一种内质网靶向脂质体制造技术

本发明专利技术属于药物制剂技术领域，具体涉及一种提高光动力疗法疗效的内质网靶向脂质体

【技术实现步骤摘要】
一种内质网靶向脂质体、及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于药物制剂
，具体涉及一种提高光动力疗法疗效的内质网靶向脂质体
、
及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术
。
[0003]光动力疗法（
PDT
）因其非侵入性
、
全身毒性低
、
适应性好和可重复操作等优点，已被临床用于皮肤肿瘤
、
口腔癌和食管癌等肿瘤的治疗
。PDT
的基本原理是光敏剂
、
氧和光源之间的光化学反应
。
然而目前光动力疗法存在局限性以致疗效较低，主要体现为以下三点：（1）氧气：光动力疗法依赖光敏剂消耗氧气生成单线态氧（
ROS
）杀伤肿瘤，然而肿瘤本身为缺氧微环境，氧气浓度低，且光敏剂对氧气的消耗进一步加剧肿瘤的缺氧，使光动力疗法疗效降低；（2）光源：目前大多数光敏剂多为可见光或紫外光激活，光源穿透有限，尽管部分小分子光敏剂可以直接被近红外光（
700
‑
1100 nm
）激活，但是与其他被可见光或紫外光激活的光敏剂相比，
ROS
生成效率较低；（3）光敏剂：光敏剂产生的
ROS
半衰期非常短（
10
‑
320 ns
）且在细胞内扩散有限（
10
‑
55 nm
），引起的内质网应激较弱，杀伤有限
。
因此需要寻找有效策略解决以上问题以提高光动力疗法疗效
。
[0004]目前已有多项研究针对上述三项进行了改善
。
通过对光敏剂进行化学修饰提高水溶性或实现内质网靶向，但激发光敏剂的光源穿透有限，因此有研究考虑联用上转换纳米粒（
UCNP
）
。
利用
UCNP
的光源转化，将近红外区光转化为可见光或紫外光激发光敏剂，然而受肿瘤缺氧微环境影响，光动力疗法疗效仍然受限，因此考虑联用产氧剂为光敏剂提供氧气，通过化学修饰联用
Pt(IV)
（产氧剂，需紫外光激发）
、
光敏剂
Ce6
和
UCNP
进一步提高光动力疗法疗效
。
然而
UCNP
表面可修饰基团有限，若要实现较好的光动力疗法疗效，需要大量修饰光敏剂的
UCNP
，可能引起潜在的细胞毒性
。
[0005]因此需要开发一种剂型，在保证生物相容性的同时，解决上述三项局限性提高光动力疗法疗效
。

技术实现思路

[0006]为了克服光动力疗法的局限性，本专利技术设计并制备了一种可以包裹
Pt(IV)、
光敏剂和
UCNP
的内质网靶向药物递送系统
。
本专利技术制备了可靶向内质网的脂质体（
PBUP
‑
Lip
），首先，使用更具穿透性的近红外
II
区光激发
UCNP
，联合其光转化，实现更加高效的药物激发；
Pt(IV)
作为产氧剂为光敏剂提供氧气，提高光动力疗法疗效，降低肿瘤缺氧环境对光动力疗法的限制；其次，脂质体的高负载率和高生物相容性可降低生物毒性，另外其表面可进行内质网靶向修饰，通过内质网靶向实现
ROS
更多的内质网蓄积，引起更强的内质网应激，共同提高光动力疗法的疗效和抗肿瘤效果
。
该专利技术与现有用于光动力疗法的纳米制剂比
较，通过脂质体进行内质网修饰和包裹
UCNP
，一方面，脂质体的内质网靶向，使纳米制剂聚集于内质网中，在近红外
II
区光激发和
UCNP
的光源转化作用下，
Pt(IV)
为光敏剂提供氧气，产生
ROS
可直接作用于内质网，引起高效的内质网应激，提升光动力疗法疗效，达到了意想不到的效果，具有明显的创造性
。
[0007]本专利技术第一方面，提供一种脂质体，包括空白脂质体和活性物质，所述空白脂质体中包含二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
‑
聚乙二醇
2000
‑
pardaxin
肽（
DSPE
‑
PEG
2000
‑
PAR
），所述活性物质为四价铂（
Pt(IV)
）
、
光敏剂和上转换纳米粒（
UCNP
）
。
[0008]进一步的，所述二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
‑
聚乙二醇
2000
‑
pardaxin
肽合成步骤为
10 mg pardaxin
肽（
PAR
，南京莱昂生物科技有限公司购买）溶解在
3 mL 无水二甲基甲酰胺中，加入
3.41 mg
二碳酸二叔丁酯，氮气条件下避光冰浴
250 rpm
搅拌
12
小时，随后加入1‑
乙基
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基
)
碳酰二亚胺 2.88 mg
和
N
‑
羟基琥珀酰亚胺
3.46 mg
室温
250 rpm
搅拌2小时，加入二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
‑
聚乙二醇
2000
‑
氨基（
DSPE
‑
PEG
2000
‑
NH2） 8.39 mg
，室温
250 rpm
搅拌
24
小时
。
加入
1mL 1M
盐酸
250 rpm
搅拌2小时，使用
1M NaOH
调节
pH
至
7.4
，蒸馏水透析
48
小时，冷冻干燥后得终产物
。
[0009]如图5所示，通过对特征基团的归属，即：化学位移
δ 6.81
–
8.23 ppm
（红色方框）处的信号归因于酰胺键的特征峰；化学位移
δ 4.46
–
4.65 ppm
（紫色圆圈）归因于
PAR
肽中酰胺键附近的次甲基信号峰，验证了
DSPE
‑
PEG
2000
‑
PAR
的成功合成
。
相关物质结构式为：
DSP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种脂质体，包括空白脂质体和活性物质，其特征是，所述空白脂质体中包含二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
‑
聚乙二醇
2000
‑
pardaxin
肽，所述活性物质为四价铂
、
光敏剂和上转换纳米粒
。2.
如权利要求1所述的脂质体，其特征是，所述空白脂质体为磷脂，胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
‑
聚乙二醇
2000
‑
pardaxin
肽
。3.
如权利要求2所述的脂质体，其特征是，磷脂
、
胆固醇
、DSPE
‑
PEG
2000
‑
PAR
的比例为
50:6.25:1。4.
如权利要求1所述的脂质体，其特征是，所述光敏剂包括
I
型光敏剂和
II
型光敏剂中的一种或多种
。5.
如权利要求4所述的脂质体，其特征是，所述光敏剂为硼二吡咯亚甲基染料
。6.
一种脂质体，包括空白脂质体和活性物质，其特征是，所述空白脂质体为蛋黄卵磷脂
、
胆固醇和
DSPE
‑
PEG
2000
‑
PAR
，所述活性物质为四价铂
、
硼二吡咯亚甲基染料和上转换纳米粒
。7.
一种脂质体的制备方法，其特征是，步骤如下：1）溶解
Bodipy
的氯仿溶液和
UCNP
溶液在冰浴避光条件下混合搅拌；2）步骤1）中加入乙醇溶解的蛋黄卵磷脂
、
胆固醇和
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张娜，高舒颖，刘永军，梁爽，牟伟伟，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：