一种适用于现场检测的猪禽流感快速检测方法技术

本发明专利技术公开了一种适用于现场检测的猪禽流感快速检测方法，属于生物检测技术领域，

【技术实现步骤摘要】
一种适用于现场检测的猪禽流感快速检测方法


[0001]本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种适用于现场检测的猪禽流感快速检测方法
。

技术介绍

[0002]猪流感病毒是引起猪呼吸道疾病的重要病原之一，尽管猪流感所导致的死亡率不高，与其他病毒性猪传染病相比
,
造成的经济损失也小得多，但长期以来，它一直是各国兽医学家和流感专家研究的热点，猪是禽
、
猪
、
人流感病毒唯一的共同易感宿主，
SIV
还可以感染人和禽，已有报道
H3N2
亚型
、H1N1
亚型
SIV
传染给人，而且目前猪流感病毒在国内猪群中流行的主要是
Hl
和
H3
亚型，而
SIV
所造成的病毒基因的重排以及人流感病毒株的流行，就使得疾病的监测和疫苗效果更加复杂化
。
[0003]目前检测猪禽流感的主要方式是荧光实时定量
RT
‑
PCR
，但荧光
P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种适用于现场检测的猪禽流感快速检测方法，其特征在于：所述具体检测方法如下：
S1、H1N1
猪流感病毒
cDNA
的制备，从处理过的灭活病毒中提取病毒
RNA
并反转录为
cDNA
，用作
LAMP
反应的模板；
S2、
引物的设计与合成，分析
H1N1
猪流感
HA、NA
基因序列，然后在
HA、NA
的保守区各设计2对引物；
S3、H1N1 LAMP
扩增反应，在
Bst DNA
聚合酶大片段和
DNA
模板混合液中，加双蒸水补足至
25uL
；混匀后
65℃
温浴
60min
，产物于
2.0
％的琼脂糖凝胶电泳分析；
S4、
灵敏度检验，取猪流感病毒部分片段阳性克隆，摇均后提取质粒，测定吸光值，换算为核酸含量，然后作
10
倍系列稀释
,
以各稀释物为模板分别进行
LAMP
扩增；
S5、
特异性检验，分别以
H9
型禽流感病毒
、
猪流感毒和猪圆环病毒作为待测样品，其中
H9
型禽流感病毒和猪流感病毒核酸反转录为
cDNA
后使用，以经
DEPC
处理的水为阴性对照，检验
LAMP
方法的特异性；
S6、
样...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡杰，许芳，蒋永青，黎一锋，凌远佳，高帅鹏，
申请(专利权)人：深圳市绿诗源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：