幽门螺杆菌的快速检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种幽门螺杆菌的快速检测方法及试剂盒，该方法包括以下步骤：

【技术实现步骤摘要】
幽门螺杆菌的快速检测方法及试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物检测
，特别涉及一种幽门螺杆菌的快速检测方法及试剂盒
。

技术介绍

[0002]幽门螺杆菌
(Helicobacter pylori
，
HP)
是一种革兰氏阴性细菌，在世界上一半以上人口的胃环境中存在
。
感染
HP
后可诱发胃炎
、
胃溃疡和十二指肠溃疡
。
据报道，约
90
％以上的十二指肠溃疡和
70
％以上的胃溃疡由幽门螺杆菌感染引起
。1994
年，世界卫生组织的分支机构国际癌症研究机构将幽门螺杆菌列为胃癌
(GC)
的一类致癌物，这是对最高致癌物的定义
。
此后，幽门螺杆菌被确定为粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的病原体
。
此外，幽门螺杆菌还涉及特发性血小板减少性紫癜
、
心血管疾病
、
慢性肝病
、
缺铁性贫血和糖尿病...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种幽门螺杆菌的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、
提取待测样品的核酸，获得核酸提取液；
S2、
将步骤
S1
得到的核酸提取液加入到
Lamp
协同
CRISPR
体系中，进行恒温反应，然后检测体系的荧光强度，根据荧光强度分析实现待测样品中的幽门螺杆菌的检测；其中，
Lamp
协同
CRISPR
体系中包含用以对幽门螺杆菌的
16S rRNA
基因进行恒温扩增的引物组
Primer mix
与
16S rRNA
基因互补的
16SrRNA
‑
SgRNA、AapCas12b
蛋白以及荧光探针
ssDNA
‑
FQ
；当待测样品中存在幽门螺杆菌时，幽门螺杆菌特有的
16S rRNA
基因被恒温扩增，在
16S rRNA
‑
SgRNA
的引导下，
AapCas12b
蛋白特异性的识别并切割
16S rRNA
基因，且
AapCas12b
蛋白对
ssDNA
‑
FQ
的反式切割活性被激活，
ssDNA
‑
FQ
被切割后，荧光报告分子与荧光淬灭基团分离，产生荧光信号，通过对荧光信号进行检测即可实现待测样品中幽门螺杆菌的检测
。2.
根据权利要求1所述的幽门螺杆菌的快速检测方法，其特征在于，所述
Lamp
协同
CRISPR
体系包括引物组
Primer mix、Reaction buffer、Mg
2+
、dNTP、AapCas12b
蛋白
、16S rRNA
‑
SgRNA、
牛磺酸
(Taurine)、ssDNA
‑
FQ、H2O
和聚合酶
。3.
根据权利要求1所述的幽门螺杆菌的快速检测方法，其特征在于，
16SrRNA
的基因序列如
SEQ ID NO.1
所示
。4.
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈虹均，宋一之，孙义祥，张理仁，张翀宇，李原，吴慧敏，
申请(专利权)人：重庆国科医创科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：