代谢物共6种物质,具有高准确度
、
高灵敏度
、
高特异性以及所需样本体积少
、
样本前处理简单及耐受性好等优点
。
[0005]然而上述方法均存在无法实现高通量检测,因此,如何提供一种对儿茶酚胺类化合物的高通量质谱检测方法,成为了亟待解决的问题
。
技术实现思路
[0006]针对现有技术的不足,本专利技术的目的在于提供一种儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法及其应用,尤其提供一种高通量的儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法及其应用
。
本专利技术提供的前处理方法能够有效处理待测样品,实现了高通量检测,检测结果准确,灵敏度高
。
[0007]为达到此专利技术目的,本专利技术采用以下技术方案:
[0008]一方面,本专利技术提供了一种儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法,所述前处理方法包括以下步骤:
[0009]将待测样品依次与内标溶液
、pH
调节剂
、
填料混合,之后对填料进行淋洗
、
洗脱,收
集洗脱液,即完成前处理
。
[0010]所述前处理方法采用核酸提取仪进行
。
[0011]上述方法通过采用核酸提取仪代替本领域常规的前处理仪,能够大大提高单批次处理样品的数量,实现了高通量检测,同时检测结果准确,灵敏度高
。
[0012]优选地,所述待测样品包括多巴胺
、
肾上腺素
、
去甲肾上腺素
、
甲氧基肾上腺素
、
甲氧基去甲肾上腺素或3‑
甲氧酪胺中任意一种或至少两种的组合,优选多巴胺
、
肾上腺素
、
去甲肾上腺素
、
甲氧基肾上腺素
、
甲氧基去甲肾上腺素和3‑
甲氧酪胺的组合
。
[0013]优选地,所述填料包括磁性
WCX、
磁性
MAX、
磁性
HLB
或磁性
PCX
中任意一种或至少两种的组合
。
[0014]优选地,所述填料为磁性
WCX
和磁性
MAX。
[0015]上述特定填料组合能够有效提高检测的准确度,并且能够有效实现对多巴胺
、
肾上腺素
、
去甲肾上腺素
、
甲氧基肾上腺素
、
甲氧基去甲肾上腺素和3‑
甲氧酪胺六种样品的同时检测
。
[0016]优选地,所述待测样品与
pH
调节剂混合后样品的
pH
为
6.5
‑
7.5
,例如
6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4
或
7.5
等,但不限于以上所列举的数值,上述数值范围内其他未列举的数值同样适用
。
[0017]优选地,所述填料在使用前经过活化和平衡
。
[0018]优选地,所述对填料淋洗的淋洗液为水和
/
或甲醇
。
[0019]优选地,所述洗脱的洗脱液包括有机溶剂和有机酸,所述有机溶剂包括甲醇
、
乙醇或乙腈中任意一种或至少两种的组合
。
[0020]优选地,所述有机溶剂为甲醇和乙腈的组合
。
[0021]优选地,所述有机酸包括甲酸和
/
或乙酸
。
[0022]上述特定有机溶剂组合能够有效提高检测的灵敏度,并且能够有效实现对多巴胺
、
肾上腺素
、
去甲肾上腺素
、
甲氧基肾上腺素
、
甲氧基去甲肾上腺素和3‑
甲氧酪胺六种样品的同时检测
。本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法,其特征在于,所述前处理方法包括以下步骤:将待测样品依次与内标溶液
、pH
调节剂
、
填料混合,之后对填料进行淋洗
、
洗脱,收集洗脱液,即完成前处理;所述前处理方法采用核酸提取仪进行
。2.
根据权利要求1所述的儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法,其特征在于,所述待测样品包括多巴胺
、
肾上腺素
、
去甲肾上腺素
、
甲氧基肾上腺素
、
甲氧基去甲肾上腺素或3‑
甲氧酪胺中任意一种或至少两种的组合,优选多巴胺
、
肾上腺素
、
去甲肾上腺素
、
甲氧基肾上腺素
、
甲氧基去甲肾上腺素和3‑
甲氧酪胺的组合
。3.
根据权利要求1或2所述的儿茶酚胺类化合物的检测前处理方法,其特征在于,所述填料包括磁性
WCX、
磁性
MAX、
磁性
HLB
或磁性
PCX
中任意一种或至少两种的组合;优选地,所述填料为磁性
WCX
和磁性
MAX。4.
根据权利要求1‑3中任一项所述的儿茶酚胺类化合物的检测前处理方...
【专利技术属性】
技术研发人员:请求不公布姓名,请求不公布姓名,
申请(专利权)人:美罗医药科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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