一种巴河藕的纯度鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种巴河藕的纯度鉴定方法

【技术实现步骤摘要】
一种巴河藕的纯度鉴定方法


[0001]本专利技术属于生物鉴定领域，特别涉及一种巴河藕的纯度鉴定方法
。

技术介绍

[0002]巴河藕，湖北省浠水县巴河镇特产，中国国家地理标志产品
。
巴河莲藕被视为鄂东四大名产之一，谚语“黄州豆腐
、
巴河藕
、
武昌鳊鱼
、
鄂城酒”，很好地说明了这一点
。2010
年
04
月
06
日，原国家质检总局批准对“巴河莲藕”实施地理标志产品保护
。
巴河莲藕藕身呈长圆筒形，略呈方形，面上有一平缓凹槽，表皮白色，滋润如玉，无铜锈斑纹
。
每支藕一般为三节，节间粗壮，平均节长
20
厘米
。
嫩藕味甜
、
质脆
、
化渣
、
水分足；清炒做菜熟而不黑；老熟藕炖煮，具有易粉
、
汤白
、
味甜
、
质地绵粉
、
香气浓厚等特点
。
具有极大的市场开发应用潜力
。
而在开发应用过程中，品种权的保护具有重要意义
。
[0003]种子是农业生产的第一物质要素，其纯度是品种一致性的重要保障，也是衡量种子质量的一项重要指标
。
种子纯度与农业经济效益关系密切，低纯度的种子将会严重影响品种的产量和品质，极大降低经济效益，严重制约农业产业化发展/>。
因此，纯度鉴定是种子实际生产中不可或缺的步骤，是保障作物高产
、
高效的必要条件，对农业产业可持续发展具有重要意义
。
[0004]同一区域种植的巴河藕，也会存在不同程度的变异，在基因上体现在图谱中条带的位置，数量不同等情况，而在表型上的体现则可能是花色，藕的大小，莲蓬大小形状不一，变异植株则不属于巴河藕，因此需要测定巴河藕的纯度
。
目前，对巴河藕的纯度鉴定主要依靠形态学标记
、
细胞学标记和生物化学标记等对遗传多样性进行分析，这些标记均有各种缺点
。
[0005]因此，如何设计一种简单快速
、
准确
、
高效的巴河藕纯度鉴定方法，是本领域技术人员亟待解决的问题
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种巴河藕的纯度鉴定方法，实现快速
、
高效
、
低成本鉴定巴河藕纯度的目的
。
[0007]为了解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]提供一种巴河藕的纯度鉴定方法，包括以下步骤：
[0009]1)
取多个待鉴定品种纯度的巴河藕样本，干燥后提取样品基因组；
[0010]2)
使用引物组对样品基因组进行
PCR
扩增，得到样品
PCR
产物，进行电泳分析，统计电泳条带得到样品图谱；
[0011]所述引物组为：
[0012]NL
‑
P8F:5'
‑
CTTCGCAGAGTTCATCCACA
‑
3'(SEQ ID NO:1)
[0013]NL
‑
P8R:5'
‑
TCTTGTCAGGCTAACGCAAG
‑
3'(SEQ ID NO:2)
[0014]NL
‑
P35F:5'
‑
TTTGAACTGAGTCGTGTCCG
‑
3'(SEQ ID NO:3)
[0015]NL
‑
P35R:5'
‑
CTCCAGTCGGTGCCATATTT
‑
3'(SEQ ID NO:4)
[0016]NL
‑
P23F:5'
‑
AGAACGTTGATGGGAAGGTG
‑
3'(SEQ ID NO:5)
[0017]NL
‑
P23R:5'
‑
CCGACTACGATACCGGAAAA
‑
3'(SEQ ID NO:6)
[0018]NL
‑
15F:5'
‑
CACCCTTCAACGGTTCCTAA
‑
3'(SEQ ID NO:7)
[0019]NL
‑
15R:5'
‑
TTCAGTTGTGCCTATCGCTG
‑
3'(SEQ ID NO:8)
[0020]NL
‑
2F:5'
‑
GCAGACGAACTGCCTCTACC
‑
3'(SEQ ID NO:9)
[0021]NL
‑
2R:5'
‑
AACTTCCCTCCGCCATTTTA
‑
3'(SEQ ID NO:10)
[0022]NL
‑
71F:5'
‑
TACCAACATAGGTGGGTGGG
‑
3'(SEQ ID NO:11)
[0023]NL
‑
71R:5'
‑
TTGGTAAGCGGAATTTGGAC
‑
3'
；
(SEQ ID NO:12)
[0024]3)
将大多数巴河藕样本共同具有的谱带作为巴河藕的特征谱带，每个样品的谱带与特征谱带进行比较，样本间差异等位基因数
≥1
，判定为不同品种；样本间差异等位基因数＝0，判定为相同品种；其中纯度＝相同品种的个体数
/
待鉴定的个体总数
×
100
％
。
[0025]按上述方案，所述步骤
1)
中，待鉴定品种纯度的巴河藕样本个数为
10
个以上
。
[0026]按上述方案，所述步骤
1)
中，取待鉴定品种纯度的巴河藕的嫩叶片，将待鉴定样品置于装有变色硅胶的自封袋中保存七天以上至完全干燥
。
[0027]按上述方案，所述步骤
2)
中，使用
TIANGEN
‑
305
型试剂盒提取样品基因组
。
[0028]按上述方案，所述步骤
2)
中，
PCR
扩增的反应程序为：
94℃
预变性
5min
，
94℃
变性
30s
，退火
30s
，
72℃
延伸
30s
，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种巴河藕的纯度鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)
取多个待鉴定品种纯度的巴河藕样本，干燥后提取样品基因组；
2)
使用引物组对样品基因组进行
PCR
扩增，得到样品
PCR
产物，进行电泳分析，统计电泳条带得到样品图谱；其中所述引物组包括6对引物，6对引物的序列表如
SEQ ID NO
：1‑
12
所示；
3)
将大多数巴河藕样本共同具有的谱带作为巴河藕的特征谱带，每个样品的谱带与特征谱带进行比较，样本间差异等位基因数
≥1
，判定为不同品种；样本间差异等位基因数＝0，判定为相同品种，其中纯度＝相同品种的个体数
/
待鉴定的个体总数
×
100
％
。2.
根据权利要求1所述的纯度鉴定方法，其特征在于，所述步骤
1)
中，待鉴定品种纯度的巴河藕样本个数为
10
个以上
。3.
根据权利要求1所述的纯度鉴定方法，其特征在于，所述步骤
1)
中，取待鉴定品种纯度的巴河藕的嫩叶片，将待鉴定样品置于装有变色硅胶的自封袋中保存七天以上至完全...

【专利技术属性】
技术研发人员：刁英，王壮，胡中立，郑兴汶，
申请(专利权)人：武汉轻工大学，
类型：发明
国别省市：