基孔肯雅病毒核酸分型的检测试剂及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种基孔肯雅病毒核酸分型的检测试剂及其应用，针对基孔肯雅病毒的三种基因型分别设计三组特异性引物探针，有效避免交叉干扰提升检测准确性。将PCR反应液、酶液以及引物探针进行预混，实现一管法快速检测。同时通过优化PCR反应液配方，添加硅藻土纳米颗粒以及NP‑40克服了反应液与酶液预混后稳定性下降的问题，使全预混体系可稳定保存，显著延长试剂使用效期以及扩增效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学，且特别涉及一种快速检测基孔肯雅病毒核酸分型的检测试剂及其应用。

技术介绍

1、基孔肯雅病毒（chikungunya virus，chikv）是一种单股正链rna病毒，归属于披膜病毒科甲病毒属，是导致基孔肯雅热（chikungunya fever）的病原体。该病毒产于热带非洲和亚洲，通过白纹伊蚊、埃及伊蚊等伊蚊属叮咬传播给人类，人和灵长类动物是基孔肯雅病毒的主要宿主，急性期患者、隐性感染者和感染病毒的灵长类动物是该病的主要传染源。基孔肯雅病毒会造成发热、皮疹及关节疼痛等症状，与登革热和寨卡病毒相似，因此容易误诊，虽然死亡率很低，但在蚊媒密度较高地区易形成大规模暴发和流行。

2、基孔肯雅病毒从序列上可分3个基因型，即西非型（west african）、中-东-南非洲型（ecsa）和亚洲型（asian）。这三种基因型在基因序列、地理分布等方面存在差异。亚洲型主要在亚洲地区传播，在东南亚等国家和地区曾有相关疫情出现。中-东-南非洲型主要在非洲、亚洲等地的热带及亚热带区域流行。非洲型在非洲大陆较为流行，非洲的一些国家和地区是其主本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基孔肯雅病毒核酸分型的检测试剂，包括PCR反应液，其特征在于，所述PCR反应液包括用于检测西非型病毒、中-东-南非洲型病毒和亚洲型基孔肯雅病毒分型的扩增引物对及探针；

2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，还包括内参的扩增引物对及探针，所述内参的扩增引物对及探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:10-12所示。

3.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述探针为寡核苷酸荧光探针，所述探针5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团，所述荧光报告基团选自FAM、ROX、Cy5或VIC，且任意两种所述探针的荧光报告基团不同；所述荧光淬灭...

【技术特征摘要】

1.一种基孔肯雅病毒核酸分型的检测试剂，包括pcr反应液，其特征在于，所述pcr反应液包括用于检测西非型病毒、中-东-南非洲型病毒和亚洲型基孔肯雅病毒分型的扩增引物对及探针；

2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，还包括内参的扩增引物对及探针，所述内参的扩增引物对及探针的核苷酸序列如seq id no:10-12所示。

3.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述探针为寡核苷酸荧光探针，所述探针5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团，所述荧光报告基团选自fam、rox、cy5或vic，且任意两种所述探针的荧光报告基团不同；所述荧光淬灭基团选自bhq1、bhq2或bhq3中的一种或多种。

4.如权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述pcr反应液还包括dna聚合酶、dntp、mg2+和缓冲液。

5.如权利要求4所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹旸，董璐，邹涛，李强，
申请(专利权)人：中元汇吉生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：