一种自组装的病毒样颗粒疫苗制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种自组装的病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用，该疫苗是将含氟短链连接至病毒囊膜蛋白上，通过表面活性剂的溶解作用，解离病毒表面蛋白后，基于氟链间的氟

【技术实现步骤摘要】
一种自组装的病毒样颗粒疫苗制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及药物制剂领域与生物医药
，涉及一种自组装的新型病毒样颗粒疫苗制备方法及其应用
。

技术介绍

[0002]传统的疫苗设计采用病原微生物及其代谢产物，经过人工减毒
、
脱毒
、
灭活等方法制成疫苗
。
当前的传统疫苗主要是指灭活疫苗和弱毒疫苗，其均存在着很难解决的弊端，如：潜在的生物安全风险；生产成本高，需要佐剂和多种免疫接种方式才能引起有效地免疫保护；灭活苗中不能引起免疫应答的部分不仅对预防感染没有作用，反而有可能减弱能引起免疫反应部分产生的保护作用；活疫苗既可以产生体液免疫又能产生细胞免疫，但是弱毒疫苗仅适用于少数病原，存在致病力并且有污染的风险
。
[0003]亚单位疫苗是利用微生物表面的一种或多种保护性抗原诱发机体产生保护性免疫应答，但亚单位疫苗通常免疫原性较弱，需要添加佐剂来增强免疫原性，常见的佐剂包括铝佐剂及弗氏佐剂
。
但是，亚单位疫苗存在疫苗批次之间差异大，生产成本高
、
重复性差
、
质量控制难的工艺问题；主要刺激
Th2
相关抗体的产生，只能诱导产生体液免疫应答；还有增加发生超敏反应的危险
。
[0004]核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因
(DNA
或
RNA)
直接导入机体细胞内，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防或治疗疾病的目的
。
核酸疫苗往往稳定性差
、
需要相应的递送载体才能发挥功效，并且可能存在与机体细胞基因组发生整合的风险
。
[0005]纳米疫苗作为一种新型疫苗，是目前疫苗领域的一大热点
。
纳米颗粒可作为抗原与佐剂的递送工具以及免疫增强剂来应用，不仅提高了抗原
、
佐剂的稳定性，而且增强了抗原的递呈效率和免疫原性；同时也能够靶向递呈抗原，具有缓释功能；重要的是，许多纳米颗粒自身具有免疫佐剂活性，可高效增强机体免疫应答
。
然而，纳米载体如纳米乳剂
、
脂质体
、
胶束
、PLGA、
硅纳米粒
、
金纳米棒等，也带来了很多问题，如抗原与佐剂负载效率低
、
载体在疫苗组分中占比过高；动物或人体内产生了针对纳米颗粒的抗体，例如
PEG
是获得公认的生物相容性良好的生物材料，但却被发现机体内产生了针对
PEG
的抗体；纳米载体的毒性与体内代谢问题也没有得到很好的解决
。
[0006]研究表明，通过将多种抗原表位融合表达到大分子载体上，可以进一步增强抗原的免疫原性
。
病毒样颗粒
(Virus
‑
like particle
，
VLP)
模仿天然病毒的大小
、
结构与组成，无感染及传染性，具备良好的免疫刺激能力，作为抗原载体比一般的大分子蛋白具有更多优势，被广泛用于疫苗的研究设计中
。
[0007]根据对病毒的结构蛋白分析，不同的膜蛋白在病毒的侵染过程中发挥不同的作用，且作用时间与空间上可能存在着差异
。
当前的病毒样颗粒的制备，多数以具备自组装能力的蛋白和膜蛋白的原核表达，借助自身的结合特性形成病毒样颗粒，结构稳定性不够，且无法发挥天然病毒膜蛋白的免疫原性和功能
。
以具备“亲氟驱动力”的短链为病毒样颗粒组
装作用力，可发挥更好的免疫效应，且可以通过内部的碳氟化合物增强纳米颗粒的稳定性；通过外部的膜蛋白能增强抗原的机体识别能力，提高机体免疫应答
。
将这些特性结合在一起，开发基于氟作用力的病毒样颗粒疫苗是合理的
。
然而，氟链的种类
、
化学偶联工艺
、
病毒裂解及组装这一系列的工艺参数需要进一步确定
。
[0008]综上所述，构建具有天然病毒囊膜蛋白结构的疫苗会具有比现有疫苗更好的保护效果，更加便捷的制备工艺，更具临床意义和应用前景
。

