一种苦豆子制造技术

本发明专利技术适用于植物基因工程技术领域，提供了一种苦豆子

【技术实现步骤摘要】
一种苦豆子SaATHB7基因的克隆及其应用


[0001]本专利技术属于植物基因工程
，尤其涉及一种苦豆子
SaATHB7
基因的克隆及其应用
。

技术介绍

[0002]土壤盐渍化一直以来是一个全球性问题
。
因此，研究盐胁迫和干旱胁迫对植物的影响，探索植物耐盐和耐旱机制，挖掘有利用价值的耐盐和耐旱基因，开发和利用耐盐和耐旱植物资源，提高作物耐盐和耐旱性对于盐碱地的改良具有重要意义
。
[0003]苦豆子
(Sophora alopecuroides.L)
为豆科槐属植物，别名：苦豆草或苦甘草等，为多年生草本
、
根茎地下芽旱生耐盐植物
。
其耐旱
、
耐盐碱性显著，是一个抗性基因丰富的基因资源库
。
因此，从苦豆子中筛选克隆耐盐和耐旱相关基因，分析其耐盐和耐旱性，阐明其相关功能，有助于对抗逆基因的进一步利用
。
[0004]同源结构域亮氨酸拉链
(HD
‑
Zip)
类转录因子目前仅在植物中发现，被认为可能是植物特有的转录因子，其存在与亮氨酸拉链序列紧密相连的同源结构域
。
根据
HD
‑
Zip
结构域的序列同源性
、
保守序列以及特定的内含子和外显子位置，可以将
48
个拟南芥
HD
‑
Zip
转录因子基因分为四个家族：
HD
‑
Zip I(17
个成员
)、HD
‑
Zip II(10
个成员
)、HD
‑
Zip III(5
个成员
)
和
HD
‑
Zip IV(16
个成员
)。HD
‑
Zip
转录因子家族是最大的植物特异性超家族之一，在应对非生物胁迫方面发挥着重要作用
。
[0005]通过利用苦豆子苗期受盐碱和干旱处理所获得的转录组数据，分析差异表达基因，筛选出苦豆子耐盐和耐旱相关基因，得到了同源结构域亮氨酸拉链类转录因子基因，命名为
SaATHB7。
在苦豆子中，到目前为止，关于
SaATHB7
基因的作用未见报道
。

技术实现思路

[0006]本专利技术实施例的目的在于提供一种苦豆子
SaATHB7
基因的克隆及其应用，旨在解决上述
技术介绍
中提出的问题
。
[0007]本专利技术实施例是这样实现的，一种苦豆子
SaATHB7
基因的克隆，所述苦豆子
SaATHB7
基因的氨基酸序列如
SEQ ID NO.2
所示，与植物抗逆性相关蛋白
SaATHB7
的核苷酸序列如
SEQ ID NO.1
所示
。
通过对模拟逆境胁迫
(NaCl
，
Na2HCO3和
PEG6000)
处理的苦豆子幼苗进行转录组测序，并对获得的差异表达基因进行分析，筛选出与盐胁迫相关的苦豆子基因，通过测序获得的基因核酸序列，对该基因进行生物信息学分析，发现该基因可能属于同源结构域亮氨酸拉链类转录因子家族基因，并命名为
SaATHB7
，并将苦豆子
SaATHB7
基因应用于植物耐盐和耐干旱方面
。
根据测序获得的序列设计克隆引物和定量引物，利用
RT
‑
PCR
技术检测该基因在逆境胁迫
(NaHCO3、NaCl
和
PEG)
条件下苦豆子不同组织中的表达量变化，以初步研究该基因在苦豆子逆境胁迫中的相应作用，同时对该基因构建植物过表达载体并成功转入野生型拟南芥中进行功能初步验证，结果表明该基因在拟南芥中过表达后能够提高拟南芥的耐盐性和耐旱性
。
[0008]本专利技术实施例提供的一种苦豆子
SaATHB7
基因的克隆及其应用，在本专利技术中，转
pCAMBIA3301
‑
SaATHB7
的拟南芥相对于野生型都表现出了明显的耐盐和耐旱能力
。
同时在本源植物苦豆子中，
SaATHB7
基因的表达也对盐胁迫和旱胁迫表现出了明显的响应，说明
SaATHB7
基因过量表达可以提高植物的抗逆性，特别是植物的抗盐和干旱胁迫的能力，这为我们通过基因工程技术提高作物的抗逆性提供了新的资源
。
附图说明
[0009]图1为苦豆子在对照和逆境胁迫
(NaCl
，
Na2CO3和
NaCl)
处理下根转录组结果中
SaATHB7
的表达水平
(FPKM)
；
[0010]图2为苦豆子
SaATHB7
基因在
1.2
％
NaCl
处理后
0h
，
4h
和
72h
的相对表达量；
[0011]图3为苦豆子
SaATHB7
基因在8％ PEG6000
处理后
0h
，
4h
和
72h
的相对表达量；
[0012]图
4SaATHB7
基因克隆胶图；
[0013]图5为构建
pCAMBIA3301
‑
SaATHB7
载体在大肠杆菌
DH5
α
中
PCR
结果；
[0014]图6为构建
pCAMBIA3301
‑
SaATHB7
载体在农杆菌
EHA105
中
PCR
结果；
[0015]图7为转
SaATHB7
基因拟南芥各株系相对定量分析；
[0016]图8为对照和
100mM NaCl
处理条件下野生型拟南芥和转
SaATHB7
基因拟南芥发芽阶段表型；
[0017]图9为对照和
100mM NaCl
处理条件下野生型拟南芥和转
SaATHB7
基因拟南芥子叶绿率统计；
[0018]图
10
为对照和
100mM NaCl
处理条件下野生型拟南芥和转
SaATHB7
基因拟南芥发芽阶段根长情况；
[0019]图
11
为对照和
100mM NaCl
处理条件下野生型拟南芥和转
SaATHB7
基因拟南芥发芽本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种苦豆子
SaATHB7
基因，其特征在于，所述苦豆子
SaATHB7
基因的氨基酸序列如
SEQ ID NO.2
所示，与植物抗逆性相关蛋白
SaATHB7
的核苷酸序列如
SEQ ID NO....

【专利技术属性】
技术研发人员：王庆钰，朱有成，闫帆，王英，刘雅婧，李景文，王乐，杨旭光，张鑫生，赵磊，高子为，马志鹏，刘旭，杨靖，董长欣，刘丽颖，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：