一种定量重组酶链置换活性的试剂与检测方法技术

本发明专利技术公开了一种定量重组酶链置换活性的试剂与检测方法

【技术实现步骤摘要】
一种定量重组酶链置换活性的试剂与检测方法


[0001]本专利技术属于生化
，具体来说涉及一种定量重组酶链置换活性的试剂与检测方法
。

技术介绍

[0002]重组酶
(recombinase)
是参与基因定位重组过程的酶
。
负责识别
、
切割特异的重组位点，并连接两个参与重组的分子
。
目前常用的重组酶包括
RecA
家族，
UvsX
家族等等
。
重组酶参与
PCR
扩增，主要参与置换引物与模板过程
。
[0003]目前没有重组酶链置换活性的相关检测试剂，现有技术公布的链置换的活性检测方法均对于
DNA
聚合酶，而没有具体检测重组酶的活性，故市面上销售的重组酶基本上是以浓度来标定蛋白，而不是以酶活单位来标注的，这样不能真实体现重组酶的活性
。
即使浓度不变，但是部分蛋白活性下降，无法质控蛋白活性
。
于是本专利技术提出一种能够定量重组酶链置本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种检测重组酶链置换活性的试剂，其特征在于，所述试剂包含：第一试剂组合物：包括第一寡核苷酸；第二试剂组合物：包括第二寡核苷酸；第三试剂组合物：包括剪切酶；第四试剂组合物：包括第三寡核苷酸；所述第一寡核苷酸与第二寡核苷酸可配对结合形成
DNA
双链，所述第一寡核苷酸中间位置具有剪切位点
、
剪切位点两侧碱基分别修饰有荧光基团与淬灭基团，所述第三寡核苷酸可配对结合到第二寡核苷酸
。2.
根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述剪切位点为
dU
；所述剪切酶为
USER
酶
。3.
根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，剪切位点为8‑
氧代鸟嘌呤
(OGG)
；剪切酶为
Fpg。4.
根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述荧光基团选自
FAM,VIC,CY5
或
ROX
，淬灭基团选自
BHQ1、BHQ2
或
TAMRA。5.
根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述第一寡核苷酸
、
第二寡核苷酸
、
第三寡核苷酸长度为
20
‑
50bp
，优选
30
‑
40bp。6.
根据权利要求5所述的试剂，其特征在于，所述第一寡核苷酸
、
...

【专利技术属性】
技术研发人员：周娇娇，王佑富，苏红，张茜，
申请(专利权)人：中元汇吉生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：