技术实现思路

[0009]专利技术目的：为了克服上述现有技术存在的缺陷，本专利技术所要解决的技术问题是提供了一种基于氟
‑
氟作用力的
、
自组装的结构稳定
、
易于储存
、
具有高度仿生
、
而且实现了病毒表面主要结构抗原的完整展示的新型病毒颗粒疫苗，有效解决了现有纳米疫苗设计中外源载体占比过大
、
抗原密度低
、
无抗原表面展示等传统问题
。
[0010]本专利技术还要解决的技术问题是提供了一种成本低
、
制备过程简单
、
制备过程安全的疫苗制备方法，有效解决了现有疫苗技术的成本高
、
制备过程复杂
、
生物安全性堪忧等问题
。
[0011]本专利技术最后还要解决的技术问题是提供了该疫苗在预防各种病毒方面的疾病中的应用
。
该病毒样颗粒疫苗可有效促进免疫细胞对抗原的识别摄取，细胞毒性低，具有良好的生物相容性，可高效刺激树突细胞成熟
、
激发更全面的免疫反应，提供更高效的免疫保护效果
。
[0012]技术方案：为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术提供了一种自组装的病毒样颗粒疫苗，所述病毒样颗粒疫苗包含抗原蛋白和聚氟内核，所述病毒样颗粒疫苗通过化学偶联法将抗原蛋白通过与含氟短链进行缀合自组装形成的病毒样颗粒
。
[0013]该新型病毒样颗粒疫苗包括与病毒囊膜蛋白相同的表面抗原和含氟短链的内聚体核心
。
这样的疫苗组分及结构模拟了流感病毒的天然空间构象，能充分发挥病毒样颗粒抗原的免疫原性，刺激产生更全面的免疫效力，提供更高效的免疫保护效果
。
[0014]其中，所述病毒样颗粒疫苗表面为病毒囊膜蛋白，内部为含氟短链组成的聚氟内核
。
[0015]优选地，所述病毒表面囊膜蛋白的来源包括：流感病毒
、
艾滋病病毒
、
蓝耳病毒
、
呼吸道合胞体病毒
、
腮腺炎病毒
、
埃博拉病毒
、
非洲猪瘟病毒
、
新城疫病毒
、
脊髓灰质炎病毒
、
狂犬病毒
、
甲型肝炎
、
乙型肝炎或丙型肝炎病毒
、
黄热病病毒
、
水痘带状疱疹病毒
、
乙型脑炎病毒
、
轮状病毒
、
诺如病毒
、
鼻病毒
、...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种自组装的病毒样颗粒疫苗，其特征在于，所述病毒样颗粒疫苗包含抗原蛋白和聚氟内核，所述病毒样颗粒疫苗通过化学偶联法将抗原蛋白通过与含氟短链进行缀合自组装形成的病毒样颗粒
。2.
根据权利要求1所述的一种自组装的病毒样颗粒疫苗，其特征在于，所述病毒样颗粒疫苗表面为病毒囊膜蛋白，内部为含氟短链组成的聚氟内核
。3.
根据权利要求1所述的一种氟驱动自组装的病毒样颗粒疫苗，其特征在于，所述病毒为囊膜病毒，包括流感病毒
、
艾滋病病毒
、
蓝耳病毒
、
呼吸道合胞体病毒
、
腮腺炎病毒
、
埃博拉病毒
、
非洲猪瘟病毒
、
新城疫病毒
、
脊髓灰质炎病毒
、
狂犬病毒
、
甲型肝炎
、
乙型肝炎或丙型肝炎病毒
、
黄热病病毒
、
水痘带状疱疹病毒
、
乙型脑炎病毒
、
轮状病毒
、
诺如病毒
、
鼻病毒
、
呼吸道合胞病毒
、
单纯疱疫病毒
、
乳头状瘤病毒
、
巨细胞病毒
、
西尼罗河病毒
、
登革热病毒
、
基孔肯雅病毒
、
东方马脑炎病毒
、
西方马脑炎病毒
、
委内瑞拉马脑炎
、
猪流行性腹泻病毒
、
猪传染性胃肠炎病毒
、
犬冠状病毒
、
猫冠状病毒
、
猪血凝性脑脊髓炎病毒
、
鼠肝炎病毒
、
鸡传染性支气管炎病毒
、
严重急性呼吸综合征相关病毒包括
SARS
病毒和其他类似
SARS
病毒
、
伪狂犬病病毒
、
鸡马立克氏病病毒
、
单纯疱疹病毒1型
、
单纯疱疹病毒2型
、
水痘
‑
带状疱疹病毒
、EB
病毒
、
人类巨细胞病毒
、
人类疱疹病毒6型
、
人类疱疹病毒7型
、
卡波济肉瘤相关病毒或其他囊膜病毒的各种亚型
。4.
根据权利要求
1~3
任一项所述的一种自组装的病毒样颗粒疫苗的制备方法，其特征在于，按如下的步骤进行：采用化学偶联法在病毒表面缀合含氟短链，利用非离子表面活性剂对病毒囊膜进行裂解
。5.
根据权利要求4所述的一种自组装的病毒样颗粒疫苗的制备方法，其特征在于，所述含氟短链的化学式为
NHS/COOH/CHO
‑
(CF2...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈刚，夏银河，
申请(专利权)人：康复大学筹，
类型：发明
国别省市：